Caracterización de la inmunidad específica del SARS-CoV-2 en personas que se han recuperado de COVID-19

Personas no hospitalizadas por COVID-19, sin espectro clínico ni desenlaces especificados en el grupo 3

• 1A: Personas con infección asintomática, de 18 a 55 años, inclusive
• 1B: Personas con infección asintomática, edad > 55
• 1C: Personas con infección sintomática (es decir, COVID-19) de 18 a 55 años
• 1D: personas con infección sintomática (es decir, COVID-19), edad > 55

• Muestras nasales opcionales
• Recogida de sangre

Personas previamente hospitalizadas por COVID-19, sin espectro clínico ni desenlaces especificados en el grupo 3

• 2A: Personas de 18 a 55 años de edad
• 2B: Personas > 55 años

• Muestras nasales opcionales
• Recogida de sangre

• Muestras nasales opcionales
• Recogida de sangre

Se realizaron ensayos BAMA para muestras de participantes en la Visita 1 (Mes 0, línea de base) y muestras disponibles en visitas de seguimiento (Mes 2, 4). Las respuestas de IgA, IgG1, IgG3 específicas del SARS-CoV-2 en suero (dilución 1:50) a antígenos del SARS-CoV-2 se midieron en un instrumento Bio-Plex (Bio-Rad). El software Bioplex proporciona 2 lecturas: una intensidad media de fluorescencia restada del fondo (MFI), donde el fondo se refiere a un control a nivel de placa (es decir, un pocillo en blanco ejecutado en cada placa), y una concentración basada en una curva estándar. Se considerarán respuestas positivas en cada visita si los valores de MFI menos el blanco son ≥ el punto de corte específico de isotipo, antígeno y dilución (será proporcionado por el laboratorio). Los MFI menos el blanco (o MFI neto) se utilizan para resumir la magnitud en un momento dado.

La tabla resume la tasa de respuesta de unión de anticuerpos específicos del SARS-CoV-2 mediante el ensayo multiplex de anticuerpos de unión (BAMA IgG1) en las Visitas 1, 2, 3, en general y por región y grupo de inscripción.

Se realizaron ensayos BAMA para muestras de participantes en la Visita 1 (Mes 0, línea base) y muestras disponibles en visitas de seguimiento (Mes 2, 4). Se midieron las respuestas de IgA, IgG1, IgG3 específicas del SARS-CoV-2 en suero (dilución 1:50) frente a antígenos del SARS-CoV-2 en un instrumento Bio-Plex (Bio-Rad). El software Bioplex proporciona 2 lecturas: una intensidad media de fluorescencia corregida por fondo (MFI), donde fondo se refiere a un control a nivel de placa (es decir, un pocillo en blanco ejecutado en cada placa), y una concentración basada en una curva estándar. Se considerarán respuestas positivas en cada visita si los valores de MFI menos blanco son ≥ al punto de corte específico de isotipo, antígeno y dilución (proporcionado por el laboratorio). Los MFI menos blanco (o MFI neto) se utilizan para resumir la magnitud en un momento dado.

La tabla resume la magnitud de la respuesta de unión de anticuerpos específicos del SARS-CoV-2 mediante el ensayo multiplex de anticuerpos de unión (BAMA IgG1) en las Visitas 1, 2, 3, en general y por región y grupo de inscripción.

Se realizaron ensayos BAMA para muestras de participantes en la Visita 1 (Mes 0, línea de base) y muestras disponibles en visitas de seguimiento (Mes 2, 4). Las respuestas de IgA, IgG1, IgG3 específicas para SARS-CoV-2 en suero (dilución 1:50) frente a antígenos de SARS-CoV-2 se midieron en un instrumento Bio-Plex (Bio-Rad). El software Bioplex proporciona 2 lecturas: una intensidad media de fluorescencia con sustracción de fondo (MFI), donde el fondo se refiere a un control a nivel de placa (es decir, un pozo en blanco ejecutado en cada placa), y una concentración basada en una curva estándar. Las respuestas positivas en cada visita se determinarán si los valores de MFI menos el blanco son ≥ el punto de corte específico para isotipo, antígeno y dilución (será proporcionado por el laboratorio). Los MFI menos el blanco (o MFI neto) se utilizan para resumir la magnitud en un momento dado.<\/p>

La tabla resume la tasa de respuesta de unión de anticuerpos específicos para SARS-CoV-2 mediante el ensayo multiplex de anticuerpos de unión (BAMA IgG3) en la Visita 1, 2, en general y por región y grupo de inscripción en la Cohorte de América.<\/p>

Los ensayos BAMA se realizaron para muestras de participantes en la Visita 1 (Mes 0, línea base) y muestras disponibles en visitas de seguimiento (Mes 2, 4). Las respuestas de IgA, IgG1, IgG3 específicas del SARS-CoV-2 en suero (dilución 1:50) a antígenos del SARS-CoV-2 se midieron en un instrumento Bio-Plex (Bio-Rad). El software Bioplex proporciona 2 lecturas: una intensidad de fluorescencia media corregida por el fondo (MFI), donde el fondo se refiere a un control a nivel de placa (es decir, un pozo en blanco ejecutado en cada placa), y una concentración basada en una curva estándar. Las respuestas positivas en cada visita se determinarán si los valores de MFI menos el blanco son ≥ el punto de corte específico de isotipo, antígeno y dilución (será proporcionado por el laboratorio). Los MFI menos el blanco (o MFI neto) se utilizan para resumir la magnitud en un momento dado.

La tabla resume la magnitud de la respuesta de unión de anticuerpos específicos del SARS-CoV-2 mediante el ensayo multiplex de anticuerpos de unión (BAMA IgG3) en la Visita 1, 2, en general y por región y grupo de inscripción en la Cohorte Americana

Se realizaron ensayos BAMA para muestras de participantes en la Visita 1 (Mes 0, línea base) y muestras disponibles en visitas de seguimiento (Mes 2, 4). Se midieron las respuestas de IgA, IgG1 e IgG3 específicas del SARS-CoV-2 en suero (dilución 1:50) a antígenos del SARS-CoV-2 en un instrumento Bio-Plex (Bio-Rad). El software Bioplex proporciona 2 lecturas: una intensidad de fluorescencia media corregida por el fondo (MFI), donde el fondo se refiere a un control a nivel de placa (es decir, un pocillo en blanco ejecutado en cada placa), y una concentración basada en una curva estándar. Se considerarán respuestas positivas en cada visita si los valores de MFI menos el blanco son ≥ al punto de corte específico para isotipo, antígeno y dilución (proporcionado por el laboratorio). Los MFI menos el blanco (o MFI neto) se utilizan para resumir la magnitud en un momento dado.

La tabla resume la tasa de respuesta de unión de anticuerpos específicos del SARS-CoV-2 mediante el ensayo multiplex de anticuerpos de unión (BAMA IgA) en la Visita 1, 2, en general y por región y grupo de inscripción en la Cohorte de América.

Se realizaron ensayos BAMA para muestras de participantes en la Visita 1 (Mes 0, línea de base) y muestras disponibles en visitas de seguimiento (Mes 2). Se midieron las respuestas de IgA, IgG1, IgG3 específicas del SARS-CoV-2 en suero (dilución 1:50) frente a antígenos del SARS-CoV-2 en un instrumento Bio-Plex (Bio-Rad). El software Bioplex proporciona 2 lecturas: una intensidad media de fluorescencia corregida por el fondo (MFI), donde el fondo se refiere a un control a nivel de placa (es decir, un pocillo en blanco ejecutado en cada placa), y una concentración basada en una curva estándar. Se considerarán respuestas positivas en cada visita si los valores de MFI menos el blanco son ≥ que el punto de corte específico de isotipo, antígeno y dilución (será proporcionado por el laboratorio). Los MFI menos el blanco (o MFI neto) se utilizan para resumir la magnitud en un momento dado.

