Идентификация протеомных биомаркеров при ВМД, диабетической ретинопатии и отслоении сетчатки (PRO Project)

Это одноцентровое, проспективное интервенционное трансляционное исследование, предназначенное для идентификации и валидации протеомных биомаркеров у пациентов с возрастной макулярной дегенерацией (ВМД), диабетической ретинопатией (ДР) и отслойкой сетчатки (ОС), по сравнению с контрольными субъектами без заболеваний сетчатки.

Популяция исследования

Будет включено приблизительно 260 субъектов, в том числе:

180 пациентов (100 с ВМД, 50 с ДР, 30 с ОС) 80 контрольных субъектов (пациенты, перенесшие операцию по удалению катаракты или макулярную операцию, без заболеваний сетчатки) Участники будут набираться среди пациентов, регулярно проходящих лечение в IRCCS Fondazione G.B. Bietti.

Дизайн и процедуры исследования

Все участники пройдут базовый визит, включающий:

Сбор медицинского и офтальмологического анамнеза Комплексное обследование глаз (острота зрения, тонометрия, биомикроскопия, офтальмоскопия) Неинвазивную визуализацию (например, ОКТ, ОКТ-ангиография) Сбор образцов слезной жидкости и периферической крови

Пациенты, проходящие терапевтические процедуры, также примут участие во втором визите (в течение 1–30 дней), во время которого дополнительные биологические образцы будут собраны в ходе рутинного клинического ухода, включая:

Водянистую влагу (посредством парацентеза) Стекловидное тело Субретинальную жидкость (при операции по поводу ОС) Витрреальный рефлюкс после инъекции (если применимо) Все процедуры забора образцов выполняются в рамках стандартной клинической или хирургической практики и не представляют дополнительного риска для пациента.

Протеомный анализ Собранные биологические матрицы (глазные жидкости и компоненты, полученные из крови, такие как PBMC и внеклеточные везикулы) будут проанализированы с использованием передовых методов клинической протеомики. К ним относятся масс-спектрометрия высокого разрешения (на платформах Orbitrap) в сочетании с мультиплексными количественными подходами (например, Tandem Mass Tags).

Исследование будет следовать двухфазному подходу:

Фаза обнаружения биомаркеров, направленная на идентификацию кандидатных белковых биомаркеров Фаза валидации, направленная на подтверждение их диагностической и биологической значимости Могут быть проведены дополнительные целевые анализы (например, ELISA) и функциональные исследования (например, in vitro клеточные модели) для дальнейшей характеристики выявленных молекулярных путей.

Цели Основная цель – идентификация и валидация белковых биомаркеров, ассоциированных с ВМД, ДР и ОС.

Вторичные цели включают:

Характеризацию молекулярных механизмов, лежащих в основе патогенеза заболеваний Идентификацию потенциальных терапевтических мишеней Исследование посттрансляционных модификаций белков (например, фосфопротеомика, убиквитин-ассоциированные сигнатуры) Оценку хирургических переменных (например, фрагментация стекловидного тела) в идентификации биомаркеров

Статистический анализ Данные будут проанализированы с использованием соответствующих параметрических и непараметрических статистических методов. Будут исследованы ассоциации между клиническими и молекулярными переменными, при этом статистическая значимость будет определена как p < 0.05.

Этические соображения и управление данными Исследование будет проводиться в соответствии с Хельсинкской декларацией и руководящими принципами Надлежащей клинической практики. Все участники предоставят письменное информированное согласие до включения в исследование. Данные будут псевдонимизированы и обрабатываться в соответствии с применимыми нормами защиты данных (GDPR)