Efecto del desbridamiento periodontal sobre los niveles de leptina en obesos

Definición de la muestra: Se reclutaron 30 pacientes de la Unidad de Diagnóstico de la Facultad de Odontología de la Universidad Andrés Bello (DUFD), campus Viña del Mar, con el diagnóstico de Periodontitis Generalizada Estadio II, III o IV, grado B o C que fueron catalogados como normopeso, obesidad clase I y obesidad clase II que además cumplen los criterios de inclusión y exclusión. Una vez que los pacientes aceptaron la invitación a participar en el Proyecto de Investigación, se les proporcionaron todos los detalles y se les solicitó la firma del Consentimiento Informado.

Cálculo del tamaño de la muestra: El tamaño de muestra mínimo necesario para validar la investigación se basa en el estudio y los resultados explicados por Gonçalves, et al (2015), con base en la varianza de las diferencias de IMC de cada clasificación. Considerando los datos anteriores y utilizando un nivel de significación del 1%, una potencia estadística del 90% y un error de estimación de 1, se estimó un mínimo de 12 pacientes para cada grupo de normopeso, obesidad clase I y obesidad clase II. Con el fin de hacer una distinción notoria entre los grupos (obesidad clase I y clase II) y sin afectar los resultados de este estudio, se consideraron 10 pacientes para cada grupo de estudio.

Protocolo y examen clínico: De los 30 pacientes iniciales al inicio del estudio, 27 fue el número de pacientes que finalmente participaron en el mismo, como consecuencia de 1 pérdida de seguimiento y 2 pacientes que interrumpieron su tratamiento. Se formaron dos grupos experimentales considerando pacientes con obesidad clase I y clase II. El tercer grupo tuvo fines de control y estuvo compuesto por pacientes de normopeso.

La presencia o no de Obesidad fue determinada por el IMC, un indicador según la Organización Mundial de la Salud (OMS) que clasifica a la población adulta en varias categorías de peso utilizando datos de talla y peso. Esta información fue medida y registrada por un solo examinador dentro del estudio. No se observaron problemas de cumplimiento y todos los pacientes siguieron el protocolo del estudio. Ninguno de los sujetos informó efectos adversos específicos.

Tipo y diseño de estudio Ensayo clínico aleatorizado. Método de muestreo: Probabilístico Estratificado. Tamaño de la muestra: 27 sujetos en total, divididos en 3 grupos de: 9 pacientes con peso normal, 9 pacientes con Obesidad clase I y 9 pacientes con Obesidad clase II.

Estandarización y calibración: Para ejecutar un proceso debidamente estandarizado, se utilizaron únicamente instrumentos e insumos de la misma marca comercial: el diagnóstico periodontal se realizó siempre en un determinado sillón odontológico de la Clínica Odontológica del DUFD, bajo el mismo sistema de iluminación utilizando un North Carolina Periodontal Probe (Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, Illinois, EE. UU.). Solo un examinador (FP) realizó el diagnóstico y las medidas antropométricas; estos últimos fueron medidos en balanza y cinta métrica en la Clínica Odontológica del DUFD.

Fue necesaria una calibración entre examinadores para fines de diagnóstico y registro periodontal. Esto se realizó entre el único examinador (FP) calibrado por el investigador principal (MN) de acuerdo con un conjunto de registros de calibración, que evaluó 2 sitios en 4 dientes en un individuo específico. Estos datos se analizaron según el coeficiente de correlación de concordancia de Lin.

Medidas Antropométricas: Un solo examinador indagó todas las medidas de peso (Kg) y talla (cm). El IMC se calculó dividiendo el peso por el cuadrado de la altura. Los pacientes fueron catalogados en un rango de peso normal cuando su IMC fluctuó entre 18,50 y 24,99 kg/m2, Obesidad Clase I con un IMC entre 30,00 a 34,99 kg/m2 y Obesidad Clase II con un IMC entre 35 ,00 y 39,99 kg/m2, según la OMS.

Desbridamiento periodontal: Los pacientes fueron instruidos según la Técnica de Cepillado de Bass Modificada y se les proporcionó los elementos necesarios para realizarlo correctamente (cepillo dental, pasta dental y cepillo interdental Dentaid®). Un examinador exclusivo (IP) realizó un desbridamiento supragingival y subgingival consistente en la eliminación de biopelícula y cálculo dental utilizando un raspador ultrasónico (DTE®, Guilin Woodpecker Medical Instrument Co., Ltd., Guilin, Guangxi, P.R. China), seguido de raspado y alisado radicular en sitios con profundidad de sondaje ≥ 5 mm y nivel de inserción clínica ≥ 4 mm, utilizando curetas Gracey (Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, Illinois, EE. UU.). Este tratamiento se realizó a todos los pacientes teniendo 1-2 horas de trabajo dentro de 2-4 sesiones máximo. Los procedimientos se realizaron bajo anestesia local. Los pacientes fueron llamados a revisión a los 3 meses del tratamiento.

Evaluación clínica: los pacientes pasaron por una evaluación clínica al comienzo del tratamiento y después de 3 meses desde la terapia. El gráfico periodontal se completó con una Sonda Periodontal de Carolina del Norte (Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, Illinois, EE. UU.) que midió PD, CAL, presencia de biopelícula, sangrado al sondaje, supuración y movilidad.

Muestras de suero: A todos los pacientes se les realizó una toma de muestras de sangre consistente en la extracción de 4 mililitros de sangre venosa periférica de la fascia antecubital del brazo con aguja calibre 20 y se mantuvieron almacenadas en 6 mililitros de suero Becton Dickinson (BD)Vacutainer® tubos Una hora después de este proceso, la muestra de sangre se centrifugó a 4000 revoluciones por minuto (rpm) durante 10 minutos, separándose así el resto de los componentes de la sangre, los cuales se distribuyeron en alícuotas y se almacenaron a -80 grados centígrados (ºC) durante análisis mas extenso.

ELISA: Un examinador capacitado (IP) analizó las muestras de suero utilizando el kit Leptin ELISA (Thermo Fisher Scientific®., Massachusetts, EE. UU.). Los ensayos se realizaron de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Este Kit ELISA se basa en la técnica "sándwich" de ELISA, es decir, anticuerpos contra un antígeno específico que recubren las paredes de los recipientes del kit ELISA. Dado que este kit funciona por inmunoadsorción, la intensidad de color del producto fue directamente proporcional a la concentración de antígeno presente en la muestra. La densidad óptica del lector de placas se ajustó a 450 mm. Los resultados se midieron como la concentración en mililitros de suero (pg/mL).