La tabla resume la magnitud de la respuesta de unión de anticuerpos específicos del SARS-CoV-2 mediante el ensayo multiplex de anticuerpos de unión (BAMA IgA) en la Visita 1, 2, en general y por región y grupo de inscripción en la Cohorte América.

Los anticuerpos neutralizantes contra los coronavirus SARS se miden en células 293T/ACE2 para todas las muestras negativas al VIH. También se mide el IPM (porcentaje máximo de inhibición). Las determinaciones de positividad son un valor ID50/ID80 (dosis inhibitoria al 50% y 80%) mayor que 20 (el límite inferior de detección (LLID) del ensayo) o el IPM está entre el 10% y el 50%. Los anticuerpos neutralizantes ID50/ID80 de todas las muestras positivas al VIH se miden mediante un ensayo diferente, el ensayo de neutralización con pseudovirus VSV. Las determinaciones de positividad se basan en si se observa o no neutralización a lo largo de toda la titulación (dilución inicial 1:20) con un IPM entre el 10% y el 50%. Para las determinaciones positivas en las que la neutralización no alcanza el 50% u 80%, el título ID50/ID80 se estima primero con Prism.

La tabla resume la tasa de respuesta de unión de anticuerpos específicos del SARS-CoV-2 mediante el ensayo de anticuerpos neutralizantes (NAb) en la Visita 1, 2, 3, 4, en general y por región y grupo de inscripción en la Cohorte Americana (solo EE. UU. y Perú)

Los anticuerpos neutralizantes contra los coronavirus del SARS se miden en células 293T/ACE2 para todas las muestras negativas para VIH. También se mide el MPI (inhibición porcentual máxima). Las determinaciones de positividad son un valor ID50/ID80 (dosis inhibitoria del 50% y 80%) >20 (el límite inferior de detección del ensayo) o el MPI está entre el 10%-50%. La ID50/ID80 de los anticuerpos neutralizantes de todas las muestras positivas para VIH se mide mediante un ensayo diferente, el ensayo de neutralización con pseudovirus VSV. Las determinaciones de positividad se basan en si se observa o no neutralización a lo largo de toda la titulación (dilución inicial 1:20) con MPI entre el 10%-50%. Para las determinaciones positivas pero donde la neutralización no alcanza el 50% o 80%, el título ID50/ID80 se estima primero con Prism.

La tabla resume la magnitud de la respuesta de unión de anticuerpos específica para SARS-CoV-2 mediante el ensayo de anticuerpos neutralizantes (NAb) en las Visitas 1, 2, 3, 4, en general y por región y grupo de inscripción en la Cohorte Americana (solo EE. UU. y Perú)

Los anticuerpos neutralizantes contra los coronavirus del SARS se miden en células 293T/ACE2 para todas las muestras negativas al VIH. También se mide el MPI (inhibición porcentual máxima). Las determinaciones de positividad son un valor ID50/ID80 (dosis inhibitoria al 50% y 80%) >20 (el límite inferior de detección (LLOD) del ensayo) o el MPI está entre el 10%-50%. Los anticuerpos neutralizantes ID50/ID80 de todas las muestras positivas al VIH se miden mediante un ensayo diferente, el ensayo de neutralización con pseudovirus VSV. Las determinaciones de positividad se basan en si se observa o no neutralización en toda la titulación (dilución inicial 1:20) con MPI entre el 10%-50%. Para las determinaciones positivas en las que la neutralización no alcanza el 50% u 80%, el título ID50/ID80 se estima primero mediante Prism.

La tabla resume la tasa de respuesta de unión de anticuerpos específicos para SARS-CoV-2 mediante el ensayo de anticuerpos neutralizantes (NAb) en las Visitas 1, 2, 3, 4, en general y por región y grupo de inscripción en la Cohorte África.

Los anticuerpos neutralizantes contra los coronavirus del SARS se miden en células 293T/ACE2 para todas las muestras negativas al VIH. También se mide el IPM (inhibición porcentual máxima). Las determinaciones de positividad son un valor ID50/ID80 (dosis inhibitoria del 50% y 80%) mayor de 20 (el límite inferior de detección (LLOD) del ensayo) o el IPM está entre el 10%-50%. El ID50/ID80 de anticuerpos neutralizantes de todas las muestras positivas al VIH se mide mediante un ensayo diferente, el ensayo de neutralización con pseudovirus VSV. Las determinaciones de positividad se basan en si se observa o no neutralización en toda la titulación (dilución inicial 1:20) con IPM entre 10%-50%. Para las determinaciones positivas pero donde la neutralización no alcanza el 50% u 80%, el título ID50/ID80 se estima primero mediante Prism.

La tabla resume la magnitud de la respuesta de unión de anticuerpos específicos del SARS-CoV-2 mediante el ensayo de anticuerpos neutralizantes (NAb) en la Visita 1, 2, 3, 4, en general y por región y grupo de inscripción en la Cohorte de África

La degranulación de células NK dependiente de anticuerpos se medirá mediante el ensayo ADCC a una dilución de 1:500. Se tomarán dos lecturas: el porcentaje de células NK CD107A+ corregido por el fondo para las células infectadas y el porcentaje de células NK CD107A+ corregido por el fondo para las células transfectadas. Se considerarán respuestas positivas si los valores del porcentaje corregido por el fondo de CD107A+ son ≥ 4,07 y ≥ 5,27 para las células infectadas y transfectadas, respectivamente. Los puntos de corte se determinan mediante media+2SD, respectivamente, a partir de los controles negativos de SARS-CoV-2. El porcentaje de células NK CD107a+ fue la magnitud de la respuesta.

La tabla resume la tasa de respuesta de unión de anticuerpos específicos para SARS-CoV-2 mediante el ensayo de citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC) en la Visita 1, en general y por región y grupo de inscripción en la Cohorte Americana (solo EE. UU. y Perú).

La degranulación de células NK dependiente de anticuerpos se medirá mediante el ensayo ADCC a una dilución 1:500. Dos lecturas serán el % de células NK CD107A+ con sustracción del fondo para las células infectadas y el % de células NK CD107A+ con sustracción del fondo para las células transfectadas. Se considerarán respuestas positivas si los valores del % de CD107A+ con sustracción del fondo son ≥ 4.07 y ≥5.27 para las células infectadas y transfectadas, respectivamente. Los puntos de corte se determinan por media+2DE, respectivamente, a partir de los controles negativos de SARS-CoV-2. El porcentaje de células NK CD107a+ fue la magnitud de la respuesta.

La tabla resume la magnitud de la respuesta de unión de anticuerpos específica de SARS-CoV-2 mediante el ensayo de citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC) Visita 1, en general y por región y grupo de inscripción en la Cohorte de América.

Se utilizó citometría de flujo para examinar las respuestas de las células T CD4+ y CD8+ específicas del SARS-CoV-2 mediante una tinción intracelular de citocinas (ICS). Las determinaciones positivas se realizarán utilizando la prueba exacta de positividad de Fisher para todos los marcadores. Las magnitudes son el porcentaje de células T que expresan IFN-γ/IL-2.

La tabla resume la tasa de respuesta de las células T CD4+ y CD8+ específicas del SARS-CoV-2 mediante citometría de flujo en la Visita 1, en general y por región y grupo de inscripción en la Cohorte de América (solo EE. UU. y Perú).

Se utilizó citometría de flujo para examinar las respuestas de células T CD4+ y CD8+ específicas del SARS-CoV-2 mediante una tinción intracelular de citoquinas (ICS). Las determinaciones positivas se realizarán utilizando la prueba de positividad exacta de Fisher para todos los marcadores. Las magnitudes son el porcentaje de células T que expresan IFN-g/IL-2.

La tabla resume la magnitud de la respuesta de células T CD4+ y CD8+ específicas del SARS-CoV-2 mediante citometría de flujo en la Visita 1, en general y por región y grupo de inscripción entre los respondedores positivos de la Cohorte Americana (EE. UU. y Perú)

Las respuestas de las células B específicas del SARS-CoV-2 y los datos fenotípicos de las células B se identificaron y caracterizaron utilizando proteínas Env recombinantes marcadas con fluorescencia (S6P y RBD) en combinación con un panel de anticuerpos de citometría de flujo en todas las muestras disponibles de la visita de inscripción (V1). No hay una llamada de positividad para los datos fenotípicos de las células B. La magnitud es la frecuencia del subconjunto de células B.

