Efeito do Desbridamento Periodontal nos Níveis de Leptina em Obesos

Definição da amostra: 30 pacientes foram recrutados na Unidade de Diagnóstico da Faculdade de Odontologia da Universidade Andrés Bello (DUFD), campus Viña del Mar, com o diagnóstico de Periodontite Generalizada Estágio II, III ou IV, grau B ou C que foram catalogados como eutrófico, obesidade grau I e obesidade grau II que também atendem aos critérios de inclusão e exclusão. Uma vez aceito o convite para participar do Projeto Investigativo, os pacientes receberam todos os detalhes e foram solicitados a assinar o Termo de Consentimento Livre e Esclarecido.

Cálculo do Tamanho da Amostra: O tamanho mínimo da amostra necessário para validar a investigação é baseado no estudo e resultados explicados por Gonçalves, et al (2015), baseado na variância das diferenças de IMC de cada classificação. Considerando os primeiros dados e usando um nível de significância de 1%, um poder estatístico de 90% e um erro de estimativa de 1, estimou-se um mínimo de 12 pacientes para cada grupo de peso normal, obesidade grau I e obesidade grau II. Com o objetivo de fazer uma distinção perceptível entre os grupos (obesidade grau I e grau II) e sem afetar os resultados deste estudo, foram considerados 10 pacientes para cada grupo de estudo.

Protocolo e exame clínico: Dos 30 pacientes iniciais no início do estudo, 27 foi o número de pacientes que finalmente participaram, como resultado de 1 perda de traçado e 2 pacientes que interromperam o tratamento. Dois grupos experimentais foram formados considerando pacientes com obesidade classe I e classe II. O terceiro grupo teve fins de controle e foi composto por pacientes com peso normal.

A presença ou não de Obesidade foi determinada pelo IMC, indicador segundo a Organização Mundial da Saúde (OMS) que classifica a população adulta em diversas categorias de peso por meio de dados de altura e peso. Essas informações foram mensuradas e registradas por apenas um examinador dentro do estudo. Não foram observados problemas de adesão e todos os pacientes seguiram o protocolo do estudo. Nenhum sujeito relatou efeitos adversos específicos.

Tipo e desenho do estudo Ensaio Clínico Randomizado. Método de amostragem: Probabilístico Estratificado. Tamanho da amostra: 27 indivíduos no total, divididos em 3 grupos de: 9 pacientes com peso normal, 9 pacientes com obesidade classe I e 9 pacientes com obesidade classe II.

Padronização e calibração: Para executar um processo devidamente padronizado, foram utilizados apenas instrumentos e insumos da mesma marca comercial: o diagnóstico periodontal foi sempre realizado em uma determinada cadeira odontológica na Clínica Odontológica da DUFD, sob o mesmo sistema de iluminação usando um norte Carolina Periodontal Probe (Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, Illinois, EUA). Apenas um examinador (FP) realizou o diagnóstico e as medidas antropométricas; estes últimos foram medidos em balança e fita métrica na Clínica Odontológica da DUFD.

Uma calibração interexaminador foi necessária para fins de diagnóstico e mapeamento periodontal. Isso foi realizado entre o único examinador (FP) calibrado pelo investigador principal (MN) de acordo com um conjunto de registros de calibração, que avaliou 2 locais em 4 dentes em um indivíduo específico. Esses dados foram analisados ​​de acordo com o Coeficiente de Correlação de Concordância de Lin.

Medidas antropométricas: Um único examinador consultou todas as medidas de peso (Kg) e altura (cm). O IMC foi calculado dividindo-se o peso pela altura ao quadrado. Os pacientes foram classificados em uma faixa de peso normal quando seu IMC flutuava entre 18,50 e 24,99 kg/m2, Obesidade Classe I com IMC entre 30,00 a 34,99 kg/m2 e Obesidade Classe II com IMC entre 35 ,00 y 39,99 kg/m2, segundo a OMS.

Desbridamento periodontal: Os pacientes foram instruídos de acordo com a Técnica de Escovação Bass Modificada e foram fornecidos os itens necessários para realizá-lo adequadamente (escova dental Dentaid®, creme dental e escova interdental). Um examinador exclusivo (IP) realizou desbridamento supragengival e subgengival consistente na remoção de biofilme e cálculo dentário usando um raspador ultrassônico (DTE®, Guilin Woodpecker Medical Instrument Co., Ltd., Guilin, Guangxi, P.R. China), seguido de raspagem e alisamento da raiz em locais com profundidade de sondagem ≥ 5mm e nível de inserção clínica ≥ 4mm, usando curetas Gracey (Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, Illinois, EUA). Este tratamento foi realizado a todos os pacientes com 1-2 horas de trabalho em 2-4 sessões no máximo. Os procedimentos foram realizados sob anestesia local. Os pacientes foram chamados para um check-up em 3 meses após o tratamento.

Avaliação clínica: Os pacientes passaram por uma avaliação clínica no início do tratamento e após 3 meses desde a terapia. O gráfico periodontal foi preenchido usando um North Carolina Periodontal Probe (Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, Illinois, EUA) medindo PD, CAL, presença de biofilme, sangramento à sondagem, supuração e mobilidade.

Amostras de soro: Todos os pacientes passaram por coleta de amostra de sangue consistindo na extração de 4 mililitros de sangue venoso periférico da fáscia antecubital do braço com agulha calibre 20 e mantidas armazenadas em 6 mililitros de soro Becton Dickinson (BD)Vacutainer® tubos. Uma hora após esse processo, a amostra de sangue foi centrifugada a 4000 rotações por minuto (rpm) por 10 minutos separando assim o restante dos componentes do sangue, que foram distribuídos em alíquotas e armazenados em -80 graus Celsius (ºC) para análise mais aprofundada.

ELISA: Um examinador treinado (IP) analisou as amostras de soro usando o Kit Leptina ELISA (Thermo Fisher Scientific®., Massachusetts, EUA). Os ensaios foram feitos de acordo com as instruções do fabricante. Este Kit ELISA é baseado na técnica "sanduíche" para ELISA, ou seja, anticorpos contra um antígeno específico que revestem as paredes dos recipientes do kit ELISA. Como esse kit funciona por imunoadsorção, a intensidade da cor do produto foi diretamente proporcional à concentração do antígeno presente na amostra. A densidade óptica do leitor de placas foi ajustada para 450 mm. Os resultados foram medidos como a concentração em mililitros de soro (pg/mL).