スポットカードを用いた乾燥喀痰の PCR 法

抗結核 (TB) 薬の耐性に関連する結核菌遺伝子の変異の分子検査は、すでに標準的な検査室の結核診断の一部となっています。

これにより、耐性の可能性を早期に知ることができ、不必要な治療や、治療の失敗や治療に関連する毒性の可能性を防ぐことができます。

分子検査による診断は、高所得で結核の流行が少ない国で広く普及しています。 しかし、低所得国には、遺伝子型または表現型のいずれかで感受性をテストする広範な施設がありません。 スポット カードで収集された喀痰に対して分子診断を実行すると、分子検査へのアクセスが改善される可能性があります。

この研究では、結核の検出、同定、および感受性予測のための複数の分子検査に、採取してスポットカードに載せた喀痰を使用できるかどうかを調べます。 これは、スポット カードからの喀痰の DNA 抽出が可能であることを意味します。

この研究は、ハーレン州ビアトリクスオールトの大学医療センター フローニンゲン (UMCG) の結核部門の成人患者を対象としたパイロット研究です。 生成された喀痰を採取し、スポット カード上で乾燥させ、カードからの DNA 抽出をテストします。 結核菌の分子検出が陽性の場合、追加の検査が行われます。 耐性感受性に関連する遺伝子の変異の有無に基づいて、さまざまな分子技術が実行され、可能な変異が特定されます。 さらに、患者がそうするように痰が収集されます。 細菌負荷の低い喀痰サンプルもテストでき、手順の感度をテストできます。

最後に、細菌負荷を識別するために、RNA 検出などの技術がテストされます。 これは、複数の患者サンプルが収集された場合に実行できます。

被験者は、年齢、標準的なTDMへの参加、および薬物使用に基づいて選択されます。 人口統計学的パラメータが分析されます。 喀痰は週2回（火曜日と金曜日）採取します。