La tabla resume la magnitud de la respuesta de las células B de memoria específicas del SARS-CoV-2 mediante citometría de flujo en la Visita 1, en general y por región y grupo de inscripción entre la Cohorte América (solo EE. UU. y Perú)

Los ensayos BAMA se realizaron para muestras de participantes en la Visita 1 (Mes 0, línea de base) y muestras disponibles en visitas de seguimiento (Mes 2, 4). Las respuestas de IgA, IgG1, IgG3 específicas de SARS-CoV-2 en suero (dilución 1:50) a antígenos de SARS-CoV-2 se midieron en un instrumento Bio-Plex (Bio-Rad). El software Bioplex proporciona 2 lecturas: una intensidad media de fluorescencia con sustracción de fondo (MFI), donde el fondo se refiere a un control a nivel de placa (es decir, un pocillo en blanco ejecutado en cada placa), y una concentración basada en una curva estándar. Las respuestas positivas en cada visita se considerarán si los valores de MFI menos el blanco son ≥ el punto de corte específico de isotipo, antígeno y dilución (será proporcionado por el laboratorio). Las MFI menos el blanco (o MFI neta) se utilizan para resumir la magnitud en un momento dado.<\/p>

La tabla resume la Tasa de Respuesta de Unión de Anticuerpos Específicos de SARS-CoV-2 mediante el ensayo multiplex de anticuerpos de unión (BAMA IgG1) en la Visita 1, 2, 3, en general y por región y gravedad de COVID-19 entre la Cohorte de América (EE. UU. y Perú)<\/p>

Los ensayos BAMA se realizaron para muestras de participantes en la Visita 1 (Mes 0, línea basal) y muestras disponibles en visitas de seguimiento (Mes 2, 4). Las respuestas de IgA, IgG1, IgG3 específicas del SARS-CoV-2 en suero (dilución 1:50) a antígenos del SARS-CoV-2 se midieron en un instrumento Bio-Plex (Bio-Rad). El software Bioplex proporciona 2 lecturas: una intensidad media de fluorescencia con sustracción de fondo (MFI), donde el fondo se refiere a un control a nivel de placa (es decir, un pozo en blanco ejecutado en cada placa), y una concentración basada en una curva estándar. Se considerarán respuestas positivas en cada visita si los valores de MFI menos el blanco son ≥ al punto de corte específico de isotipo, antígeno y dilución (proporcionado por el laboratorio). Los MFI menos el blanco (o MFI neto) se utilizan para resumir la magnitud en un momento dado.

La tabla resume la Magnitud de la Respuesta de Unión de Anticuerpos Específica del SARS-CoV-2 mediante el ensayo multiplex de anticuerpos de unión (BAMA IgG1) en la Visita 1, 2, 3, en general y por región y gravedad de COVID-19 en la Cohorte Americana (EE.UU. y Perú)

Los ensayos BAMA se realizaron para muestras de participantes en la Visita 1 (Mes 0, línea base) y muestras disponibles en visitas de seguimiento (Mes 2, 4). Las respuestas de IgA, IgG1, IgG3 específicas del SARS-CoV-2 en suero (dilución 1:50) a antígenos del SARS-CoV-2 se midieron en un instrumento Bio-Plex (Bio-Rad). El software Bioplex proporciona 2 lecturas: una intensidad media de fluorescencia restada del fondo (MFI), donde el fondo se refiere a un control a nivel de placa (es decir, un pozo en blanco ejecutado en cada placa), y una concentración basada en una curva estándar. Se considerarán respuestas positivas en cada visita si los valores de MFI menos el blanco son ≥ el punto de corte específico de isotipo, antígeno y dilución (será proporcionado por el laboratorio). Los MFI menos el blanco (o MFI neto) se utilizan para resumir la magnitud en un momento dado.

La tabla resume la Tasa de Respuesta de Unión de Anticuerpos Específicos del SARS-CoV-2 mediante el ensayo multiplex de anticuerpos de unión (BAMA IgG3) en la Visita 1, 2, en general y por región y gravedad de COVID-19 entre la Cohorte Americana (EE. UU. y Perú)

Se realizaron ensayos BAMA para muestras de participantes en la Visita 1 (Mes 0, línea base) y muestras disponibles en visitas de seguimiento (Mes 2, 4). Se midieron las respuestas de IgA, IgG1, IgG3 específicas para SARS-CoV-2 en suero (dilución 1:50) frente a antígenos de SARS-CoV-2 en un instrumento Bio-Plex (Bio-Rad). El software Bioplex proporciona 2 lecturas: una intensidad media de fluorescencia restada del fondo (MFI), donde el fondo se refiere a un control a nivel de placa (es decir, un pocillo en blanco ejecutado en cada placa), y una concentración basada en una curva estándar. Se considerarán respuestas positivas en cada visita si los valores de MFI menos el blanco son ≥ al punto de corte específico de isotipo, antígeno y dilución (será proporcionado por el laboratorio). Los valores de MFI menos el blanco (o MFI neto) se utilizan para resumir la magnitud en un momento dado.

La tabla resume la Tasa de Respuesta de Unión de Anticuerpos específicos para SARS-CoV-2 mediante el ensayo multiplex de anticuerpos de unión (BAMA IgA) en la Visita 1, 2, en general y por región y gravedad de COVID-19 entre la Cohorte de América (EE. UU. y Perú)

Se realizaron ensayos BAMA para muestras de participantes en la Visita 1 (Mes 0, línea base) y muestras disponibles en visitas de seguimiento (Mes 2, 4). Se midieron las respuestas de IgA, IgG1, IgG3 específicas del SARS-CoV-2 en suero (dilución 1:50) a antígenos del SARS-CoV-2 en un instrumento Bio-Plex (Bio-Rad). El software Bioplex proporciona 2 lecturas: una intensidad media de fluorescencia restada del fondo (MFI), donde el fondo se refiere a un control a nivel de placa (es decir, un pozo en blanco ejecutado en cada placa), y una concentración basada en una curva estándar. Se considerarán respuestas positivas en cada visita si los valores de MFI menos el blanco son ≥ el punto de corte específico de isotipo, antígeno y dilución (proporcionado por el laboratorio). Los MFI menos el blanco (o MFI neto) se utilizan para resumir la magnitud en un momento dado.

La tabla resume la magnitud de la respuesta de unión de anticuerpos específicos del SARS-CoV-2 mediante el ensayo multiplex de anticuerpos de unión (BAMA IgA) en la Visita 1, 2, en general y por región y gravedad de COVID-19 en la Cohorte de América (EE. UU. y Perú)

Los anticuerpos neutralizantes contra los coronavirus SARS se miden en células 293T/ACE2 para todas las muestras negativas de VIH. También se mide el IPM (porcentaje máximo de inhibición). Las determinaciones de positividad son un valor ID50/ID80 (dosis inhibitoria del 50% y 80%) mayor de 20 (el límite inferior de detección (LID) del ensayo) o el IPM está entre el 10% y el 50%. El ID50/ID80 de anticuerpos neutralizantes de todas las muestras positivas de VIH se mide mediante un ensayo diferente, el ensayo de neutralización de pseudovirus VSV. Las determinaciones de positividad se basan en si se observa o no alguna neutralización en toda la titulación (dilución inicial 1:20) con un IPM entre el 10% y el 50%. Para las determinaciones positivas pero en las que la neutralización no alcanza el 50% u 80%, el título ID50/ID80 se estima primero mediante Prism.

La tabla resume la tasa de respuesta de unión de anticuerpos específicos del SARS-CoV-2 mediante el ensayo de anticuerpos neutralizantes (AAN) en la Visita 1, 2, 3, 4, globalmente y por región y gravedad de la COVID-19.

