Effetto dello sbrigliamento parodontale sui livelli di leptina negli obesi

Definizione del campione: 30 pazienti sono stati reclutati dall'Unità di diagnosi della Facoltà di Odontoiatria dell'Università Andres Bello (DUFD), campus Viña del Mar, con la diagnosi di parodontite generalizzata di stadio II, III o IV, grado B o C che sono stati catalogati come peso normale, obesità di classe I e obesità di classe II che soddisfano anche i criteri di inclusione ed esclusione. Una volta che i pazienti hanno accettato l'invito a partecipare al Progetto Investigativo, sono stati forniti loro tutti i dettagli e gli è stato chiesto di firmare il modulo di consenso informato.

Calcolo della dimensione del campione: la dimensione minima del campione necessaria per convalidare l'indagine si basa sullo studio e sui risultati spiegati da Gonçalves, et al (2015), sulla base della varianza delle differenze di BMI di ciascuna classificazione. Considerando i primi dati e utilizzando un livello di significatività dell'1%, una potenza statistica del 90% e un errore di stima pari a 1, è stato stimato un minimo di 12 pazienti per ciascun gruppo di peso normale, obesità di classe I e obesità di classe II. Al fine di operare una netta distinzione tra i gruppi (obesità di classe I e classe II) e senza pregiudicare i risultati di questo studio, sono stati considerati 10 pazienti per ogni gruppo di studio.

Protocollo ed esame clinico: Dei 30 pazienti iniziali all'inizio dello studio, 27 è stato il numero di pazienti che alla fine vi hanno partecipato, a seguito di 1 perdita di tracciamento e 2 pazienti che hanno interrotto il trattamento. Sono stati formati due gruppi sperimentali considerando i pazienti obesi di classe I e II. Il terzo gruppo aveva finalità di controllo ed era composto da pazienti normopeso.

La presenza o meno dell'obesità è stata determinata dal BMI, un indicatore secondo l'Organizzazione Mondiale della Sanità (OMS) che classifica la popolazione adulta in diverse categorie di peso utilizzando i dati di altezza e peso. Queste informazioni sono state misurate e registrate da un solo esaminatore all'interno dello studio. Non sono stati rilevati problemi di compliance e tutti i pazienti hanno seguito il protocollo dello studio. Nessun soggetto ha riportato effetti avversi specifici.

Tipo e disegno dello studio Sperimentazione clinica randomizzata. Metodo di campionamento: Probabilistico Stratificato. Dimensione del campione: 27 soggetti in totale, divisi in 3 gruppi di: 9 pazienti normopeso, 9 pazienti obesi di classe I e 9 pazienti obesi di classe II.

Standardizzazione e calibrazione: Per eseguire un processo adeguatamente standardizzato, sono stati utilizzati solo strumenti e forniture della stessa marca commerciale: la diagnosi parodontale è stata sempre eseguita in una determinata poltrona odontoiatrica presso la Clinica Odontoiatrica del DUFD, sotto lo stesso sistema di illuminazione utilizzando un North Sonda parodontale Carolina (Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, Illinois, USA). Un solo esaminatore (FP) ha eseguito diagnosi e misurazioni antropometriche; questi ultimi sono stati misurati con bilancia e metro a nastro presso la Clinica Odontoiatrica del DUFD.

Una calibrazione inter-esaminatore era necessaria per scopi diagnostici e grafici parodontali. Questo è stato eseguito tra l'unico esaminatore (FP) calibrato dal ricercatore principale (MN) secondo un record set di calibrazione, che ha valutato 2 siti in 4 denti in un individuo specifico. Questi dati sono stati analizzati secondo il Concordance Correlation Coefficient di Lin.

Misure antropometriche: Un solo esaminatore ha richiesto tutte le misure di peso (Kg) e altezza (cm). Il BMI è stato calcolato dividendo il peso per il quadrato dell'altezza. I pazienti sono stati catalogati in un intervallo di peso normale quando il loro BMI oscillava tra 18,50 e 24,99 kg/m2, Obesità di Classe I con un BMI compreso tra 30,00 e 34,99 kg/m2 e Obesità di Classe II con un BMI compreso tra 35 ,00 e 39,99 kg/m2, secondo l'OMS.

Debridement parodontale: i pazienti sono stati istruiti secondo la Modified Bass Brushing Technique e sono stati forniti degli strumenti necessari per eseguirlo correttamente (spazzolino Dentaid®, dentifricio e scovolino interdentale). Un esaminatore esclusivo (IP) ha eseguito lo sbrigliamento sopragengivale e sottogengivale consistente nella rimozione del biofilm e del calcolo dentale utilizzando uno scaler ad ultrasuoni (DTE®, Guilin Woodpecker Medical Instrument Co., Ltd., Guilin, Guangxi, R.P. Cina), seguito da scaling e levigatura radicolare in siti con profondità di sondaggio ≥ 5 mm e livello di attacco clinico ≥ 4 mm, utilizzando curette di Gracey (Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, Illinois, USA). Questo trattamento è stato eseguito a tutti i pazienti prendendo 1-2 ore di lavoro entro 2-4 sessioni al massimo. Le procedure sono state eseguite in anestesia locale. I pazienti sono stati chiamati a un controllo a 3 mesi dopo il trattamento.

Valutazione clinica: i pazienti sono stati sottoposti a una valutazione clinica all'inizio del trattamento e dopo 3 mesi dalla terapia. Il grafico parodontale è stato completato utilizzando una sonda parodontale della Carolina del Nord (Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, Illinois, USA) che misura PD, CAL, presenza di biofilm, sanguinamento al sondaggio, suppurazione e mobilità.

Campioni di siero: Tutti i pazienti sono stati sottoposti ad un prelievo di sangue consistente nell'estrazione di 4 millilitri di sangue venoso periferico della fascia antecubitale del braccio con un ago calibro 20 e conservato in 6 millilitri di siero Becton Dickinson (BD)Vacutainer® tubi. Un'ora dopo questo processo, il campione di sangue è stato centrifugato a 4000 giri al minuto (rpm) per 10 minuti separando in questo modo il resto dei componenti del sangue, che sono stati distribuiti in aliquote e conservati a -80 gradi Celsius (ºC) per ulteriore analisi.

ELISA: un esaminatore qualificato (IP) ha analizzato i campioni di siero utilizzando il kit Leptin ELISA (Thermo Fisher Scientific®., Massachusetts, USA). Le prove sono state eseguite secondo le istruzioni del produttore. Questo kit ELISA si basa sulla tecnica "sandwich" per ELISA, vale a dire anticorpi contro un antigene specifico che riveste le pareti dei destinatari del kit ELISA. Poiché questo kit funziona per immunoassorbimento, l'intensità del colore del prodotto è direttamente proporzionale alla concentrazione di antigene presente nel campione. La densità ottica del lettore di lastre è stata regolata a 450 mm. I risultati sono stati misurati come concentrazione in millilitri di siero (pg/mL).