L'effetto dei galattooligosaccaridi (GOS) sul microbiota intestinale dell'intolleranza al lattosio

Il design sperimentale di questo studio è stato uno studio di studio clinico controllato da placebo completamente randomizzato, che consisteva in un periodo di screening di una settimana seguito da un periodo di integrazione di 3 settimane e un periodo di 3 settimane. L'approvazione del Comitato di revisione istituzionale (IRB) è stata ottenuta tramite tutti i partecipanti sono stati ottenuti da tutti i partecipanti sono stati ottenuti il ​​consenso istituzionale regionale dell'Oregon State University (numero IRB IRB-2021-1044) e il consenso informato scritto.

Durante il periodo di integrazione, ai partecipanti è stato chiesto di consumare due volte al giorno (mattina e sera) o pre -prebagata 5,2 g di GOS (gruppo di trattamento) o 1 g di lattosio (placebo), che i partecipanti sono stati istruiti a dissolversi in 250 ml di acqua e consumare prima o dopo i pasti. Il GOS (donato da Frieslandcampina, Amersfoort, Paesi Bassi e venduto con il nome commerciale, la biotistm Gos-O in polvere) conteneva il 73,7% di GOS, il 20,9% di lattosio e il 5,3% di monosaccaridi (galattosio e glucosio) e 1,0% di ceneri. Per tenere conto dell'impatto nutrizionale del lattosio nel supplemento GOS sull'ospite e il microbiota, 1 g di lattosio, donato da Glanbia Nutritionals (Twin Falls, ID, USA), è stato dato come controllo in questo studio.

12 adulti (2 maschi, 10 femmine), di età compresa tra 19 e 55 anni (media: 29 anni; SD: 11 anni) hanno iniziato lo studio clinico. Durante lo studio, i partecipanti hanno continuato con le loro diete regolari che hanno registrato settimanalmente in un questionario sulla frequenza alimentare. Le uniche restrizioni dietetiche erano: nessun consumo di pillole da latte come lattaid, nessun integrazione pre/probiotica e antibiotici.

I campioni fecali sono stati raccolti settimanalmente per la durata dello studio. I partecipanti hanno utilizzato il kit di raccolta sgabelli Easy Sampler ® (ALPCO®, New Hampshire, USA) per raccogliere campioni e li hanno lasciati in laboratorio immediatamente dopo la raccolta.

Il DNA è stato estratto da 200 mg di campioni fecali tramite un Qiaamp PowerfeCcal Pro (Qiagen, Hilden, Germania).

La concentrazione di DNA estratto è stata misurata tramite un fluorometro Qubit 4 (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA) seguita da una costruzione di biblioteche che mira alla regione V4 del gene rRNA 16S per il sequenziamento del microbioma.

L'analisi compositiva del microbioma e l'analisi statistica sono state eseguite per identificare i cambiamenti in microbi specifici nel tempo con l'integrazione prebiotica GOS e l'integrazione di lattosio.

I microrganismi di biomarcatore selezionati per la fermentazione del lattosio sono stati tenuti traccia di eventuali aumenti significativi o diminuzioni dell'abbondanza relativa e di qualsiasi altro microbi che non è stato precedentemente riportato.

Per la durata dello studio, i partecipanti hanno registrato sintomi gastrointestinali a giorni alterni in un questionario online non convalidato che è stato specificamente progettato per questo studio per catturare l'incidenza e la gravità dei sintomi di Li (dolore addominale, gonfiore, gonfiore, costipazione, diarrea, diarrea, disagio durante la defecazione, flatulenza, bruciore del cuore, defection incompleta, nausea, escoca).

Per valutare l'impatto della dieta sulla diversità microbica e sui sintomi gastrointestinali, abbiamo correlato l'assunzione di gruppi alimentari settimanali con la misura settimanale della diversità microbica e i sintomi gastrointestinali in generale, all'interno di GOS e all'interno del controllo usando la correlazione di Spearman in SAS.