La especificidad, la sensibilidad y la correlación clínica de los ensayos CBA, CBA-TSA, RIPA y ELISA en la detección de AChR y MuSK IgG

Participantes: El suero de pacientes con miastenia gravis.

Objetivo principal: Comparación de la especificidad, la sensibilidad y la correlación clínica de los ensayos CBA, CBA-TSA, RIPA y ELISA en la detección de AChR y MuSK IgG de la miastenia grave. Objetivo secundario: Analizar la ventaja del ensayo CBA-TSA cuando AChR o MuSK IgG tienen baja abundancia y baja afinidad. Para verificar la función de las subunidades AChR en la detección del anticuerpo IgG AChR a través de la prueba CBA.

Diseño del estudio: Comparación de metodologías multicéntricas, doble ciego, CBA/CBA-TSA, ELSIA y RIPA

Total de casos: 1) Reclutamiento de 3000 pacientes con sospecha de miastenia gravis. El Centro Beijing-Tianjin ya ha reclutado 1.500 casos. Al menos 50 casos para cada uno de los otros centros, reclutados competitivos.

2) Reclutar a 200 personas como controles normales que ya completó el Centro Beijing-Tianjin.

Período de prueba: la duración del reclutamiento de prueba es de 5 a 6 meses, y se estima que todo el período de estudio es de aproximadamente 8 meses.

Reactivos de investigación: 1. El método de detección de anticuerpos IgG CBA y CBA-TSA fue realizado por Tianjin Jinyu Medical Laboratory Co., Ltd. El kit de AChR o MuSK IgG CBA y CBA-TSA se adquirió de Tianjin New Terrain Biological Technology Co., Ltd, China. 2. El método de RIPA fue realizado por Beijing North Biotechnology Co., Ltd. El kit de AChR o MuSK IgG RIPA fue adquirido por RSR Limited, Reino Unido. 3. El método de ELISA fue realizado por el Laboratorio de Neuroinmunología del Hospital General de la Universidad Médica de Tianjin. El kit de AChR o MuSK IgG ELISA Kits fue adquirido por RSR Limited, Reino Unido o IBL Limited, Alemania.

Grupos: Las muestras se dividieron en 4 grupos según los métodos detectados: grupo CBA, grupo CBA-TSA, grupo RIPA y grupo ELISA.

Pasos del estudio: 1. Después de que los pacientes sospechosos de MG en cada centro coincidieran con los criterios de inclusión y exclusión, el suero de cada paciente se dividió en 4 partes iguales (500 ul/parte) y se asignó aleatoriamente a los laboratorios de pruebas CBA, ELSIA y RIPA para la detección. 2. Con base en el proceso estándar de los kits, los laboratorios de CBA, CBA-TSA, ELISA o RIPA completaron la detección del suero de los participantes, luego registraron el valor original, control o valor de referencia. El análisis de datos de sensibilidad, especificidad y correlación clínica de cada método fue resumido por Beijing-Tianjin Neuroimmunity/New Terrain. 3. La comparación de diferencias entre CBA y CBA-TSA fue completada por el Centro de Neuroinmunidad de Beijing-Tianjin. Para verificar la función de las subunidades de AChR en la detección del anticuerpo IgG de AChR a través del ensayo CBA. 4. Cada centro dará la retroalimentación del resultado final de la enfermedad de MG o no MG, clasificación (GMG u OMG), diagnóstico clínico y datos de tratamiento de los participantes al investigador. El investigador completará la evaluación de la correlación clínica respectiva de los métodos CBA, ELSIA y RIPA. 5. Las estadísticas de datos, el análisis y el resumen del proyecto son supervisados ​​por una empresa de auditoría externa.

Indicadores de evaluación:

Prospectivas: 1. Indicadores técnicos: 1) Evaluar la especificidad, sensibilidad y correlación clínica de la detección de AChR y MuSK IgG a través de los métodos CBA/CBA-TSA, ELISA y RIPA. 2) Determinar la función de las subunidades de AChR en la detección de anticuerpos IgG contra AChR a través de CBA. 3. Analizar la ventaja del método CBA modificado (CBA-TSA) en la detección de AChR o MuSK IgG en baja abundancia y baja afinidad. 4) Generar la evidencia de primer grado en los métodos de prueba de detección de anticuerpos MG AChR y MuSK.