Prognostischer Wert der Lungenkrebs-Mikroanatomie in 3D (LungCaMa3D)

Patienten mit einer mutmaßlichen Diagnose von Lungenkrebs, für die eine chirurgische Resektion oder Probenentnahme gemäß den Standardpraktiken der Herz-Thorax-Abteilung des AHEPA-Universitätskrankenhauses von Thessaloniki klinisch indiziert ist, werden in diese prospektive Studie aufgenommen, sobald sie eine schriftliche Einverständniserklärung zur Probenbildgebung abgegeben haben . Chirurgische Resektionen werden nach Behandlungsstandard durchgeführt, und es gibt keinen Unterschied in der klinischen Behandlung der Patienten, je nachdem, ob chirurgische Proben entnommen werden oder nicht. Patienten mit verändertem Geisteszustand und solche, die nicht in der Lage oder nicht willens sind, eine Einverständniserklärung abzugeben, werden von dieser Studie ausgeschlossen.

Probenvorbereitung Nach der chirurgischen Resektion werden menschliche Lungengewebeproben vom Chirurgen im Operationssaal in einen sterilen Behälter gelegt. Die Wahl des Behälters basiert auf der Probengröße. Unmittelbar nach Abschluss der Operation wird jede Probe in Gewebekassetten für 48 Stunden in neutral gepuffertem Formalin fixiert und nach einem standardisierten Protokoll in Paraffinwachs eingebettet.

Bildgebungsprotokoll Nach der Entnahme der formalinfixierten und in Paraffin eingebetteten (FFPE) chirurgisch resezierten Lungenkrebsproben werden diese gemäß einer besonderen Vereinbarung zum Transfer von biologischem Material zum μ-VIS-Röntgenbildgebungszentrum der Universität Southampton transportiert . Die FFPE-Lungenproben werden im μ-VIS-Röntgenbildgebungszentrum mit einem speziell angefertigten Mikro-CT-Scanner von Nikon Metrology gemäß einem standardisierten Protokoll gescannt.

Histologische Beurteilung Nach der zerstörungsfreien Mikro-CT-Bildgebung werden die gescannten FFPE-Proben in Übereinstimmung mit einer besonderen Vereinbarung über den Transfer von biologischem Material zum Pathologielabor der Ersten Abteilung für Pathologie der National- und Kapodistrian-Universität Athen transportiert. Die Proben werden zum Schneiden in Paraffinblöcke gesetzt. Nach dem Schneiden werden die Schnitte entparaffiniert und mit der Pentachrom-Färbung von Movat gefärbt. Die Schnitte werden von einem erfahrenen und „verblindeten“ Lungenpathologen (S.T.) bildlich und histologisch beurteilt. Der Pathologe wird auch eine Reihe von nicht gescannten FFPE-Lungenkrebsproben untersuchen, um die zerstörungsfreie Natur der Mikro-CT-Bildgebung für die resezierten Proben zu bestätigen. Die Identifizierung von strahleninduzierten oder ischämischen Veränderungen, abweichender Nekrose oder Zelldegeneration könnte ein Hinweis auf eine destruktive Bildgebungsmethode sein.

Statistische Analyse Die generierten Bilddaten werden mithilfe von Bland-Altman-Plots statistisch analysiert, um die Intra- und Inter-Observer-Variabilität bei der Interpretation von Mikro-CT-Bilddaten zu bestimmen. Der Rangsummentest von Wilcoxon oder der Test von Kruskal Wallis werden verwendet, um alle Unterschiede innerhalb spezifischer morphometrischer Messungen zu bewerten (prozentuales Objektvolumen, Objektoberfläche/Volumenverhältnis, Objektoberflächendichte, Strukturmodellindex, Strukturdicke, lineare Strukturdichte, Strukturtrennung, Konnektivität, Konnektivitätsdichte) zwischen verschiedenen Wachstumsmustern. Alle statistischen Analysen werden mit SPSS (Version 27) durchgeführt und ein p-Wert von weniger als 0,05 wird als Schwellenwert für die statistische Signifikanz betrachtet.