A especificidade, sensibilidade e correlação clínica do ensaio CBA, CBA-TSA, RIPA e ELISA na detecção de AChR e MuSK IgG

Participantes: O soro de pacientes com miastenia gravis.

Objetivo primário: Comparação da especificidade, sensibilidade e correlação clínica de CBA, CBA-TSA, RIPA e ensaio ELISA na detecção de AChR e MuSK IgG de miastenia gravis. Objetivo secundário: Analisar a vantagem do ensaio CBA-TSA quando AChR ou MuSK IgG em baixa abundância e baixa afinidade. Verificar a função das subunidades AChR na detecção do anticorpo AChR IgG por meio do teste CBA.

Desenho do estudo: Comparação de metodologia multicêntrico, duplo-cego, CBA/CBA-TSA, ELSIA e RIPA

Total de casos: 1) Recrutamento de 3.000 pacientes com suspeita de miastenia gravis. O Beijing-Tianjin Center já recrutou 1.500 casos. Pelo menos 50 casos para cada um dos outros centros, recrutamento competitivo.

2) Recrutamento de 200 pessoas como controles normais que já foram concluídos pelo Centro de Pequim-Tianjin.

Período experimental: A duração do recrutamento experimental é de 5 a 6 meses, e todo o período de estudo é estimado em cerca de 8 meses.

Reagentes de pesquisa: 1. O método de detecção de anticorpo CBA e CBA-TSA IgG foi realizado pelo Tianjin Jinyu Medical Laboratory Co., Ltd. O kit de AChR ou MuSK IgG CBA e CBA-TSA foi adquirido da Tianjin New Terrain Biological Technology Co., Ltd, China. 2. O método de RIPA foi realizado pela Beijing North Biotechnology Co., Ltd. O kit de AChR ou MuSK IgG RIPA foi adquirido pela RSR Limited, Reino Unido. 3. O método de ELISA foi realizado pelo Laboratório de Neuroimunologia do Hospital Geral da Universidade Médica de Tianjin. O kit de AChR ou MuSK IgG ELISA foi adquirido pela RSR Limited, Reino Unido ou IBL Limited, Alemanha.

Grupos: As amostras foram divididas em 4 grupos de acordo com os métodos detectados: grupo CBA, grupo CBA-TSA, grupo RIPA e grupo ELISA.

Etapas do estudo: 1. Depois que os pacientes com suspeita de MG em cada centro corresponderam aos critérios de inclusão e exclusão, o soro de cada paciente foi dividido em 4 partes iguais (500 ul/parte) e foram aleatoriamente designados para os laboratórios de teste CBA, ELSIA e RIPA para detecção. 2. Com base no processo padrão dos kits, os laboratórios de CBA, CBA-TSA, ELISA ou RIPA concluíram a detecção do soro do participante, registrando o valor original, controle ou valor de referência. A análise dos dados de sensibilidade, especificidade e correlação clínica de cada método foi resumida por Beijing-Tianjin Neuroimmunity/New Terrain. 3. A comparação da diferença entre CBA e CBA-TSA foi concluída pelo Beijing-Tianjin Neuroimmunity Center. Verificar a função das subunidades AChR na detecção do anticorpo AChR IgG através do ensaio CBA. 4. Cada centro fornecerá ao investigador o resultado final da doença de MG ou não MG, classificação (GMG ou OMG), diagnóstico clínico e dados de tratamento dos participantes. O investigador concluirá a avaliação da respectiva correlação clínica dos métodos CBA, ELSIA e RIPA. 5. As estatísticas de dados, análise e resumo do projeto são supervisionados por uma empresa de auditoria terceirizada.

Indicadores de avaliação:

Prospectivo: 1. Indicadores técnicos: 1) Avaliar a especificidade, sensibilidade e correlação clínica da detecção de AChR e MuSK IgG através dos métodos CBA/CBA-TSA, ELISA e RIPA. 2) Determinar a função das subunidades de AChR na detecção do anticorpo AChR IgG por meio de CBA. 3. Analisar a vantagem do método CBA modificado (CBA-TSA) na detecção de AChR ou MuSK IgG em baixa abundância e baixa afinidade. 4) Gerar a evidência de primeiro grau nos métodos de teste de detecção de anticorpos MG AChR e MuSK.