Влияние обработки пародонта на уровень лептина у пациентов с ожирением

Определение выборки: 30 пациентов были набраны из диагностического отделения стоматологического факультета Университета Андреса Белло (DUFD), кампус Винья-дель-Мар, с диагнозом генерализованный пародонтит стадии II, III или IV, степени B или C, которые были внесены в каталог как нормальный вес, ожирение I степени и ожирение II степени, которые также соответствуют критериям включения и исключения. После того как пациенты приняли приглашение принять участие в Исследовательском проекте, им сообщили все детали и попросили подписать форму информированного согласия.

Расчет размера выборки. Минимальный размер выборки, необходимый для валидации исследования, основан на исследовании и результатах, объясненных Гонсалвесом и др. (2015) на основе дисперсии различий ИМТ по каждой классификации. Принимая во внимание предыдущие данные и используя уровень значимости 1%, статистическую мощность 90% и ошибку оценки 1, было оценено как минимум 12 пациентов для каждой группы с нормальным весом, ожирением I степени и ожирением II степени. С целью заметного разграничения между группами (ожирение I и II степени) и не влияя на результаты данного исследования, в каждую группу исследования было включено по 10 пациентов.

Протокол и клиническое обследование: Из 30 первоначальных пациентов в начале исследования 27 составили число пациентов, которые в конечном итоге приняли в нем участие, в результате 1 потери трассировки и 2 пациентов, прервавших лечение. Были сформированы две экспериментальные группы с учетом пациентов с ожирением I и II степени. Третья группа имела контрольное назначение и состояла из пациентов с нормальной массой тела.

Наличие или отсутствие ожирения определялось по ИМТ, показателю Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), который классифицирует взрослое население по нескольким категориям веса с использованием данных о росте и весе. Эта информация была измерена и зарегистрирована только одним исследователем в рамках исследования. Проблем с соблюдением режима лечения отмечено не было, и все пациенты следовали протоколу исследования. Ни один субъект не сообщил о конкретных побочных эффектах.

Тип и дизайн исследования Рандомизированное клиническое исследование. Метод выборки: Вероятностно-стратифицированный. Размер выборки: всего 27 субъектов, разделенных на 3 группы: 9 пациентов с нормальным весом, 9 пациентов с ожирением I степени и 9 пациентов с ожирением II степени.

Стандартизация и калибровка: для выполнения должным образом стандартизированного процесса использовались только инструменты и расходные материалы одной и той же торговой марки: диагностика пародонта всегда проводилась в определенном стоматологическом кресле в стоматологической клинике DUFD, при той же системе освещения с использованием северного Зонд Carolina Periodontal Probe (Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Чикаго, Иллинойс, США). Только один экзаменатор (FP) проводил диагностику и антропометрические измерения; эти последние были измерены с помощью весов и измерительной ленты в стоматологической клинике DUFD.

Межэкзаменаторская калибровка была необходима для диагностических целей и картирования пародонта. Это было выполнено между единственным исследователем (FP), калиброванным главным исследователем (MN) в соответствии с набором записей калибровки, который оценивал 2 участка в 4 зубах у конкретного человека. Эти данные были проанализированы в соответствии с коэффициентом корреляции соответствия Лина.

Антропометрические измерения: только один экзаменатор запросил все измерения веса (кг) и роста (см). ИМТ рассчитывали путем деления веса на квадрат роста. Пациенты были зарегистрированы в диапазоне нормального веса, когда их ИМТ колебался между 18,50 и 24,99 кг/м2, ожирение I степени с ИМТ от 30,00 до 34,99 кг/м2 и ожирение II степени с ИМТ между 35 ,00 y 39,99 кг/м2, по данным ВОЗ.

Санация пародонта: пациенты были проинструктированы в соответствии с модифицированной техникой чистки зубов Bass и снабжены необходимыми предметами для ее правильного выполнения (зубная щетка Dentaid®, зубная паста и межзубная щетка). Эксклюзивный эксперт (IP) провел наддесневую и поддесневую санацию, соответствующую удалению биопленки и зубного камня, с использованием ультразвукового скейлера (DTE®, Guilin Woodpecker Medical Instrument Co., Ltd., Гуйлинь, Гуанси, КНР), с последующим удалением зубного камня и строганием корня. в местах с глубиной зондирования ≥ 5 мм и уровнем клинического прикрепления ≥ 4 мм с использованием кюрет Gracey (Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Чикаго, Иллинойс, США). Это лечение проводилось всем пациентам, занимавшим 1-2 часа работы в течение максимум 2-4 сеансов. Процедуры проводились под местной анестезией. Пациенты были вызваны на контрольный осмотр через 3 месяца после лечения.

Клиническая оценка: Пациенты прошли клиническую оценку в начале лечения и через 3 месяца после терапии. Пародонтальная карта была заполнена с использованием периодонтального зонда North Carolina (Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Чикаго, Иллинойс, США), измеряя PD, CAL, наличие биопленки, кровотечение при зондировании, нагноение и подвижность.

Образцы сыворотки: Всем пациентам был проведен сбор образцов крови, состоящий из извлечения 4 миллилитров периферической венозной крови из локтевой фасции руки иглой 20-го калибра и сохраненной в 6 миллилитрах сыворотки Becton Dickinson (BD) Vacutainer®. трубы. Через час после этого процесса образец крови центрифугировали при 4000 оборотов в минуту (об/мин) в течение 10 минут, отделяя таким образом остальные компоненты крови, которые распределяли по аликвотам и хранили при температуре -80 градусов Цельсия (ºC) в течение 10 минут. дальнейший анализ.

ELISA: Один обученный эксперт (IP) проанализировал образцы сыворотки с использованием набора для ELISA на лептин (Thermo Fisher Scientific®, Массачусетс, США). Испытания проводились в соответствии с инструкциями производителя. Этот набор ELISA основан на методе «сэндвича» для ELISA, то есть антитела против определенного антигена покрывают стенки реципиентов набора ELISA. Поскольку этот набор работает по принципу иммуноадсорбции, интенсивность окраски продукта прямо пропорциональна концентрации антигена, присутствующего в образце. Оптическую плотность планшет-ридера доводили до 450 мкм. Результаты измеряли как концентрацию в миллилитрах сыворотки (пг/мл).