Valor pronóstico de la microanatomía del cáncer de pulmón en 3D (LungCaMa3D)

Los pacientes con un diagnóstico presuntivo de cáncer de pulmón para quienes la resección quirúrgica o el muestreo estarán clínicamente indicados de acuerdo con las prácticas estándar del Departamento Cardiotorácico del Hospital Universitario AHEPA de Thessaloniki, se inscribirán en este estudio prospectivo una vez que den su consentimiento informado por escrito para la obtención de imágenes de la muestra. . Las resecciones quirúrgicas se realizarán según el estándar de atención y no habrá diferencia en el manejo clínico de los pacientes dependiendo de la adquisición o no de piezas quirúrgicas. Los pacientes con estado mental alterado y aquellos que no puedan o no quieran dar su consentimiento informado serán excluidos de este estudio.

Preparación de la muestra Después de la resección quirúrgica, el cirujano colocará las muestras de tejido pulmonar humano en un recipiente estéril en el quirófano. La elección del recipiente se basará en el tamaño de la muestra. Inmediatamente después del final de la operación, cada muestra se fijará en formalina tamponada neutra durante 48 horas en casetes de tejido y se incluirá en cera de parafina siguiendo un protocolo estandarizado.

Protocolo de imágenes Después de la recolección de las muestras de cáncer de pulmón resecadas quirúrgicamente fijadas en formalina e incluidas en parafina (FFPE), estas se transportarán al Centro de imágenes de rayos X μ-VIS en la Universidad de Southampton de acuerdo con un acuerdo de transferencia de material biológico particular. . Las muestras de pulmón FFPE se escanearán en el Centro de imágenes de rayos X μ-VIS utilizando un escáner micro-CT de Nikon Metrology hecho a medida de acuerdo con el protocolo estandarizado.

Evaluación histológica Después de imágenes micro-CT no destructivas, las muestras FFPE escaneadas se transportarán al Laboratorio de Patología del Primer Departamento de Patología de la Universidad Nacional y Kapodistriana de Atenas de acuerdo con un acuerdo particular de transferencia de material biológico. Los especímenes se colocarán en bloques de parafina para su corte. Después del corte, las secciones se desparafinizarán y se teñirán con la tinción de pentacromo de Movat. Un patólogo pulmonar (S.T.) experimentado y "cegado" obtendrá imágenes de las secciones y las evaluará histológicamente. El patólogo también evaluará una serie de muestras de cáncer de pulmón FFPE no escaneadas para confirmar la naturaleza no destructiva de las imágenes micro-CT para las muestras resecadas. La identificación de alteraciones isquémicas o inducidas por la radiación, la necrosis desviada o la degeneración celular podrían ser resultados indicativos de un método de imagen destructivo.

Análisis estadístico Los datos de imágenes generados se analizarán estadísticamente utilizando diagramas de Bland-Altman para determinar la variabilidad intra e interobservador en la interpretación de los datos de imágenes de micro-CT. Se utilizará la prueba de suma de rangos de Wilcoxon o la prueba de Kruskal Wallis para evaluar cualquier diferencia dentro de medidas morfométricas específicas (porcentaje de volumen del objeto, relación superficie/volumen del objeto, densidad de la superficie del objeto, índice del modelo de estructura, espesor de la estructura, densidad lineal de la estructura, separación de la estructura, conectividad, densidad de conectividad) entre diferentes patrones de crecimiento. Todos los análisis estadísticos se realizarán con SPSS (versión 27) y un valor de p inferior a 0,05 se considerará como umbral de significación estadística.