Los anticuerpos neutralizantes contra los coronavirus del SARS se miden en células 293T/ACE2 para todas las muestras negativas para VIH. También se mide el IPM (porcentaje máximo de inhibición). Las determinaciones de positividad son un valor ID50/ID80 (dosis inhibitoria del 50% y 80%) mayor de 20 (el límite inferior de detección (LLOD) del ensayo) o el IPM está entre el 10% y el 50%. El ID50/ID80 de los anticuerpos neutralizantes de todas las muestras positivas para VIH se mide mediante un ensayo diferente, el ensayo de neutralización con pseudovirus VSV. Las determinaciones de positividad se basan en si se observa o no neutralización en toda la titulación (dilución inicial 1:20) con un IPM entre el 10% y el 50%. Para las determinaciones positivas en las que la neutralización no alcanza el 50% u 80%, el título ID50/ID80 se estima primero mediante Prism.

La tabla resume la magnitud de la respuesta de unión de anticuerpos específicos para SARS-CoV-2 mediante el ensayo de anticuerpos neutralizantes (NAb) en las Visitas 1, 2, 3, 4, en general y por región y gravedad de COVID-19 en la Cohorte de América.

Los anticuerpos neutralizantes contra los coronavirus del SARS se miden en células 293T/ACE2 para todas las muestras negativas para el VIH. También se mide el IPM (inhibición porcentual máxima). Las determinaciones de positividad son un valor ID50/ID80 (dosis inhibitoria al 50% y 80%) mayor a 20 (el límite inferior de detección (LID) del ensayo) o el IPM está entre el 10% y el 50%. Los anticuerpos neutralizantes ID50/ID80 de todas las muestras positivas para el VIH se miden mediante un ensayo diferente, el ensayo de neutralización con pseudovirus VSV. Las determinaciones de positividad se basan en si se observa o no neutralización en toda la titulación (dilución inicial 1:20) con IPM entre el 10% y el 50%. Para las determinaciones positivas en las que la neutralización no alcanza el 50% u 80%, el título ID50/ID80 se estima primero mediante Prism.

La tabla resume la tasa de respuesta de unión de anticuerpos específicos del SARS-CoV-2 mediante el ensayo de anticuerpos neutralizantes (Nab) en las Visitas 1, 2, 3, 4, en general y por región y gravedad de la COVID-19.

Se miden los anticuerpos neutralizantes contra los coronavirus SARS en células 293T/ACE2 para todas las muestras negativas de VIH. También se mide el IPM (inhibición porcentual máxima). Las determinaciones de positividad son un valor ID50/ID80 (dosis inhibitoria del 50% y 80%) mayor a 20 (el límite inferior de detección (LID) del ensayo) o el IPM está entre el 10% y el 50%. El ID50/ID80 de anticuerpos neutralizantes de todas las muestras positivas de VIH se mide mediante un ensayo diferente, el ensayo de neutralización con pseudovirus VSV. Las determinaciones de positividad se basan en si se observa o no neutralización en toda la titulación (dilución inicial 1:20) con IPM entre el 10% y el 50%. Para las determinaciones positivas pero cuya neutralización no alcanza el 50% u 80%, el título ID50/ID80 se estima primero con Prism.

La tabla resume la magnitud de la respuesta de unión de anticuerpos específicos del SARS-CoV-2 mediante el ensayo de anticuerpos neutralizantes (NAb) en las Visitas 1, 2, 3, 4, global y por región y gravedad de COVID-19 en la Cohorte de África

La degranulación de células NK dependiente de anticuerpos se medirá mediante el ensayo ADCC a una dilución de 1:500. Dos lecturas serán el % de células NK CD107A+ corregido por fondo para las células infectadas y el % de células NK CD107A+ corregido por fondo para las células transfectadas. Las respuestas positivas se considerarán si los valores del % de CD107A+ corregido por fondo son ≥ 4.07 y ≥5.27 para las células infectadas y transfectadas, respectivamente. Los puntos de corte se determinan por media+2SD, respectivamente, a partir de los controles negativos de SARS-CoV-2. El porcentaje de células NK CD107a+ fue la magnitud de la respuesta.

La tabla resume la tasa de respuesta de unión de anticuerpos específicos de SARS-CoV-2 mediante el ensayo de citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC) en la Visita 1, en general y por región y gravedad de COVID-19 entre la Cohorte Americana (EE. UU. y Perú).

La degranulación de células NK dependiente de anticuerpos se medirá mediante el ensayo ADCC a una dilución de 1:500. Dos lecturas serán el porcentaje de células NK CD107A+ con sustracción del fondo para las células infectadas y el porcentaje de células NK CD107A+ con sustracción del fondo para las células transfectadas. Se considerarán respuestas positivas si los valores del porcentaje de CD107A+ con sustracción del fondo son ≥ 4,07 y ≥5,27 para las células infectadas y transfectadas, respectivamente. Los puntos de corte se determinan mediante la media+2DE, respectivamente, a partir de los controles negativos de SARS-CoV-2. El porcentaje de células NK CD107a+ fue la magnitud de la respuesta.

La tabla resume la magnitud de la respuesta de unión de anticuerpos específicos de SARS-CoV-2 mediante el ensayo de citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC) en la Visita 1, en general y por región y gravedad de COVID-19 en la cohorte americana (EE. UU. y Perú).

Se utilizó citometría de flujo para examinar las respuestas específicas de linfocitos T CD4+ y CD8+ frente al SARS-CoV-2 mediante una tinción intracelular de citocinas (ICS). Las determinaciones positivas se realizarán utilizando la prueba exacta de Fisher de positividad para todos los marcadores. Las magnitudes se expresan como el porcentaje de linfocitos T que expresan IFN-g/IL-2.

La tabla resume la tasa de respuesta de linfocitos T CD4+ y CD8+ específicos frente al SARS-CoV-2 mediante citometría de flujo en la Visita 1, en general y por región y gravedad de COVID-19 en la Cohorte Americana (EE. UU. y Perú)

Se utilizó citometría de flujo para examinar las respuestas de células T CD4+ y CD8+ específicas del SARS-CoV-2 mediante una tinción intracelular de citocinas (ICS). Las determinaciones positivas se realizarán utilizando la prueba exacta de positividad de Fisher para todos los marcadores. Las magnitudes son el porcentaje de células T que expresan IFN-g/IL-2.

La tabla resume la magnitud de la respuesta de células T CD4+ y CD8+ específicas del SARS-CoV-2 mediante citometría de flujo en la Visita 1, en general y por región y gravedad de COVID-19 en la Cohorte Americana

Se identificaron y caracterizaron las respuestas de células B específicas del SARS-CoV-2 y los datos fenotípicos de células B utilizando proteínas Env recombinantes marcadas con fluorescencia (S6P y RBD) en combinación con un panel de anticuerpos de citometría de flujo en todas las muestras disponibles de la visita de inscripción (V1). La muestra se incluirá en el análisis solo si el número de células B IgD- es igual o superior a 1000 para esa muestra.

La tabla resume la magnitud de la respuesta de células B de memoria específicas del SARS-CoV-2 mediante citometría de flujo en la Visita 1, en general y por región y gravedad de COVID-19 en la Cohorte de América (EE. UU. y Perú)

Se realizaron ensayos BAMA para muestras de participantes en la Visita 1 (Mes 0, línea base) y muestras disponibles en visitas de seguimiento (Mes 2, 4). Las respuestas de IgA, IgG1, IgG3 específicas de SARS-CoV-2 en suero (dilución 1:50) a antígenos de SARS-CoV-2 se midieron en un instrumento Bio-Plex (Bio-Rad). El software Bioplex proporciona 2 lecturas: una intensidad media de fluorescencia con sustracción de fondo (MFI), donde el fondo se refiere a un control a nivel de placa (es decir, un pocillo en blanco ejecutado en cada placa), y una concentración basada en una curva estándar. Se considerarán respuestas positivas en cada visita si los valores de MFI menos blanco son ≥ el punto de corte específico de isotipo, antígeno y dilución (proporcionado por el laboratorio). Los MFI menos blanco (o MFI neto) se utilizan para resumir la magnitud en un momento dado.

