Efeito do ômega 3 como adjuvante imunomodulador do desbridamento periodontal

Definição da amostra: Pacientes maiores de 18 anos admitidos na Unidade de Diagnóstico da Faculdade de Odontologia (DUFD), campus Viña del Mar da Universidade Nacional Andrés Bello (UNAB) durante o ano de 2016, com diagnóstico de periodontite crônica moderada ou grave, atender aos critérios de inclusão e exclusão e concordar voluntariamente em participar do presente trabalho de pesquisa, assinando o termo de consentimento livre e esclarecido. Os participantes escolhidos foram informados sobre a natureza da pesquisa, riscos potenciais e remuneração pela participação no estudo, obtendo-se o consentimento informado de todos os pacientes. Cálculo do Tamanho da Amostra: Para calcular o tamanho amostral mínimo necessário para a constituição dos grupos controle e intervenção, as variâncias da diferença de profundidade de sondagem foram consideradas como valores fixos, que foram baseados nos resultados descritos acima. Considerando o acima e usando um nível de significância de 5%, um poder estatístico de 80% e um erro de estimativa de 1 mm, pelo menos 7 pacientes foram obtidos para cada grupo, dando um total de 14 sujeitos mínimos para estudo. Protocolo e exame clínico: De um total de 31 pacientes selecionados, 20 dos que atenderam aos critérios de inclusão foram alocados aleatoriamente pelo coordenador do estudo a um dos dois grupos por meio de uma sequência de geração aleatória por meio de um software. Dois sujeitos se recusaram a participar da pesquisa. Dessa forma, dois grupos foram formados para investigar: um grupo de intervenção (8 sujeitos) que recebeu RAR mais 2 g de Omega uma vez ao dia durante 90 dias imediatamente após o RAR, e um grupo controle (10 sujeitos) que recebeu RAR mais placebo nas mesmas condições do grupo intervenção. Um sujeito do grupo controle e dois da intervenção, foram perdidos durante o controle de seis meses. Finalmente, quinze pacientes que entraram no estudo também o concluíram. Não foram observados problemas de adesão, todos os pacientes seguiram o protocolo do estudo. Nenhum sujeito relatou efeitos adversos específicos.

Randomização: Apenas o investigador principal, que fez a randomização por meio do programa Epidat 4.0, tinha conhecimento sobre o conteúdo dos recipientes e o grupo a que cada paciente pertencia no estudo, portanto, foi responsável pela rotulagem dos recipientes, conseguindo em desta forma que os colaboradores e participantes da investigação não conheceram seu conteúdo até o término do estudo. Padronização e calibração: Os dados foram coletados com instrumentos e insumos das mesmas marcas comerciais, em uma única cadeira, sob a mesma iluminação e por um único examinador no caso de dados clínicos e outro examinador para variáveis ​​microbiológicas. O processo completo de PCR foi realizado por um bioquímico pertencente ao laboratório de microbiologia, campus Santiago da UNAB. Foi realizada uma calibração interexaminador, onde o único examinador clínico foi calibrado por um especialista em periodontia, registrando os dados obtidos em uma folha de calibração. Para isso, foram avaliados no mínimo 10 sujeitos, nos quais foi selecionado aleatoriamente um sítio de um dente pertencente a cada quadrante. Periodontopatógenos: A presença de periodontopatógenos foi considerada ao expor o gel de agarose da eletroforese à luz ultravioleta, uma banda no local dos 197 pares de bases (pb) foi observada na faixa que possui amostra da bioflora subgengival do paciente de Pg, 316 pares de bases para Td, 745 para Tf e 167 para Fn. Coleta de dados e instrumento: Antes da coleta de dados, foi solicitada a todos os sujeitos do estudo uma radiografia panorâmica para fins de diagnóstico. Posteriormente, foi realizado o exame periodontal registrando as variáveis ​​clínicas descritas acima em uma ficha clínica. Obtenção de amostras microbiológicas: O exame microbiológico foi realizado antes da RAR em ambos os grupos. A coleta de amostras microbiológicas foi baseada em um protocolo que é usado na Universidade do Chile. Utilizando cones de papel estéril número 40, uma amostra de biofilme subgengival foi retirada do local com maior CAL, dentro daqueles com DP ≥ 5mm, e foi realizada uma instrução de higiene oral. Antes da coleta do biofilme subgengival, a área foi limpa com gaze estéril para eliminar o biofilme supragengival. Em seguida, com uma pinça, foi retirado um cone de papel, e sua ponta foi colocada no sulco do local de estudo por 20 segundos, para garantir a absorção do fluido crevicular e do biofilme subgengival. Cada amostra biológica obtida foi suspensa em um tubo Eppendorf com 1 ml de água destilada e transportada em geladeira a uma temperatura de aproximadamente 4°C, em um tempo não superior a 3 horas, para então ser armazenada temporariamente a -80°C, até sua transferência e posterior extração do ácido desoxirribonucléico (DNA) e processamento da técnica de PCR. O tempo entre a coleta e a extração do DNA não ultrapassou 48 horas, para evitar a deterioração do material biológico. Tratamento periodontal: Uma vez concluída a coleta preliminar de todas as variáveis, foi realizado o tratamento periodontal não cirúrgico, começando com a descontaminação supra e subgengival de toda a boca, usando um piezo elétrico (DTE®, Guilin Woodpecker Medical Instrument Co., Ltd. , Guilin, Guangxi , República Popular da China), seguido de alisamento radicular em locais com PD ≥ 5mm e CAL≥ 4mm, utilizando curetas Gracey (Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, Illinois (IL), EUA). Esta terapia foi realizada em todos os pacientes, tanto no grupo intervenção quanto no grupo controle, sob protocolo de tratamento de boca cheia, em 1 ou 2 sessões de trabalho, com duração de 1 a 2 horas, alcançando o tratamento em 24 horas. Administração de ômega 3 ou placebo: No final da última sessão de tratamento, foi administrado o ômega 3 (Ômega 3, Farmácia Galênica) ou um placebo (Lactose, Farmácia Galênica), dependendo do grupo, intervenção ou controle respectivamente, ao qual o paciente pertencia. Para ambas as terapias, o regime de administração foi de 2 comprimidos de 1g por via oral por dia, durante 90 dias consecutivos. Para manter o duplo-cego, os recipientes utilizados para o ômega 3 e placebo apresentaram as mesmas características quanto ao tamanho e cor. Sobre os comprimidos de ômega 3 e placebo, estes eram visualmente idênticos. Posteriormente, no primeiro, terceiro e seis meses após o término do tratamento não cirúrgico, foi realizada nova coleta de todas as variáveis ​​clínicas mensuradas no início do estudo, enquanto as variáveis ​​microbiológicas foram mensuradas novamente no terceiro mês após o tratamento, do mesmo local utilizado na primeira amostragem.