PCR-technieken van gedroogd sputum met behulp van een spotcard

Moleculair testen op mutaties in M. tuberculosis-genen die verband houden met resistentie tegen tuberculosemedicijnen (tbc) maakt al deel uit van de standaard tbc-diagnose in het laboratorium.

Dit impliceert eerdere kennis van mogelijke resistentie en voorkomt zo onnodige behandeling en de kans op falen van de behandeling of behandelingsgerelateerde toxiciteit.

De moleculaire laboratoriumdiagnostiek is wijd verspreid in landen met een hoog inkomen en een laag tbc-gehalte. De landen met een laag inkomen hebben echter geen wijdverbreide faciliteiten om te testen op gevoeligheid, zowel genotypisch als fenotypisch. Het uitvoeren van moleculaire diagnostiek op sputum verzameld met een spotkaart kan de toegankelijkheid van moleculaire testen verbeteren.

Deze studie onderzoekt of sputum dat is verzameld en op spotkaarten wordt geplaatst, kan worden gebruikt voor meerdere moleculaire tests voor de detectie, identificatie en voorspelling van de vatbaarheid voor tuberculose. Dit betekent dat DNA-extractie van het sputum van de spotkaart mogelijk moet zijn.

De studie is een pilotstudie met als proefpersoon volwassen patiënten van de tuberculose-afdeling van het Universitair Medisch Centrum Groningen (UMCG) Beatrixoord, Haren. Het geproduceerde sputum wordt verzameld, gedroogd op spotkaarten en DNA-extractie van de kaart wordt getest. Als de moleculaire detectie positief is voor de tuberculosebacterie, zullen aanvullende tests worden uitgevoerd. Op basis van de aanwezigheid/afwezigheid van mutaties in de genen geassocieerd met resistentie kan gevoeligheid vooraf worden bepaald, verschillende moleculaire technieken zullen worden uitgevoerd om mogelijke mutaties te identificeren. Bovendien zal sputum worden verzameld als patiënten dit produceren. Sputummonsters met een lage bacteriële belasting kunnen ook worden getest en kunnen de gevoeligheid van de procedure testen.

Ten slotte zullen technieken zoals RNA-detectie worden getest om de bacteriële belasting te identificeren. Dit kan worden gedaan als er meer dan één steekproef van patiënten is verzameld.

Onderwerpen worden geselecteerd op leeftijd, deelname aan standaard TDM en drugsgebruik. Demografische parameters zullen worden geanalyseerd. Twee keer per week (op dinsdag en vrijdag) wordt er sputum afgenomen.