Wpływ oczyszczania przyzębia na poziom leptyny u osób otyłych

Definicja próby: Zrekrutowano 30 pacjentów z Oddziału Diagnostyki Wydziału Stomatologii Uniwersytetu Andresa Bello (DUFD), kampusu Viña del Mar, z rozpoznaniem uogólnionego zapalenia przyzębia stopnia II, III lub IV, stopnia B lub C, skatalogowanych jako o prawidłowej masie ciała, otyłość klasy I i otyłość klasy II, którzy również spełniają kryteria włączenia i wyłączenia. Po przyjęciu zaproszenia do udziału w Projekcie Badawczym pacjenci otrzymywali wszystkie szczegóły i byli proszeni o podpisanie formularza Świadomej Zgody.

Obliczanie wielkości próby: Minimalna wielkość próby niezbędna do walidacji badania opiera się na badaniu i wynikach wyjaśnionych przez Gonçalves i in. (2015), w oparciu o wariancję różnic BMI dla każdej klasyfikacji. Biorąc pod uwagę poprzednie dane i stosując poziom istotności 1%, moc statystyczną 90% i błąd oszacowania 1, oszacowano minimum 12 pacjentów dla każdej grupy z prawidłową masą ciała, otyłością klasy I i otyłością klasy II. W celu dokonania zauważalnego rozróżnienia między grupami (otyłość klasy I i II) i bez wpływu na wyniki tego badania, do każdej grupy badania przyjęto 10 pacjentów.

Protokół i badanie kliniczne: Z 30 początkowych pacjentów na początku badania, 27 to liczba pacjentów, którzy ostatecznie wzięli w nim udział, w wyniku 1 utraty śledzenia i 2 pacjentów, którzy przerwali leczenie. Utworzono dwie grupy eksperymentalne uwzględniające pacjentów z otyłością klasy I i II. Trzecia grupa miała cele kontrolne i składała się z pacjentów o normalnej masie ciała.

Obecność lub brak otyłości określono na podstawie BMI, wskaźnika według Światowej Organizacji Zdrowia (WHO), który klasyfikuje populację dorosłych w kilku kategoriach wagowych na podstawie danych dotyczących wzrostu i masy ciała. Informacje te zostały zmierzone i zarejestrowane przez tylko jednego egzaminatora w ramach badania. Nie odnotowano żadnych problemów ze stosowaniem się do zaleceń i wszyscy pacjenci postępowali zgodnie z protokołem badania. Żaden z badanych nie zgłosił specyficznych działań niepożądanych.

Rodzaj i projekt badania Randomizowane badanie kliniczne. Metoda doboru próby: Stratyfikowana probabilistycznie. Wielkość próby: łącznie 27 osób, podzielonych na 3 grupy: 9 pacjentów z prawidłową masą ciała, 9 ​​pacjentów z otyłością klasy I i 9 pacjentów z otyłością klasy II.

Standaryzacja i kalibracja: W celu przeprowadzenia prawidłowo wystandaryzowanego procesu zastosowano wyłącznie instrumenty i materiały eksploatacyjne tej samej marki handlowej: diagnostykę periodontologiczną zawsze przeprowadzano na wyznaczonym fotelu dentystycznym w Klinice Stomatologicznej DUFD, przy tym samym oświetleniu przy użyciu lampy North Sonda przyzębia Karoliny (Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, Illinois, USA). Tylko jeden egzaminator (FP) wykonał diagnostykę i pomiary antropometryczne; te ostatnie zostały zmierzone na wadze i taśmie mierniczej w Klinice Stomatologicznej DUFD.

Kalibracja między ekspertami była konieczna do celów diagnostycznych i tworzenia wykresów periodontologicznych. Zostało to przeprowadzone między jedynym egzaminatorem (FP) skalibrowanym przez głównego badacza (MN) zgodnie z zestawem zapisów kalibracji, który oceniał 2 miejsca w 4 zębach u określonej osoby. Dane te analizowano zgodnie ze współczynnikiem korelacji zgodności Lina.

Pomiary antropometryczne: Tylko jeden egzaminator zadał wszystkie pomiary wagi (kg) i wzrostu (cm). BMI obliczono dzieląc wagę przez wzrost do kwadratu. Pacjentów sklasyfikowano w normalnym zakresie wagowym, gdy ich BMI wahało się między 18,50 a 24,99 kg/m2, otyłość klasy I z BMI między 30,00 a 34,99 kg/m2 oraz otyłość klasy II z BMI między 35 ,00 y 39,99 kg/m2, według WHO.

Oczyszczanie przyzębia: Pacjenci zostali poinstruowani zgodnie ze Zmodyfikowaną Techniką Szczotkowania Bassa i otrzymali niezbędne przedmioty do prawidłowego wykonania tego zabiegu (szczoteczka do zębów Dentaid®, pasta do zębów i szczoteczka międzyzębowa). Ekskluzywny egzaminator (IP) przeprowadził oczyszczenie naddziąsłowe i poddziąsłowe zgodne z usuwaniem biofilmu i kamienia nazębnego przy użyciu skalera ultradźwiękowego (DTE®, Guilin Woodpecker Medical Instrument Co., Ltd., Guilin, Guangxi, Chiny), a następnie skaling i struganie korzeni w miejscach o głębokości sondowania ≥ 5 mm i poziomie mocowania klinicznego ≥ 4 mm przy użyciu kiret Gracey (Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, Illinois, USA). Zabieg ten wykonywano u wszystkich pacjentów wykonujących 1-2 godziny pracy w ramach maksymalnie 2-4 sesji. Zabiegi wykonywano w znieczuleniu miejscowym. Pacjenci zostali wezwani na wizytę kontrolną po 3 miesiącach od leczenia.

Ocena kliniczna: Pacjenci przeszli ocenę kliniczną na początku leczenia i po 3 miesiącach od leczenia. Wykres periodontologiczny wypełniono sondą przyzębia North Carolina (Hu-Friedy® Manufacturing Inc., Chicago, Illinois, USA) mierząc PD, CAL, obecność biofilmu, krwawienie podczas sondowania, ropienie i ruchomość.

Próbki surowicy: Wszyscy pacjenci przeszli zbiórkę krwi polegającą na pobraniu 4 mililitrów krwi żylnej obwodowej powięzi przedłokciowej ramienia igłą nr 20 i przechowywaną w 6 mililitrach surowicy Becton Dickinson (BD)Vacutainer® rury. Godzinę po tym procesie próbkę krwi wirowano z prędkością 4000 obrotów na minutę (rpm) przez 10 minut, oddzielając w ten sposób resztę składników krwi, które podzielono na porcje i przechowywano w temperaturze -80 stopni Celsjusza (ºC) przez Dalsza analiza.

ELISA: Jeden przeszkolony egzaminator (IP) przeanalizował próbki surowicy przy użyciu zestawu Leptin ELISA (Thermo Fisher Scientific®., Massachusetts, USA). Próby przeprowadzono zgodnie z zaleceniami producenta. Ten zestaw ELISA jest oparty na technice „kanapkowej” testu ELISA, to znaczy przeciwciała przeciwko określonemu antygenowi pokrywają ściany biorców zestawu ELISA. Ponieważ ten zestaw działa na zasadzie immunoadsorpcji, intensywność koloru produktu była wprost proporcjonalna do stężenia antygenu obecnego w próbce. Gęstość optyczną czytnika płytek ustawiono na 450 ?m. Wyniki mierzono jako stężenie w mililitrach surowicy (pg/ml).