Specificità, sensibilità e correlazione clinica dei test CBA, CBA-TSA, RIPA ed ELISA nella rilevazione di AChR e MuSK IgG

Partecipanti: Il siero dei pazienti affetti da miastenia grave.

Obiettivo primario: Confronto della specificità, sensibilità e correlazione clinica dei test CBA, CBA-TSA, RIPA ed ELISA nel rilevamento di AChR e MuSK IgG della miastenia grave. Obiettivo secondario: Analizzare il vantaggio del dosaggio CBA-TSA quando AChR o MuSK IgG sono in bassa abbondanza e bassa affinità. Per verificare la funzione delle subunità AChR nel rilevare l'anticorpo AChR IgG attraverso il test CBA.

Disegno dello studio: confronto tra metodologie multicentriche, in doppio cieco, CBA/CBA-TSA, ELSIA e RIPA

Casi totali: 1) Reclutamento di 3000 pazienti con sospetta miastenia grave. Il Centro di Pechino-Tianjin ha già reclutato 1.500 casi. Almeno 50 casi per ogni altro centro, assunti competitivi.

2) Reclutamento di 200 persone come controlli normali che ha già completato il Beijing-Tianjin Center.

Periodo di prova: la durata del reclutamento di prova è di 5-6 mesi e l'intero periodo di studio è stimato in circa 8 mesi.

Reagenti di ricerca: 1. Il metodo dell'anticorpo IgG CBA e CBA-TSA rilevato è stato eseguito da Tianjin Jinyu Medical Laboratory Co., Ltd. Il kit di AChR o MuSK IgG CBA e CBA-TSA è stato acquistato da Tianjin New Terrain Biological Technology Co., Ltd, Cina. 2. Il metodo RIPA è stato eseguito da Beijing North Biotechnology Co., Ltd. Il kit di AChR o MuSK IgG RIPA è stato acquistato da RSR Limited, Regno Unito. 3. Il metodo ELISA è stato eseguito dal laboratorio di neuroimmunologia dell'ospedale generale della Tianjin Medical University. Il kit dei kit AChR o MuSK IgG ELISA è stato acquistato da RSR Limited, Regno Unito o IBL Limited, Germania.

Gruppi: i campioni sono stati divisi in 4 gruppi in base ai metodi rilevati: gruppo CBA, gruppo CBA-TSA, gruppo RIPA e gruppo ELISA.

Fasi dello studio: 1. Dopo che i pazienti sospetti di MG in ciascun centro corrispondevano ai criteri di inclusione ed esclusione, il siero di ciascun paziente è stato diviso in 4 parti uguali (500 ul/parte) e assegnato in modo casuale ai laboratori di analisi CBA, ELSIA e RIPA per il rilevamento. 2. Sulla base del processo standard dei kit, i laboratori di CBA, CBA-TSA, ELISA o RIPA hanno completato il rilevamento del siero dei partecipanti, quindi hanno registrato il valore originale, il controllo o il valore di riferimento. L'analisi dei dati di sensibilità, specificità e correlazione clinica di ciascun metodo è stata riassunta da Beijing-Tianjin Neuroimmunity/New Terrain. 3. Il confronto delle differenze tra CBA e CBA-TSA è stato completato dal Beijing-Tianjin Neuroimmunity Center. Per verificare la funzione delle subunità AChR nel rilevare l'anticorpo AChR IgG attraverso il test CBA. 4. Ogni centro fornirà allo sperimentatore il feedback del risultato finale della malattia di MG o non MG, classificazione (GMG o OMG), diagnosi clinica e dati di trattamento dei partecipanti. Lo sperimentatore completerà la valutazione della rispettiva correlazione clinica dei metodi CBA, ELSIA e RIPA. 5. I dati statistici, l'analisi e la sintesi del progetto sono supervisionati da una società di revisione di terze parti.

Indicatori di valutazione:

Prospettiva: 1. Indicatori tecnici: 1) Valutare la specificità, la sensibilità e la correlazione clinica del rilevamento di AChR e MuSK IgG attraverso i metodi CBA/CBA-TSA, ELISA e RIPA. 2) Determinare la funzione delle subunità AChR nel rilevare l'anticorpo IgG AChR attraverso CBA. 3. Analizzare il vantaggio del metodo CBA modificato (CBA-TSA) nel rilevare AChR o MuSK IgG in bassa abbondanza e bassa affinità. 4) Generare l'evidenza di primo grado nei metodi di test del rilevamento degli anticorpi MG AChR e MuSK.