Účinek galaktooligosacharidů (GOS) na střevní mikrobiotu jednotlivců s intolerancí laktózy

Experimentální návrh této studie byl zcela randomizovanou placebem kontrolovanou klinickou studií, která sestávala z doby týdenního screeningu, po které následovala třídenní doba suplementace a období 3 týdnů. Schválení institucionální revizní rady (IRB) bylo získáno prostřednictvím regionální rady pro institucionální přezkum v Oregonské státní univerzitě (číslo IRB IRB-2021-1044) a od všech účastníků byl získán písemný informovaný souhlas.

Během období suplementace byli účastníci instruováni, aby konzumovali dvakrát denně (ráno a večer) buď předem 5,2 g GOS (léčebná skupina) nebo 1 g laktózy (placeba), kterou byli účastníci instruováni, aby se rozpustili v 250 ml vody a konzumovali buď před jídlem. Gos (darovaný Frieslandcampina, Amersfoort, Nizozemsko a prodávaný pod obchodní názvem, Biotistm Gos-O prášek) obsahoval 73,7% GOS, 20,9% laktózy a 5,3% monosacharidy (galaktóza a glukóza) a 1,0% popel. Pro zohlednění nutričního dopadu laktózy v doplňku GOS na hostitel a mikrobiota, 1 g laktózy, darovaná Glanbia Nutritionals (Twin Falls, ID, USA), byla v této studii uvedena jako kontrola.

12 dospělých (2 muži, 10 žen), věk 19-55 let (průměr: 29 let; SD: 11 let) zahájilo klinickou hodnocení. Během studie účastníci pokračovali ve své pravidelné stravě, že zaznamenávali každý týden do dotazníku s frekvencí potravin. Jediná dietní omezení byla: žádná konzumace mléčných pilulek, jako je Lactaid, žádné před/probiotické doplňky a antibiotika.

Fekální vzorky byly odebrány každý týden po celou dobu studie. Účastníci použili ke sběru vzorků soupravu Easy Sampler® Stool Collection Kit (AlpCo®, New Hampshire, USA) a okamžitě po sběru je odhodili v laboratoři.

DNA byla extrahována z 200 mg fekálních vzorků prostřednictvím QIAAMP PowerFeccal Pro (Qiagen, Hilden, Německo).

Koncentrace extrahované DNA byla měřena fluorometrem Qubit 4 (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA) následovanou konstrukcí knihovny zaměřené na oblast V4 genu 16S rRNA pro sekvenování mikrobiomu.

Byla provedena analýza kompozice mikrobiomu a statistická analýza za účelem identifikace posunů ve specifických mikrobech v průběhu času s doplňováním prebiotického GOS a doplňování laktózy.

Vybrané mikroorganismy biomarkerů související s laktózou byly sledovány pro jakékoli významné zvýšení nebo snížení relativní hojnosti a jakékoli jiné mikroby, které nebyly dříve hlášeny.

Po dobu trvání studie účastníci zaznamenali gastrointestinální příznaky každý druhý den v neověřeném online dotazníku, který byl speciálně navržen pro tuto studii, aby zachytil incidence a závažnost symptomů LI (bolest břicha, nadýmání, zácpu, zácpu, zácpu, túra).

Abychom vyhodnotili dopad stravy na mikrobiální rozmanitost a gastrointestinální příznaky, korelovali jsme týdenní příjem skupiny potravin s týdenním mírou mikrobiální rozmanitosti a gastrointestinálních symptomů celkově v rámci GOS a pod kontrolou pomocí Spearmanovy korelace v SAS.