Identificação de Biomarcadores Proteómicos na DMAE, Retinopatia Diabética e Descolamento da Retina (PRO Project)

Este é um estudo translacional intervencionista prospetivo, monocêntrico, concebido para identificar e validar biomarcadores proteómicos em pacientes afetados por degeneração macular relacionada com a idade (DMRI), retinopatia diabética (RD) e descolamento da retina (DR), em comparação com indivíduos de controlo sem doença retiniana.

População do Estudo

Serão recrutados aproximadamente 260 participantes, incluindo:

180 pacientes (100 DMRI, 50 RD, 30 DR) 80 controlos (pacientes submetidos a cirurgia de catarata ou cirurgia macular sem doença retiniana) Os participantes serão recrutados entre os pacientes tratados rotineiramente no IRCCS Fondazione G.B. Bietti.

Desenho do Estudo e Procedimentos

Todos os participantes realizarão uma visita inicial que inclui:

Historial médico e oftalmológico Exame oftalmológico completo (acuidade visual, tonometria, biomicroscopia, oftalmoscopia) Imagiologia não invasiva (ex., OCT, OCTA) Colheita de amostras de lágrimas e sangue periférico

Os pacientes submetidos a procedimentos terapêuticos participarão também numa segunda visita (dentro de 1 a 30 dias), durante a qual serão recolhidas amostras biológicas adicionais no âmbito dos cuidados clínicos de rotina, incluindo:

Humor aquoso (via paracentese) Humor vítreo Líquido sub-retiniano (em cirurgia de DR) Refluxo vítreo pós-injeção (se aplicável) Todos os procedimentos de colheita são realizados como parte da prática clínica ou cirúrgica padrão e não introduzem riscos adicionais para o paciente.

Análise Proteómica As matrizes biológicas recolhidas (fluidos oculares e componentes derivados do sangue, como PBMCs e vesículas extracelulares) serão analisadas utilizando técnicas avançadas de proteómica clínica. Estas incluem espectrometria de massa de alta resolução (plataformas baseadas em Orbitrap) combinadas com abordagens quantitativas multiplex (ex., Tandem Mass Tags).

O estudo seguirá uma abordagem em duas fases:

Fase de descoberta de biomarcadores, destinada a identificar candidatos a biomarcadores proteicos Fase de validação, destinada a confirmar a sua relevância diagnóstica e biológica Podem ser realizadas análises direcionadas adicionais (ex., ELISA) e estudos funcionais (ex., modelos celulares in vitro) para caracterizar melhor as vias moleculares identificadas.

Objetivos O objetivo principal é a identificação e validação de biomarcadores proteicos associados à DMRI, RD e DR.

Os objetivos secundários incluem:

Caracterização dos mecanismos moleculares subjacentes à patogénese da doença Identificação de potenciais alvos terapêuticos Investigação de modificações pós-traducionais de proteínas (ex., fosfoproteómica, assinaturas relacionadas com ubiquitina) Avaliação de variáveis cirúrgicas (ex., fragmentação vítrea) na identificação de biomarcadores

Análise Estatística Os dados serão analisados utilizando métodos estatísticos paramétricos e não paramétricos apropriados. Serão exploradas associações entre variáveis clínicas e moleculares, com significância estatística definida como p < 0,05.

Considerações Éticas e de Gestão de Dados O estudo será conduzido de acordo com a Declaração de Helsínquia e as diretrizes de Boas Práticas Clínicas. Todos os participantes fornecerão consentimento informado por escrito antes da inclusão. Os dados serão pseudonimizados e tratados em conformidade com os regulamentos de proteção de dados aplicáveis (GDPR)