Techniques de PCR d'expectorations séchées à l'aide d'un Spotcard

Les tests moléculaires pour les mutations des gènes de M. tuberculosis associées à la résistance aux médicaments antituberculeux (TB) font déjà partie du diagnostic standard de la TB en laboratoire.

Cela implique une connaissance plus précoce d'une éventuelle résistance et évite ainsi un traitement inutile et le risque d'échec du traitement ou de toxicité liée au traitement.

Le diagnostic de laboratoire moléculaire est largement répandu dans les pays à revenu élevé et à faible endémie tuberculeuse. Cependant, les pays à faible revenu manquent d'installations généralisées pour tester la sensibilité, qu'elle soit génotypique ou phénotypique. La réalisation de diagnostics moléculaires sur des crachats recueillis avec une carte de localisation pourrait améliorer l'accessibilité aux tests moléculaires.

Cette étude examine si les crachats recueillis et placés sur des fiches peuvent être utilisés pour de multiples tests moléculaires pour la détection, l'identification et la prédiction de la sensibilité à la tuberculose. Cela signifie que l'extraction de l'ADN des crachats de la carte de points devrait être faisable.

L'étude est une étude pilote avec des patients adultes du département de la tuberculose du centre médical universitaire de Groningen (UMCG) Beatrixoord, Haren comme sujets. Les crachats produits seront collectés, séchés sur des cartes de points et l'extraction d'ADN de la carte sera testée. Si la détection moléculaire est positive pour la bactérie de la tuberculose, des tests supplémentaires seront effectués. Sur la base de la présence/absence de mutations dans les gènes associés à la susceptibilité à la résistance peut être préditec, différentes techniques moléculaires seront réalisées pour identifier les mutations possibles. De plus, les crachats seront recueillis au fur et à mesure que les patients en produiront. Des échantillons d'expectorations à faible charge bactérienne peuvent également être testés et peuvent tester la sensibilité de la procédure.

Enfin, des techniques comme la détection d'ARN seront testées pour identifier la charge bactérienne. Cela peut être fait si plus d'un échantillon de patients a été recueilli.

Les sujets seront sélectionnés en fonction de l'âge, de la participation au TDM standard et de la consommation de drogues. Les paramètres démographiques seront analysés. Des échantillons de crachats seront prélevés deux fois par semaine (le mardi et le vendredi).