Efecto del Omega 3 como complemento inmunomodulador del desbridamiento periodontal

Definición de la muestra: Pacientes mayores de 18 años ingresados ​​en la Unidad de Diagnóstico de la Facultad de Odontología (DUFD), campus Viña del Mar de la Universidad Nacional Andrés Bello (UNAB) durante el año 2016, con diagnóstico de periodontitis crónica moderada o severa, cumpliendo con los criterios de inclusión y exclusión y aceptando voluntariamente participar del presente trabajo de investigación, firmando un consentimiento informado. Los participantes elegidos fueron informados de la naturaleza de la investigación, los riesgos potenciales y la compensación por participar en el estudio, obteniendo el consentimiento informado de cada paciente. Cálculo del tamaño de la muestra: Para calcular el tamaño de muestra mínimo necesario para la constitución de los grupos de control e intervención, se consideró como valores fijos la varianza de la diferencia de profundidad de sondaje, que se basó en los resultados descritos anteriormente. Considerando lo anterior y utilizando un nivel de significancia del 5%, una potencia estadística del 80% y un error de estimación de 1 mm, se obtuvieron al menos 7 pacientes por cada grupo, dando un total de 14 sujetos mínimos a estudiar. Protocolo y examen clínico: De un total de 31 pacientes seleccionados, 20 de los que cumplían con los criterios de inclusión fueron asignados aleatoriamente por el coordinador del estudio a uno de los dos grupos mediante una secuencia de generación aleatoria mediante un software. Dos sujetos se negaron a participar en la investigación. De esta manera, se formaron dos grupos para investigar: un grupo de intervención (8 sujetos) que recibió SRP más 2 g de un Omega una vez al día durante 90 días inmediatamente después de la SRP, y un grupo de control (10 sujetos) que recibió SRP más placebo en las mismas condiciones que el grupo de intervención. Un sujeto del grupo de control y dos de intervención, se perdieron durante los seis meses de control. Finalmente, quince pacientes que ingresaron al estudio también lo completaron. No se observaron problemas de cumplimiento, todos los pacientes siguieron el protocolo del estudio. Ninguno de los sujetos informó efectos adversos específicos.

Aleatorización: Solo el investigador principal, quien realizó la aleatorización utilizando el programa Epidat 4.0, tenía conocimiento sobre el contenido de los envases y el grupo al que pertenecía cada paciente en estudio, por lo tanto, se encargó de rotular los envases, logrando en de esta forma, los colaboradores y participantes en la investigación no conocieron su contenido hasta después de finalizado el estudio. Estandarización y calibración: Los datos fueron recolectados utilizando instrumentos e insumos de las mismas marcas comerciales, en una sola silla, bajo la misma iluminación y por un solo examinador en el caso de datos clínicos y otro examinador para variables microbiológicas. El proceso completo de PCR fue realizado por un bioquímico perteneciente al laboratorio de microbiología sede Santiago de la UNAB. Se realizó una calibración interexaminador, donde el único examinador clínico fue calibrado por un especialista en periodoncia, registrando los datos obtenidos en una hoja de calibración. Para ello se evaluaron un mínimo de 10 sujetos, en los cuales se seleccionó aleatoriamente un sitio de un diente perteneciente a cada cuadrante. Periodontopatógenos: Se consideró la presencia de periodontopatógenos al exponer el gel de agarosa de la electroforesis a la luz ultravioleta, se observó una banda en el sitio de los 197 pares de bases (pb) en el carril que poseía la muestra de bioflora subgingival del paciente de Pg, 316 pares de bases para Td, 745 para Tf y 167 para Fn. Toma de datos e instrumento: Previo a la toma de datos, a todos los sujetos pertenecientes al estudio se les solicitó una radiografía panorámica con fines diagnósticos. Posteriormente se realizó el examen periodontal registrando las variables clínicas antes descritas en una ficha clínica. Obtención de muestras microbiológicas: El examen microbiológico se realizó antes de la SRP en ambos grupos. La recolección de muestras microbiológicas se basó en un protocolo que se utiliza en la Universidad de Chile. Utilizando conos de papel estériles número 40, se tomó una muestra de biofilm subgingival del sitio con mayor CAL, dentro de aquellos con DP ≥ 5mm, y se realizó una instrucción de higiene oral. Previo a la recolección del biofilm subgingival, se limpió la zona con una gasa estéril para eliminar el biofilm supragingival. Luego, con una pinza, se tomó un cono de papel y se colocó su punta en el surco del sitio de estudio durante 20 segundos, para asegurar la absorción del líquido crevicular y biopelícula subgingival. Cada muestra biológica obtenida fue suspendida en un tubo Eppendorf con 1 ml de agua destilada y transportada en refrigerador a una temperatura de 4°C aproximadamente, en un tiempo no mayor a 3 horas, para luego ser almacenada temporalmente a -80°C, hasta su transferencia y posterior extracción de ácido desoxirribonucleico (ADN) y procesamiento mediante técnica PCR. El tiempo entre el muestreo y la extracción de ADN no superó las 48 horas, para evitar el deterioro del material biológico. Tratamiento Periodontal: Una vez finalizada la recolección preliminar de todas las variables, se procedió al tratamiento periodontal no quirúrgico, comenzando con descontaminación supra y subgingival de toda la boca, utilizando un piezo eléctrico (DTE®, Guilin Woodpecker Medical Instrument Co., Ltd. , Guilin, Guangxi, República Popular de China), seguido de alisado radicular en sitios que presenten PD ≥ 5 mm y CAL ≥ 4 mm, utilizando curetas Gracey (Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, Illinois (IL), EE. UU.). Esta terapia se realizó en todos los pacientes, tanto en el grupo de intervención como en el de control, bajo protocolo de tratamiento de boca completa, en 1 o 2 sesiones de trabajo, con una duración de 1 a 2 horas, lográndose el tratamiento en 24 horas. Administración de omega 3 o placebo: Al final de la última sesión de tratamiento se administró el Omega 3 (Omega 3, Farmacia Galénica) o un placebo (Lactosa, Farmacia Galénica), según el grupo, intervención o control respectivamente, al que se pertenecía el paciente. Para ambas terapias, la pauta de administración fue de 2 comprimidos de 1g vía oral al día, durante 90 días consecutivos. Para mantener el doble ciego, los envases utilizados para el Omega 3 y el placebo presentaron las mismas características en cuanto a tamaño y color. Sobre las tabletas de Omega 3 y el placebo, estos eran visualmente idénticos. Posteriormente, al primer, tercer y seis meses después de finalizar el tratamiento no quirúrgico, se realizó una nueva recolección de todas las variables clínicas medidas al inicio del estudio, mientras que las variables microbiológicas se volvieron a medir al tercer mes después del tratamiento, del mismo sitio utilizado en el primer muestreo.