Identificación de Biomarcadores Proteómicos en DMAE, Retinopatía Diabética y Desprendimiento de Retina (PRO Project)

Este es un estudio traslacional intervencionista prospectivo de un solo centro, diseñado para identificar y validar biomarcadores proteómicos en pacientes afectados por degeneración macular asociada a la edad (DMAE), retinopatía diabética (RD) y desprendimiento de retina (DR), en comparación con sujetos control sin enfermedad retiniana.

Población del estudio

Se incluirán aproximadamente 260 sujetos, entre ellos:

180 pacientes (100 DMAE, 50 RD, 30 DR) 80 controles (pacientes de cirugía de cataratas o cirugía macular sin enfermedad retiniana) Los participantes serán reclutados entre los pacientes tratados habitualmente en el IRCCS Fondazione G.B. Bietti.

Diseño y procedimientos del estudio

Todos los participantes realizarán una visita basal que incluirá:

Historial médico y oftalmológico Examen ocular completo (agudeza visual, tonometría, biomicroscopía, oftalmoscopía) Imágenes no invasivas (p. ej., OCT, OCTA) Recogida de muestras de lágrimas y sangre periférica

Los pacientes sometidos a procedimientos terapéuticos también participarán en una segunda visita (en un plazo de 1 a 30 días), durante la cual se recogerán muestras biológicas adicionales durante la atención clínica rutinaria, incluyendo:

Humor acuoso (mediante paracentesis) Humor vítreo Líquido subretiniano (en cirugía de DR) Reflujo vítreo post-inyección (si procede) Todos los procedimientos de muestreo se realizan como parte de la práctica clínica o quirúrgica estándar y no suponen un riesgo adicional para el paciente.

Análisis proteómico Las matrices biológicas recogidas (fluidos oculares y componentes derivados de la sangre, como células mononucleares de sangre periférica y vesículas extracelulares) se analizarán mediante técnicas avanzadas de proteómica clínica. Estas incluyen espectrometría de masas de alta resolución (plataformas basadas en Orbitrap) combinadas con enfoques cuantitativos multiplex (p. ej., Tandem Mass Tags).

El estudio seguirá un enfoque de dos fases:

Fase de descubrimiento de biomarcadores, destinada a identificar candidatos a biomarcadores proteicos Fase de validación, destinada a confirmar su relevancia diagnóstica y biológica Se podrán realizar análisis dirigidos adicionales (p. ej., ELISA) y estudios funcionales (p. ej., modelos celulares in vitro) para caracterizar mejor las vías moleculares identificadas.

Objetivos El objetivo principal es la identificación y validación de biomarcadores proteicos asociados a DMAE, RD y DR.

Los objetivos secundarios incluyen:

Caracterización de los mecanismos moleculares subyacentes a la patogénesis de la enfermedad Identificación de posibles dianas terapéuticas Investigación de modificaciones postraduccionales de proteínas (p. ej., fosfoproteómica, firmas relacionadas con la ubiquitina) Evaluación de variables quirúrgicas (p. ej., fragmentación vítrea) en la identificación de biomarcadores

Análisis estadístico Los datos se analizarán mediante métodos estadísticos paramétricos y no paramétricos apropiados. Se explorarán las asociaciones entre variables clínicas y moleculares, definiendo la significación estadística como p < 0,05.

Consideraciones éticas y de gestión de datos El estudio se realizará de acuerdo con la Declaración de Helsinki y las directrices de Buena Práctica Clínica. Todos los participantes proporcionarán su consentimiento informado por escrito antes de la inclusión. Los datos se pseudonimizarán y se manejarán cumpliendo la normativa aplicable de protección de datos (RGPD).