La tabla resume la tasa de respuesta de unión de anticuerpos específicos de SARS-CoV-2 mediante ensayo multiplex de anticuerpos de unión (BAMA IgG1) en la Visita 1, 2, 3, en general y por región y días desde el diagnóstico de SARS-CoV-2 en la Cohorte de América.

Se realizaron ensayos BAMA para muestras de participantes en la Visita 1 (Mes 0, basal) y muestras disponibles en visitas de seguimiento (Mes 2, 4). Se midieron las respuestas de IgA, IgG1 e IgG3 específicas para SARS-CoV-2 en suero (dilución 1:50) frente a antígenos de SARS-CoV-2 en un instrumento Bio-Plex (Bio-Rad). El software Bioplex proporciona 2 lecturas: una intensidad media de fluorescencia corregida por fondo (MFI), donde el fondo se refiere a un control a nivel de placa (es decir, un pocillo blanco ejecutado en cada placa), y una concentración basada en una curva estándar. Se considerarán respuestas positivas en cada visita si los valores de MFI menos el blanco son ≥ el punto de corte específico de isotipo, antígeno y dilución (proporcionado por el laboratorio). Los MFI menos el blanco (o MFI neto) se utilizan para resumir la magnitud en un momento dado.

La tabla resume la Magnitud de la Respuesta de Unión de Anticuerpos Específicos para SARS-CoV-2 mediante BAMA IgG1 en la Visita 1, 2, 3, en general y por región y días desde el diagnóstico de SARS-CoV-2 en la Cohorte Americana.

Se realizaron ensayos BAMA para muestras de participantes en la Visita 1 (Mes 0, línea base) y muestras disponibles en visitas de seguimiento (Mes 2, 4). Se midieron las respuestas de IgA, IgG1, IgG3 específicas del SARS-CoV-2 en suero (dilución 1:50) a antígenos del SARS-CoV-2 en un instrumento Bio-Plex (Bio-Rad). El software Bioplex proporciona 2 lecturas: una intensidad de fluorescencia media restada del fondo (MFI), donde el fondo se refiere a un control a nivel de placa (es decir, un pocillo en blanco ejecutado en cada placa), y una concentración basada en una curva estándar. Se considerarán respuestas positivas en cada visita si los valores de MFI menos el blanco son ≥ el punto de corte específico de isotipo, antígeno y dilución (proporcionado por el laboratorio). Los MFI menos el blanco (o MFI neto) se utilizan para resumir la magnitud en un momento dado.

La tabla resume la Tasa de Respuesta de Unión de Anticuerpos Específicos del SARS-CoV-2 mediante ensayo multiplex de unión de anticuerpos (BAMA IgG3) en la Visita 1, 2, en general y por región y días desde el diagnóstico de SARS-CoV-2 en la Cohorte de América.

Se realizaron ensayos BAMA para muestras de participantes en la Visita 1 (Mes 0, línea de base) y muestras disponibles en visitas de seguimiento (Mes 2, 4). Se midieron las respuestas de IgA, IgG1, IgG3 específicas para SARS-CoV-2 en suero (dilución 1:50) frente a antígenos de SARS-CoV-2 en un instrumento Bio-Plex (Bio-Rad). El software Bioplex proporciona 2 lecturas: una intensidad media de fluorescencia con sustracción de fondo (MFI), donde el fondo se refiere a un control a nivel de placa (es decir, un pozo en blanco ejecutado en cada placa), y una concentración basada en una curva estándar. Se considerarán respuestas positivas en cada visita si los valores de MFI menos el blanco son ≥ al punto de corte específico de isotipo, antígeno y dilución (proporcionado por el laboratorio). Los MFI menos el blanco (o MFI neto) se utilizan para resumir la magnitud en un momento dado.

La tabla resume la magnitud de la respuesta de unión de anticuerpos específicos para SARS-CoV-2 mediante ensayo multiplex de anticuerpos de unión (BAMA IgG3) en la Visita 1, 2, en general y por región y días desde el diagnóstico de SARS-CoV-2 en la Cohorte Americana.

Se realizaron ensayos BAMA para muestras de participantes en la Visita 1 (Mes 0, línea base) y muestras disponibles en visitas de seguimiento (Mes 2, 4). Se midieron las respuestas de IgA, IgG1, IgG3 específicas del SARS-CoV-2 en suero (dilución 1:50) frente a antígenos del SARS-CoV-2 en un instrumento Bio-Plex (Bio-Rad). El software Bioplex proporciona 2 lecturas: una intensidad media de fluorescencia restada del fondo (MFI), donde el fondo se refiere a un control a nivel de placa (es decir, un pocillo en blanco ejecutado en cada placa), y una concentración basada en una curva estándar. Se considerarán respuestas positivas en cada visita si los valores de MFI menos el blanco son ≥ el punto de corte específico de isotipo, antígeno y dilución (será proporcionado por el laboratorio). Los MFI menos el blanco (o MFI neto) se utilizan para resumir la magnitud en un momento dado.

La tabla resume la Tasa de Respuesta de Unión de Anticuerpos Específicos del SARS-CoV-2 mediante ensayo multiplex de anticuerpos de unión (BAMA IgA) en la Visita 1, 2, en general y por región y días desde el grupo de diagnóstico de SARS-CoV-2 en la Cohorte de América

Se realizaron ensayos BAMA para muestras de participantes en la Visita 1 (Mes 0, línea base) y muestras disponibles en visitas de seguimiento (Mes 2, 4). Se midieron las respuestas de IgA, IgG1, IgG3 específicas del SARS-CoV-2 en suero (dilución 1:50) frente a antígenos del SARS-CoV-2 en un instrumento Bio-Plex (Bio-Rad). El software Bioplex proporciona 2 lecturas: una intensidad media de fluorescencia corregida por fondo (MFI), donde el fondo se refiere a un control a nivel de placa (es decir, un pocillo en blanco ejecutado en cada placa), y una concentración basada en una curva estándar. Se considerarán respuestas positivas en cada visita si los valores de MFI menos el blanco son ≥ que el punto de corte específico para isotipo, antígeno y dilución (proporcionado por el laboratorio). Los valores de MFI menos blanco (o MFI neto) se utilizan para resumir la magnitud en un momento dado.

La tabla resume la magnitud de la respuesta de unión de anticuerpos específicos del SARS-CoV-2 mediante el ensayo multiplex de anticuerpos de unión (BAMA IgA) en la Visita 1, 2, en general y por región y días desde el diagnóstico de SARS-CoV-2 en la Cohorte de América

Se miden anticuerpos neutralizantes contra coronavirus del SARS en células 293T/ACE2 para todas las muestras VIH negativas. También se mide el IPM (inhibición porcentual máxima). Las determinaciones de positividad son un valor ID50/ID80 (dosis inhibitoria al 50% y 80%) mayor a 20 (el límite inferior de detección del ensayo) o el IPM está entre el 10%-50%. Los anticuerpos neutralizantes ID50/ID80 de todas las muestras VIH positivas se miden mediante un ensayo diferente, el ensayo de neutralización con pseudovirus VSV. Las determinaciones de positividad se basan en si se observa o no neutralización a lo largo de toda la titulación (dilución inicial 1:20) con un IPM entre el 10%-50%. Para las determinaciones positivas donde la neutralización no alcanza el 50% u 80%, el título ID50/ID80 se estima primero con Prism.

La tabla resume la tasa de respuesta de unión de anticuerpos específicos para SARS-CoV-2 mediante ensayo de anticuerpos neutralizantes (NAb) en las Visitas 1, 2, 3, 4, en general y por región y días desde el diagnóstico de SARS-CoV-2 en la Cohorte de América.

