Методы ПЦР высушенной мокроты с использованием карты Spotcard

Молекулярное тестирование на наличие мутаций в генах M.tuberculosis, связанных с устойчивостью к противотуберкулезным (ТБ) препаратам, уже является частью стандартной лабораторной диагностики ТБ.

Это подразумевает более раннее знание возможной резистентности и, таким образом, предотвращает ненужное лечение и вероятность неэффективности лечения или токсичности, связанной с лечением.

Молекулярно-лабораторная диагностика широко распространена в странах с высоким уровнем дохода и низкой эндемичностью по туберкулезу. Однако в странах с низким уровнем дохода отсутствуют широко распространенные средства для тестирования на генотипическую или фенотипическую восприимчивость. Выполнение молекулярной диагностики мокроты, собранной с помощью точечной карты, может улучшить доступность молекулярного тестирования.

В этом исследовании изучается возможность использования мокроты, собранной и нанесенной на точечные карты, для множественных молекулярных тестов для выявления, идентификации и прогнозирования восприимчивости к ТБ. Это означает, что извлечение ДНК из мокроты из контрольной карты должно быть осуществимым.

Исследование представляет собой пилотное исследование с участием взрослых пациентов туберкулезного отделения Медицинского центра Университета Гронингена (UMCG) Беатриксорд, Харен в качестве испытуемых. Полученная мокрота будет собрана, высушена на точечных картах, и будет проверено выделение ДНК с карты. Если молекулярное обнаружение бактерий туберкулеза будет положительным, будут проведены дополнительные тесты. Основываясь на наличии/отсутствии мутаций в генах, связанных с восприимчивостью к резистентности, можно предсказать различные молекулярные методы для выявления возможных мутаций. Кроме того, мокрота будет собираться по мере ее выделения. Образцы мокроты с низкой бактериальной нагрузкой также могут быть протестированы и могут проверить чувствительность процедуры.

Наконец, для определения бактериальной нагрузки будут протестированы такие методы, как обнаружение РНК. Это можно сделать, если было собрано более одной выборки пациентов.

Субъекты будут отобраны по возрасту, участию в стандартных TDM и употреблению наркотиков. Будут проанализированы демографические параметры. Образцы мокроты будут браться два раза в неделю (во вторник и пятницу).