El efecto de los galactooligosacáridos (GOS) en la microbiota intestinal de los individuos de intolerancia a la lactosa

El diseño experimental de este estudio fue un estudio de ensayo clínico totalmente aleatorizado de placebo controlado, que consistió en un período de detección de una semana seguido de un período de suplementación de 3 semanas y un período de 3 semanas de lavado. La aprobación de la Junta de Revisión Institucional (IRB) se obtuvo a través de la Junta de Revisión Institucional Regional de la Universidad Estatal de Oregon (número IRB IRB-2021-1044) y se obtuvo el consentimiento informado por escrito de todos los participantes.

Durante el período de suplementación, los participantes recibieron instrucciones de consumir dos veces al día (mañana y noche) prepacios de 5,2 g de GOS (grupo de tratamiento) o 1 g de lactosa (placebo), que los participantes recibieron instrucciones de disolver en 250 ml de agua y consumir antes o después de las comidas. El GOS (donado por Frieslandcampina, Amersfoort, Países Bajos, y vendido bajo el nombre comercial, Biotistm Gos-O Powder) contenía 73.7% GOS, 20.9% de lactosa y 5.3% de monosacáridos (galactosa y glucosa) y 1.0% cenizas. Para dar cuenta del impacto nutricional de la lactosa en el suplemento GOS en el huésped y la microbiota, 1 g de lactosa, donado por Glanbia Nutritions (Twin Falls, ID, EE. UU.), Se dio como control en este estudio.

12 adultos (2 hombres, 10 mujeres), edades de 19 a 55 años (media: 29 años; SD: 11 años) comenzó el ensayo clínico. Durante el estudio, los participantes continuaron con sus dietas regulares que registraron semanalmente en un cuestionario de frecuencia de alimentos. Las únicas restricciones dietéticas fueron: sin consumo de píldoras lácteas como Lactaid, sin suplementos pre/probióticos y antibióticos.

Las muestras fecales se recogieron semanalmente durante la duración del estudio. Los participantes usaron el kit Easy Sampler ® Stool Collection (Alpco®, New Hampshire, EE. UU.) Para recolectar muestras y las dejaron en el laboratorio inmediatamente después de la recolección.

El ADN se extrajo de 200 mg de muestras fecales a través de un Qiaamp Powerfeccal Pro (Qiagen, Hilden, Alemania).

La concentración de ADN extraído se midió a través de un fluorómetro Qitb 4 (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA) seguido de una construcción de biblioteca dirigida a la región V4 del gen 16S RRNA para la secuenciación del microbioma.

El análisis de composición del microbioma y el análisis estadístico se realizaron para identificar cambios en microbios específicos a lo largo del tiempo con suplementación con GOS prebiótica y suplementación con lactosa.

Se realizó un seguimiento de los microorganismos de biomarcadores relacionados con la fermentación de lactosa para cualquier aumento o disminución significativa en la abundancia relativa, así como cualquier otro microbio que no se haya informado previamente.

Durante la duración del estudio, los participantes registraron síntomas gastrointestinales cada dos días en un cuestionario en línea no validado que fue diseñado específicamente para este estudio para capturar la incidencia y la gravedad de los síntomas de Li (dolor abdominal, hinchazón, abierro, estreñimiento, diarrea, discusión durante la defecación, flatir, quemaduras cardíacas, incompletos defecación, náusea, urofecación).

Para evaluar el impacto de la dieta en la diversidad microbiana y los síntomas gastrointestinales, correlacionamos la ingesta semanal del grupo de alimentos con la medida semanal de la diversidad microbiana y los síntomas gastrointestinales en general, dentro de los GOS y el control utilizando la correlación de Spearman en SAS.