O efeito dos galactooligossacarídeos (GOS) na microbiota intestinal de indivíduos com intolerância à lactose

O desenho experimental deste estudo foi um estudo de ensaios clínicos completamente clínico, que consistiu em um período de triagem de uma semana, seguido de um período de suplementação de três semanas e um período de lava-lada por 3 semanas. A aprovação do Conselho de Revisão Institucional (IRB) foi obtida pelo Conselho de Revisão Institucional Regional da Universidade Estadual de Oregon (número do IRB IRB-2021-1044) e o consentimento informado por escrito foi obtido de todos os participantes.

Durante o período de suplementação, os participantes foram instruídos a consumir duas vezes ao dia (de manhã e à noite) precedentes de 5,2 g de GOS (grupo de tratamento) ou 1 g de lactose (placebo), que os participantes foram instruídos a se dissolver em 250 ml de água e consumir antes ou depois das refeições. Os Gos (doados por Frieslandcampina, Amersfoort, Holanda, e vendidos sob o nome comercial, o biotista Gos-O em pó) continham 73,7% de GOS, 20,9% de lactose e 5,3% de monossacarídeos (galactose e glicose) e 1,0% de cinzas. Para explicar o impacto nutricional da lactose no suplemento GOS no hospedeiro e na microbiota, 1 g de lactose, doado pela Glanbia Nutricionais (Twin Falls, ID, EUA), foi dado como controle neste estudo.

12 adultos (2 homens, 10 mulheres), de 19 a 55 anos (média: 29 anos; DP: 11 anos) iniciaram o ensaio clínico. Durante o estudo, os participantes continuaram com suas dietas regulares que gravaram semanalmente em um questionário de frequência alimentar. As únicas restrições alimentares foram: nenhum consumo de pílulas de laticínios, como Lactaid, sem suplementos pré/probióticos e antibióticos.

As amostras fecais foram coletadas semanalmente durante a duração do estudo. Os participantes usaram o kit Easy Sampler ® Stool Collection (Alpco®, New Hampshire, EUA) para coletar amostras e as deixaram no laboratório imediatamente após a coleta.

O DNA foi extraído de 200 mg de amostras fecais por meio de um PowerFecal Pro Qiaamp Powerfeccal (Qiagen, Hilden, Alemanha).

A concentração de DNA extraída foi medida por meio de um fluorômetro Qubit 4 (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA), seguido de uma construção da biblioteca direcionada à região V4 do gene 16S rRNA para sequenciamento de microbioma.

A análise composicional do microbioma e a análise estatística foram realizadas para identificar mudanças em micróbios específicos ao longo do tempo com suplementação de Gos prebióticos e suplementação de lactose.

Os microorganismos de biomarcadores relacionados à lactose-fermentação selecionados foram acompanhados para aumentos ou diminuições significativas na abundância relativa, bem como em quaisquer outros micróbios que não foram relatados anteriormente.

For the duration of the study, participants recorded gastrointestinal symptoms every other day in an unvalidated, online questionnaire which was specifically designed for this study to capture the incidence and severity of LI symptoms (abdominal pain, bloating, burping, constipation, diarrhea, discomfort during defecation, flatulence, heart burn, incomplete defecation, nausea, urgency to defecate).

Para avaliar o impacto da dieta na diversidade microbiana e nos sintomas gastrointestinais, correlacionamos a ingestão semanal de grupos de alimentos com a medida semanal da diversidade microbiana e os sintomas gastrointestinais em geral, dentro do GOS e dentro do controle usando a correlação de Spearman no SAS.