Los anticuerpos neutralizantes contra los coronavirus del SARS se miden en células 293T/ACE2 para todas las muestras negativas para VIH. También se mide el IPM (inhibición porcentual máxima). Las determinaciones de positividad son un valor ID50/ID80 (dosis inhibitoria del 50% y 80%) >20 (el límite inferior de detección (LLOD) del ensayo) o el IPM está entre el 10%-50%. Los anticuerpos neutralizantes ID50/ID80 de todas las muestras positivas para VIH se miden mediante un ensayo diferente, el ensayo de neutralización con pseudovirus VSV. Las determinaciones de positividad se basan en si se observa o no neutralización a lo largo de toda la titulación (dilución inicial 1:20) con IPM entre 10%-50%. Para las determinaciones positivas en las que la neutralización no alcanza el 50% u 80%, el título ID50/ID80 se estima primero mediante Prism.

La tabla resume la magnitud de la respuesta de unión de anticuerpos específicos para SARS-CoV-2 mediante el ensayo de anticuerpos neutralizantes (NAb) en la Visita 1, 2, 3, 4, en general y por región y días desde el diagnóstico de SARS-CoV-2 en la Cohorte Americana.

Los anticuerpos neutralizantes contra los coronavirus del SARS se miden en células 293T/ACE2 para todas las muestras negativas para VIH. También se mide el IPM (porcentaje máximo de inhibición). Las determinaciones de positividad son un valor ID50/ID80 (dosis inhibitoria del 50% y 80%) >20 (el límite inferior de detección (LLOD) del ensayo) o el IPM está entre el 10%-50%. Los anticuerpos neutralizantes ID50/ID80 de todas las muestras positivas para VIH se miden mediante un ensayo diferente, el ensayo de neutralización con pseudovirus VSV. Las determinaciones de positividad se basan en si se observa o no neutralización en toda la titulación (dilución inicial 1:20) con IPM entre 10%-50%. Para las determinaciones positivas pero donde la neutralización no alcanza el 50% u 80%, el título ID50/ID80 se estima primero mediante Prism.

La tabla resume la tasa de respuesta de unión de anticuerpos específicos para SARS-CoV-2 mediante el ensayo de anticuerpos neutralizantes (NAb) en la Visita 1, 2, 3, 4, en general y por región y días desde el diagnóstico de SARS-CoV-2 en el grupo de la Cohorte de África.

Los anticuerpos neutralizantes contra los coronavirus SARS se miden en células 293T/ACE2 para todas las muestras negativas para VIH. También se mide el IPM (inhibición porcentual máxima). Las determinaciones de positividad son un valor ID50/ID80 (dosis inhibitoria al 50% y 80%) >20 (el límite inferior de detección (LID) del ensayo) o el IPM está entre 10%-50%. Los anticuerpos neutralizantes ID50/ID80 de todas las muestras positivas para VIH se miden mediante un ensayo diferente, el ensayo de neutralización con pseudovirus VSV. Las determinaciones de positividad se basan en si se observa o no neutralización a lo largo de toda la titulación (dilución inicial 1:20) con IPM entre 10%-50%. Para las determinaciones positivas donde la neutralización no alcanza el 50% u 80%, el título ID50/ID80 se estima primero con Prism.

La tabla resume la magnitud de la respuesta de unión de anticuerpos específicos contra SARS-CoV-2 mediante el ensayo de anticuerpos neutralizantes (NAb) en la Visita 1, 2, 3, 4, en general y por región y días desde el diagnóstico de SARS-CoV-2 en la Cohorte África.

La desgranulación de células NK dependiente de anticuerpos se medirá mediante el ensayo ADCC a una dilución de 1:500. Dos resultados serán el porcentaje de células NK CD107A+ con sustracción de fondo para las células infectadas y el porcentaje de células NK CD107A+ con sustracción de fondo para las células transfectadas. Se considerarán respuestas positivas si los valores del porcentaje de CD107A+ con sustracción de fondo son ≥ 4,07 y ≥5,27 para las células infectadas y transfectadas, respectivamente. Los puntos de corte se determinan por media+2DE, respectivamente, a partir de los controles negativos de SARS-CoV-2. El porcentaje de células NK CD107a+ fue la magnitud de la respuesta.

La tabla resume la tasa de respuesta de unión de anticuerpos específicos de SARS-CoV-2 mediante el ensayo de citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC) en la Visita 1, en general y por región y días desde el diagnóstico de SARS-CoV-2 en la Cohorte Americana (EE. UU. y Perú).

La degranulación de células NK dependiente de anticuerpos se medirá mediante un ensayo ADCC a una dilución 1:500. Dos lecturas serán el % de células NK CD107A+ corregido por el fondo para las células infectadas y el % de células NK CD107A+ corregido por el fondo para las células transfectadas. Las respuestas positivas se considerarán si los valores del % CD107A+ corregido por el fondo son ≥ 4,07 y ≥5,27 para las células infectadas y transfectadas, respectivamente. Los puntos de corte se determinan por la media+2DE, respectivamente, a partir de los controles negativos de SARS-CoV-2. El porcentaje de células NK CD107a+ fue la magnitud de la respuesta.

La tabla resume la magnitud de la respuesta de unión de anticuerpos específicos de SARS-CoV-2 mediante el ensayo de citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC) en la Visita 1, en general y por región y días desde el diagnóstico de SARS-CoV-2 en la Cohorte de América.

Se utilizó citometría de flujo para examinar las respuestas de las células T CD4+ y CD8+ específicas del SARS-CoV-2 mediante una tinción intracelular de citocinas (ICS). Las determinaciones positivas se realizarán utilizando la prueba exacta de Fisher de positividad para todos los marcadores. Las magnitudes se expresan como el porcentaje de células T que expresan IFN-γ/IL-2.

La tabla resume la tasa de respuesta de las células T CD4+ y CD8+ específicas del SARS-CoV-2 mediante citometría de flujo en la Visita 1, en general y por región y días desde el diagnóstico de SARS-CoV-2 en la Cohorte de América.

Se utilizó citometría de flujo para examinar las respuestas de células T CD4+ y CD8+ específicas del SARS-CoV-2 mediante una tinción intracelular de citocinas (ICS). Las determinaciones positivas se realizarán utilizando la prueba de positividad exacta de Fisher para todos los marcadores. Las magnitudes son % de células T que expresan IFN-g/IL-2.

La tabla resume la magnitud de la respuesta de células T CD4+ y CD8+ específicas del SARS-CoV-2 mediante citometría de flujo en la Visita 1, en general y por región y días desde el diagnóstico de SARS-CoV-2 en la cohorte de América.

Se identificaron y caracterizaron las respuestas de las células B específicas del SARS-CoV-2 y los datos fenotípicos de las células B utilizando proteínas Env recombinantes marcadas con fluorescencia (S6P y RBD) en combinación con un panel de anticuerpos de citometría de flujo en todas las muestras disponibles de la visita de inscripción (V1). La muestra se incluirá en el análisis solo si el número de células B IgD- es igual o mayor a 1000 para esa muestra.

La tabla resume la magnitud de la respuesta de las células B de memoria específicas del SARS-CoV-2 (células B) por región y días desde el diagnóstico del SARS-CoV-2 en la cohorte de América.

Se realizaron ensayos BAMA para muestras de participantes en la Visita 1 (Mes 0, línea de base) y muestras disponibles en visitas de seguimiento (Mes 2, 4). Las respuestas de IgA, IgG1, IgG3 específicas del SARS-CoV-2 en suero (dilución 1:50) a antígenos del SARS-CoV-2 se midieron en un instrumento Bio-Plex (Bio-Rad). El software Bioplex proporciona 2 lecturas: una intensidad media de fluorescencia con sustracción de fondo (MFI), donde el fondo se refiere a un control a nivel de placa (es decir, un pozo en blanco ejecutado en cada placa), y una concentración basada en una curva estándar. Se considerarán respuestas positivas en cada visita si los valores de MFI menos el blanco son ≥ que el punto de corte específico para isotipo, antígeno y dilución (proporcionado por el laboratorio). Los MFI menos blanco (o MFI neto) se utilizan para resumir la magnitud en un momento dado.

