A szárított köpet PCR technikái Spotcard segítségével

Az M. tuberculosis gének mutációinak vizsgálata, amelyek a tuberkulózis elleni (TB) gyógyszerek rezisztenciájával kapcsolatosak, már a standard laboratóriumi TB-diagnosztika részét képezik.

Ez feltételezi a lehetséges rezisztencia korábbi ismeretét, és így megakadályozza a szükségtelen kezelést és a kezelés sikertelenségének vagy a kezeléssel összefüggő toxicitás lehetőségét.

A molekuláris laboratóriumi diagnosztika széles körben elterjedt a magas jövedelmű, alacsony tbc endémiás országokban. Az alacsony jövedelmű országok azonban nem rendelkeznek széles körben elterjedt lehetőséggel a fogékonyság tesztelésére, legyen az akár genotípusos, akár fenotípusos. A spotkártyával gyűjtött köpet molekuláris diagnosztikájának elvégzése javíthatja a molekuláris vizsgálatok hozzáférhetőségét.

Ez a tanulmány azt vizsgálja, hogy az összegyűjtött és a spotkártyákra helyezett köpet felhasználható-e több molekuláris teszthez a TB kimutatására, azonosítására és érzékenységének előrejelzésére. Ez azt jelenti, hogy megvalósíthatónak kell lennie a köpet DNS-kivonásának a spotkártyáról.

A tanulmány egy kísérleti vizsgálat a Groningeni Egyetemi Orvosi Központ (UMCG) Beatrixoord, Haren tuberkulózis osztályának felnőtt pácienseivel. A keletkezett köpet összegyűjtik, spotkártyákon szárítják, és tesztelik a kártyáról történő DNS-kinyerést. Ha a molekuláris kimutatás pozitív a tuberkulózisbaktériumra, további vizsgálatokat kell végezni. A rezisztencia érzékenységgel összefüggő mutációk jelenléte/hiánya alapján a génekben előre jelezhető, különböző molekuláris technikákat alkalmaznak a lehetséges mutációk azonosítására. Ezenkívül a köpet is összegyűjti, amint a betegek termelik. Alacsony bakteriális terhelésű köpetminták is vizsgálhatók, és az eljárás érzékenysége is tesztelhető.

Végül az olyan technikákat, mint az RNS-detektálás, tesztelik a baktériumterhelés azonosítására. Ez akkor tehető meg, ha egynél több betegmintát gyűjtenek.

Az alanyokat az életkor, a standard TDM-ben való részvétel és a droghasználat alapján választják ki. A demográfiai paramétereket elemezzük. A köpetmintát hetente kétszer (kedden és pénteken) veszik.