Wpływ galakoligosacharydów (GOS) na mikroflorę jelitową osób nietolerancji laktozy

Eksperymentalnym projektem tego badania było całkowicie randomizowane badanie kliniczne kontrolowane placebo, które składało się z tygodniowego okresu badań przesiewowych, a następnie 3-tygodniowego okresu suplementacji i okresu 3 tygodniowego. Zatwierdzenie instytucjonalnej Rady Review (IRB) uzyskano za pośrednictwem regionalnej Rady Recenzji Instytucjonalnej Uniwersytetu Stanowego (numer IRB IRB-2011-1044) i od wszystkich uczestników uzyskano pisemną świadomą zgodę.

W okresie suplementacji uczestnicy poinstruowano, aby konsumowali dwa razy dziennie (rano i wieczorem) albo wstępnie podbrywane 5,2 g GOS (grupa oczyszczania) lub 1 g laktozy (placebo), które uczestnicy poinstruowano rozpuszczenia w 250 ml wody i konsumowali przed lub po posiłku. GOS (podarowany przez Frieslandcampina, Amersfoort, Holandia i sprzedawany pod nazwą handlową proszek GOS-O) zawierał 73,7% GO, 20,9% laktozy i 5,3% monosacharydów (galaktozę i glukozę) i 1,0% popiołu. Aby uwzględnić odżywczy wpływ laktozy na suplement GOS na gospodarz i mikroflorę, laktozę 1 g, przekazaną przez Glanbia Nutritionals (Twin Falls, ID, USA), podano jako kontrolę w tym badaniu.

12 dorosłych (2 mężczyzn, 10 kobiet), w wieku 19-55 lat (średnia: 29 lat; SD: 11 lat) rozpoczęło badanie kliniczne. Podczas badania uczestnicy kontynuowali regularne diety, które rejestrowali co tydzień w kwestionariuszu częstotliwości żywności. Jedynymi ograniczeniami dietetycznymi były: brak spożywania pigułek mlecznych, takich jak Lactaid, brak suplementów przed/probiotycznych i antybiotyki.

Próbki kału pobierano co tydzień przez czas trwania badania. Uczestnicy używali zestawu do kolekcji Sampler ® Stool (Alpco®, New Hampshire, USA) do pobierania próbek i wysadzili je w laboratorium natychmiast po pobraniu.

DNA ekstrahowano z 200 mg próbek kału za pośrednictwem Qiaamp PowerFeccal Pro (Qiagen, Hilden, Niemcy).

Stężenie ekstrahowanego DNA zmierzono za pomocą fluorometru Qubit 4 (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA), a następnie konstrukcja biblioteki ukierunkowana na region V4 genu 16S rRNA do sekwencjonowania mikrobiomu.

Przeprowadzono analizę składu mikrobiomu i analizę statystyczną w celu zidentyfikowania przesunięć określonych drobnoustrojów w czasie z prebiotyczną suplementacją GOS i suplementacją laktozy.

Wybrane mikroorganizmy biomarkerowe związane z laktozą były śledzone dla dowolnego znaczącego wzrostu lub spadku względnej liczebności, a także wszelkich innych drobnoustrojów, które nie zostały wcześniej zgłoszone.

Przez czas badania uczestnicy rejestrowali objawy żołądkowo -jelitowe co drugi dzień w niekwalifikowanym, internetowym kwestionariuszu, który został specjalnie zaprojektowany do tego badania w celu przechwytywania występowania i nasilenia objawów LI (ból brzucha, wzruszanie, zakopanie, zaparcia, biegunka, dyskomfort podczas wypróżnień, wzłokania, poślizgania się, niekompletu, niekompletu, mdłości, urgomacji, urgancji.

Aby ocenić wpływ diety na różnorodność drobnoustrojów i objawy przewodu pokarmowego, skorelowaliśmy cotygodniowe spożycie grupy żywności z cotygodniową miarą różnorodności drobnoustrojów i objawami przewodu pokarmowego ogółem, w GOS i kontroli za pomocą korelacji Spearman w SAS.