La tabla resume la tasa de respuesta de unión de anticuerpos específicos del SARS-CoV-2 mediante el ensayo multiplex de anticuerpos de unión (BAMA IgG1) en la Visita 1, 2, 3, en general y por región y grupo de comorbilidad en la Cohorte América.

Se realizaron ensayos BAMA para muestras de participantes en la Visita 1 (Mes 0, línea base) y muestras disponibles en visitas de seguimiento (Mes 2, 4). Las respuestas específicas de IgA, IgG1 e IgG3 contra SARS-CoV-2 en suero (dilución 1:50) frente a antígenos de SARS-CoV-2 se midieron en un instrumento Bio-Plex (Bio-Rad). El software Bioplex proporciona 2 lecturas: una intensidad media de fluorescencia con sustracción de fondo (MFI), donde el fondo se refiere a un control a nivel de placa (es decir, un pocillo en blanco ejecutado en cada placa), y una concentración basada en una curva estándar. Se considerarán respuestas positivas en cada visita si los valores de MFI menos el blanco son ≥ el punto de corte específico de isotipo, antígeno y dilución (proporcionado por el laboratorio). Los MFI menos el blanco (o MFI neto) se utilizan para resumir la magnitud en un momento dado.

La tabla resume la magnitud de la respuesta de unión de anticuerpos específica contra SARS-CoV-2 mediante el ensayo multiplex de anticuerpos de unión (BAMA IgG1) en la Visita 1, 2, 3, en general y por región y grupo de comorbilidad en la Cohorte Americana

Los ensayos BAMA se realizaron para muestras de participantes en la Visita 1 (Mes 0, línea de base) y muestras disponibles en visitas de seguimiento (Mes 2, 4). Las respuestas de IgA, IgG1, IgG3 específicas del SARS-CoV-2 en suero (dilución 1:50) a antígenos del SARS-CoV-2 se midieron en un instrumento Bio-Plex (Bio-Rad). El software Bioplex proporciona 2 lecturas: una intensidad media de fluorescencia con sustracción de fondo (MFI), donde el fondo se refiere a un control a nivel de placa (es decir, un pozo en blanco ejecutado en cada placa), y una concentración basada en una curva estándar. Se considerarán respuestas positivas en cada visita si los valores de MFI menos el blanco son ≥ el punto de corte específico de isotipo, antígeno y dilución (será proporcionado por el laboratorio). Los MFI menos el blanco (o MFI neto) se utilizan para resumir la magnitud en un momento dado.

La tabla resume la Tasa de Respuesta de Unión de Anticuerpos Específicos del SARS-CoV-2 mediante ensayo multiplex de unión de anticuerpos (BAMA IgG3) en la Visita 1, 2, en general y por región y grupo de comorbilidad en la Cohorte Americana

Se realizaron ensayos BAMA para muestras de participantes en la Visita 1 (Mes 0, línea base) y muestras disponibles en visitas de seguimiento (Mes 2, 4). Se midieron las respuestas de IgA, IgG1, IgG3 específicas contra SARS-CoV-2 en suero (dilución 1:50) a antígenos de SARS-CoV-2 en un instrumento Bio-Plex (Bio-Rad). El software Bioplex proporciona 2 lecturas: una intensidad media de fluorescencia restada del fondo (MFI), donde el fondo se refiere a un control a nivel de placa (es decir, un pocillo en blanco ejecutado en cada placa), y una concentración basada en una curva estándar. Se considerarán respuestas positivas en cada visita si los valores de MFI menos el blanco son ≥ el punto de corte específico de isotipo, antígeno y dilución (será proporcionado por el laboratorio). Los MFI menos el blanco (o MFI neto) se utilizan para resumir la magnitud en un momento dado.<\/p>

La tabla resume la magnitud de la respuesta de unión de anticuerpos específicos contra SARS-CoV-2 mediante ensayo multiplex de anticuerpos de unión (BAMA IgG3) en la Visita 1, 2, en general y por región y grupo de comorbilidad en la Cohorte América<\/p>

Se realizaron ensayos BAMA para muestras de participantes en la Visita 1 (Mes 0, línea base) y muestras disponibles en visitas de seguimiento (Mes 2, 4). Se midieron las respuestas de IgA, IgG1, IgG3 específicas del SARS-CoV-2 en suero (dilución 1:50) a antígenos del SARS-CoV-2 en un instrumento Bio-Plex (Bio-Rad). El software Bioplex proporciona 2 lecturas: una intensidad media de fluorescencia con sustracción de fondo (MFI), donde el fondo se refiere a un control a nivel de placa (es decir, un pocillo en blanco ejecutado en cada placa), y una concentración basada en una curva estándar. Se considerarán respuestas positivas en cada visita si los valores de MFI menos el blanco son ≥ al punto de corte específico de isotipo, antígeno y dilución (proporcionado por el laboratorio). Los MFI menos el blanco (o MFI neto) se utilizan para resumir la magnitud en un momento dado.

La tabla resume la Tasa de Respuesta de Unión de Anticuerpos Específicos del SARS-CoV-2 mediante el ensayo multiplex de unión de anticuerpos (BAMA IgA) en la Visita 1, 2, en general y por región y grupo de comorbilidad en la Cohorte de América

Se realizaron ensayos BAMA para muestras de participantes en la Visita 1 (Mes 0, línea base) y muestras disponibles en visitas de seguimiento (Mes 2, 4). Se midieron las respuestas de IgA, IgG1, IgG3 específicas del SARS-CoV-2 en suero (dilución 1:50) a antígenos del SARS-CoV-2 en un instrumento Bio-Plex (Bio-Rad). El software Bioplex proporciona 2 lecturas: una intensidad de fluorescencia media corregida por fondo (MFI), donde el fondo se refiere a un control a nivel de placa (es decir, un pocillo en blanco ejecutado en cada placa), y una concentración basada en una curva estándar. Se considerarán respuestas positivas en cada visita si los valores de MFI menos el blanco son ≥ al punto de corte específico para isotipo, antígeno y dilución (proporcionado por el laboratorio). Los valores de MFI menos el blanco (o MFI neto) se utilizan para resumir la magnitud en un momento dado.

La tabla resume la magnitud de la respuesta de unión de anticuerpos específicos del SARS-CoV-2 mediante el ensayo multiplex de anticuerpos de unión (BAMA IgA) en la Visita 1, 2, en general y por región y grupo de comorbilidad en la Cohorte Americana.

Los anticuerpos neutralizantes contra los coronavirus del SARS se miden en células 293T/ACE2 para todas las muestras VIH negativas. También se mide el IPM (inhibición porcentual máxima). Las determinaciones de positividad son un valor ID50/ID80 (dosis inhibitoria del 50% y 80%) superior a 20 (el límite inferior de detección del ensayo) o un IPM entre el 10% y el 50%. Los anticuerpos neutralizantes ID50/ID80 de todas las muestras VIH positivas se miden mediante un ensayo diferente, el ensayo de neutralización con pseudovirus VSV. Las determinaciones de positividad se basan en si se observa o no neutralización en toda la titulación (dilución inicial 1:20) con un IPM entre el 10% y el 50%. Para las determinaciones positivas en las que la neutralización no alcanza el 50% o el 80%, el título ID50/ID80 se estima primero con Prism.

La tabla resume la tasa de respuesta de unión de anticuerpos específicos del SARS-CoV-2 mediante el ensayo de anticuerpos neutralizantes (NAb) en las visitas 1, 2, 3, 4, en general y por región y grupo de comorbilidad en la cohorte de América.

