Vliv parodontálního debridementu na hladiny leptinu u obézních

Definice vzorku: 30 pacientů bylo přijato z Diagnostické jednotky Fakulty zubního lékařství Univerzity Andrese Bella (DUFD), kampus Viña del Mar, s diagnózou generalizované parodontitidy stadium II, III nebo IV, stupeň B nebo C, kteří byli katalogizováni jako normální hmotnost, obezita I. třídy a obezita II. třídy, kteří rovněž splňují kritéria pro zařazení a vyloučení. Jakmile pacienti přijali pozvání k účasti na Investigativním projektu, dostali všechny podrobnosti a byli požádáni, aby podepsali formulář informovaného souhlasu.

Výpočet velikosti vzorku: Minimální velikost vzorku nezbytná pro validaci šetření je založena na studii a výsledcích vysvětlených Gonçalvesem, et al (2015), na základě rozptylu rozdílů BMI každé klasifikace. Vezmeme-li v úvahu dřívější data a za použití hladiny významnosti 1 %, statistické síly 90 % a chyby odhadu 1, bylo odhadnuto minimálně 12 pacientů pro každou skupinu s normální hmotností, obezitou I. třídy a obezitou II. Za účelem zřetelného rozlišení mezi skupinami (obezita I. a II. třídy) a bez ovlivnění výsledků této studie bylo zvažováno 10 pacientů pro každou skupinu studie.

Protokol a klinické vyšetření: Z 30 počátečních pacientů na začátku studie bylo 27 pacientů, kteří se jí nakonec zúčastnili, v důsledku 1 ztráty sledování a 2 pacientů, kteří přerušili léčbu. Byly vytvořeny dvě experimentální skupiny s ohledem na pacienty s obezitou I. a II. třídy. Třetí skupina měla kontrolní účely a tvořili ji pacienti s normální hmotností.

Přítomnost či nepřítomnost obezity byla stanovena pomocí BMI, což je ukazatel podle Světové zdravotnické organizace (WHO), který klasifikuje dospělou populaci do několika hmotnostních kategorií pomocí údajů o výšce a váze. Tyto informace byly měřeny a registrovány pouze jedním zkoušejícím v rámci studie. Nebyly zaznamenány žádné problémy s compliance a všichni pacienti postupovali podle protokolu studie. Žádný subjekt neuvedl specifické nežádoucí účinky.

Typ a design studie Randomizovaná klinická studie. Metoda vzorkování: Pravděpodobnostní stratifikovaná. Velikost vzorku: celkem 27 subjektů, rozdělených do 3 skupin: 9 pacientů s normální hmotností, 9 pacientů s obezitou třídy I a 9 pacientů s obezitou třídy II.

Standardizace a kalibrace: Pro provedení řádně standardizovaného procesu byly použity pouze nástroje a zásoby stejné komerční značky: parodontologická diagnostika byla vždy prováděna na určeném stomatologickém křesle na stomatologické klinice DUFD, pod stejným osvětlovacím systémem s použitím North Carolina Periodontal Probe (Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, Illinois, USA). Diagnostiku a antropometrická měření prováděl pouze jeden vyšetřující lékař (FP); tyto poslední byly změřeny na váze a měřicí pásce na stomatologické klinice DUFD.

Pro diagnostické účely a periodontální mapování byla nezbytná kalibrace mezi vyšetřujícím lékařem. To bylo provedeno mezi jediným vyšetřujícím (FP) kalibrovaným hlavním řešitelem (MN) podle záznamové sady kalibrací, která hodnotila 2 místa ve 4 zubech u konkrétního jedince. Tato data byla analyzována podle Linova konkordančního korelačního koeficientu.

Antropometrická měření: Pouze jeden zkoušející zjišťoval všechny míry hmotnosti (kg) a výšky (cm). BMI bylo vypočteno vydělením hmotnosti druhou mocninou výšky. Pacienti byli katalogizováni v rozmezí normální hmotnosti, když jejich BMI kolísalo mezi 18,50 a 24,99 kg/m2, obezita I. třídy s BMI mezi 30,00 a 34,99 kg/m2 a obezita II. třídy s BMI mezi 35 ,00 y 39,99 kg/m2, dle WHO.

Parodontální debridement: Pacienti byli instruováni podle Modified Bass Brushing Technique a byly jim poskytnuty potřebné položky pro jeho správné provedení (dentální kartáček Dentaid®, zubní pasta a mezizubní kartáček). Exkluzivní vyšetřující lékař (IP) provedl supragingivální a subgingivální debridement konzistentní s odstraněním biofilmu a zubního kamene pomocí ultrazvukového odstraňovače zubního kamene (DTE®, Guilin Woodpecker Medical Instrument Co., Ltd., Guilin, Guangxi, P.R. China), po kterém následovalo olupování a hoblování kořenů v místech s hloubkou sondy ≥ 5 mm a úrovní klinického připojení ≥ 4 mm pomocí kyret Gracey (Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, Illinois, USA). Toto ošetření bylo provedeno u všech pacientů, kteří pracovali 1-2 hodiny v rámci 2-4 maximálně sezení. Zákroky byly prováděny v lokální anestezii. Pacienti byli pozváni na kontrolu 3 měsíce po léčbě.

Klinické hodnocení: Pacienti prošli klinickým hodnocením na začátku léčby a po 3 měsících od terapie. Parodontální diagram byl dokončen pomocí North Carolina Periodontal Probe (Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, Illinois, USA) měřením PD, CAL, přítomnost biofilmu, krvácení při sondování, hnisání a pohyblivost.

Vzorky séra: Všichni pacienti prošli odběrem vzorků krve spočívajícím v extrakci 4 mililitrů periferní žilní krve z předloktní fascie paže jehlou 20Gauge a uchovávali se v 6 mililitrech séra Becton Dickinson (BD)Vacutainer® trubky. Hodinu po tomto procesu byl vzorek krve odstřeďován při 4000 otáčkách za minutu (ot./min) po dobu 10 minut, čímž se oddělily zbývající složky krve, které byly rozděleny v alikvotech a skladovány při -80 stupních Celsia (ºC) po dobu další analýza.

ELISA: Jeden vyškolený zkoušející (IP) analyzoval vzorky séra pomocí soupravy Leptin ELISA Kit (Thermo Fisher Scientific®., Massachusetts, USA). Pokusy byly provedeny podle pokynů výrobce. Tato souprava ELISA je založena na "sendvičové" technice pro ELISA, to znamená, že protilátky proti specifickému antigenu pokrývají stěny příjemců soupravy ELISA. Protože tato souprava funguje na principu imunoadsorpce, intenzita barvy produktu byla přímo úměrná koncentraci antigenu přítomného ve vzorku. Optická hustota čtečky destiček byla nastavena na 450 mm. Výsledky byly měřeny jako koncentrace v mililitrech séra (pg/ml).