Los anticuerpos neutralizantes contra los coronavirus del SARS se miden en células 293T/ACE2 para todas las muestras VIH negativas. También se mide el IPM (inhibición porcentual máxima). Las determinaciones de positividad son un valor ID50/ID80 (dosis inhibitoria al 50% y 80%) >20 (el límite inferior de detección (LID) del ensayo) o el IPM está entre el 10%-50%. La ID50/ID80 de anticuerpos neutralizantes de todas las muestras VIH positivas se mide mediante un ensayo diferente, el ensayo de neutralización con pseudovirus VSV. Las determinaciones de positividad se basan en si se observa o no neutralización a lo largo de toda la titulación (dilución inicial 1:20) con IPM entre 10%-50%. Para las determinaciones positivas en las que la neutralización no alcanza el 50% u 80%, el título ID50/ID80 se estima primero mediante Prism.

La tabla resume la magnitud de la respuesta de unión de anticuerpos específicos del SARS-CoV-2 mediante el ensayo de anticuerpos neutralizantes (NAb) en la Visita 1, 2, 3, 4, en general y por región y grupo de comorbilidad en la Cohorte de América.

Se miden anticuerpos neutralizantes contra los coronavirus del SARS en células 293T/ACE2 para todas las muestras VIH negativas. También se mide el IPM (inhibición porcentual máxima). Las determinaciones de positividad son un valor ID50/ID80 (dosis inhibitoria del 50% y 80%) superior a 20 (el límite inferior de detección del ensayo) o el IPM está entre el 10% y el 50%. El ID50/ID80 de anticuerpos neutralizantes de todas las muestras VIH positivas se mide mediante un ensayo diferente, el ensayo de neutralización con pseudovirus VSV. Las determinaciones de positividad se basan en si se observa o no neutralización en toda la titulación (dilución inicial 1:20) con IPM entre el 10% y el 50%. Para las determinaciones positivas en las que la neutralización no alcanza el 50% u 80%, el título ID50/ID80 se estima primero con Prism.

La tabla resume la tasa de respuesta de unión de anticuerpos específicos del SARS-CoV-2 mediante el ensayo de anticuerpos neutralizantes (NAb) en la Visita 1, 2, 3, 4, en general y por región y grupo de comorbilidad en la Cohorte de África.

Se miden los anticuerpos neutralizantes contra los coronavirus del SARS en células 293T/ACE2 para todas las muestras negativas para VIH. También se mide el MPI (inhibición porcentual máxima). Las determinaciones de positividad son un valor ID50/ID80 (dosis inhibitoria del 50% y 80%) >20 (el límite inferior de detección (LLOD) del ensayo) o el MPI está entre el 10%-50%. La ID50/ID80 de anticuerpos neutralizantes de todas las muestras positivas para VIH se mide mediante un ensayo diferente, el ensayo de neutralización con pseudovirus VSV. Las determinaciones de positividad se basan en si se observa o no neutralización a lo largo de toda la titulación (dilución inicial 1:20) con MPI entre el 10%-50%. Para las determinaciones positivas en las que la neutralización no alcanza el 50% u 80%, el título ID50/ID80 se estima primero mediante Prism.

La tabla resume la magnitud de la respuesta de unión de anticuerpos específicos de SARS-CoV-2 mediante el ensayo de anticuerpos neutralizantes (NAb) en las Visitas 1, 2, 3, 4, en general y por región y grupo de comorbilidad en la Cohorte de África.

La degranulación de células NK dependiente de anticuerpos se medirá mediante un ensayo de ADCC a una dilución de 1:500. Los dos resultados serán el porcentaje de células NK CD107A+ corregido por el fondo para las células infectadas y el porcentaje de células NK CD107A+ corregido por el fondo para las células transfectadas. Se considerarán respuestas positivas si los valores del porcentaje de CD107A+ corregido por el fondo son ≥ 4,07 y ≥ 5,27 para las células infectadas y transfectadas, respectivamente. Los puntos de corte se determinan mediante la media+2DE, respectivamente, a partir de los controles negativos de SARS-CoV-2. El porcentaje de células NK CD107a+ fue la magnitud de la respuesta.

La tabla resume la tasa de respuesta de unión de anticuerpos específicos del SARS-CoV-2 mediante el ensayo de citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC) en la Visita 1, en general y por región y grupo de comorbilidad en la Cohorte Americana.

La desgranulación de células NK dependiente de anticuerpos se medirá mediante el ensayo ADCC a una dilución de 1:500. Dos lecturas serán el porcentaje de células NK CD107A+ corregido por el fondo para las células infectadas y el porcentaje de células NK CD107A+ corregido por el fondo para las células transfectadas. Se considerarán respuestas positivas si los valores del porcentaje de CD107A+ corregido por el fondo son ≥ 4,07 y ≥5,27 para las células infectadas y transfectadas, respectivamente. Los puntos de corte se determinan mediante la media+2DE, respectivamente, a partir de los controles negativos de SARS-CoV-2. El porcentaje de células NK CD107a+ fue la magnitud de la respuesta.

La tabla resume la magnitud de la respuesta de unión de anticuerpos específicos de SARS-CoV-2 mediante el ensayo de citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC) en la Visita 1, en general y por región y grupo de comorbilidad en la Cohorte América.

La citometría de flujo se utilizó para examinar las respuestas de células T CD4+ y CD8+ específicas del SARS-CoV-2 mediante una tinción intracelular de citocinas (ICS). Las determinaciones positivas se realizarán utilizando la prueba exacta de positividad de Fisher para todos los marcadores. Las magnitudes se expresan como el porcentaje de células T que expresan IFN-γ/IL-2.

La tabla resume la tasa de respuesta de células T CD4+ y CD8+ específicas del SARS-CoV-2 mediante citometría de flujo en la Visita 1, en general y por región y grupo de comorbilidad en la Cohorte de América.

Se utilizó citometría de flujo para examinar las respuestas de células T CD4+ y CD8+ específicas del SARS-CoV-2 mediante una tinción intracelular de citocinas (ICS). Las determinaciones positivas se realizarán utilizando la prueba de positividad exacta de Fisher para todos los marcadores. Las magnitudes se expresan como el porcentaje de células T que expresan IFN-γ/IL-2.

La tabla resume la magnitud de la respuesta de células T CD4+ y CD8+ específicas del SARS-CoV-2 mediante citometría de flujo en la Visita 1, en general y por región y Grupo de Comorbilidades en la Cohorte Americana.

Se identificaron y caracterizaron las respuestas de células B específicas del SARS-CoV-2 y los datos fenotípicos de células B utilizando proteínas Env recombinantes marcadas con fluorescencia (S6P y RBD) en combinación con un panel de anticuerpos de citometría de flujo en todas las muestras disponibles de la visita de inscripción (V1). La muestra se incluirá en el análisis solo si el número de células B IgD- es igual o mayor a 1000 para esa muestra.

La tabla resume la magnitud de la respuesta de células B de memoria específicas del SARS-CoV-2 mediante citometría de flujo en la Visita 1, en general y por región y grupo de comorbilidad en la Cohorte América.

Se realizaron ensayos BAMA para muestras de participantes en la Visita 1 (Mes 0, línea base) y muestras disponibles en visitas de seguimiento (Mes 2, 4). Las respuestas de IgA, IgG1, IgG3 específicas para SARS-CoV-2 en suero (dilución 1:50) frente a antígenos de SARS-CoV-2 se midieron en un instrumento Bio-Plex (Bio-Rad). El software Bioplex proporciona 2 lecturas: una intensidad media de fluorescencia con sustracción de fondo (MFI), donde fondo se refiere a un control a nivel de placa (es decir, un pocillo en blanco ejecutado en cada placa), y una concentración basada en una curva estándar. Se considerarán respuestas positivas en cada visita si los valores de MFI menos el blanco son ≥ al punto de corte específico para isotipo, antígeno y dilución (será proporcionado por el laboratorio). Los MFI menos el blanco (o MFI neto) se utilizan para resumir la magnitud en un momento dado.

La tabla resume la Magnitud de la Respuesta de Unión de Anticuerpos específica para SARS-CoV-2 mediante el ensayo multiplex de anticuerpos de unión (BAMA IgA muestra nasal) en la Visita 1, 2, 3, en general y por región y grupo de inscripción en la Cohorte Americana.