Immuunivaste Mycobacterium Tuberculosis -infektiolle

Tässä tutkimuksessa tutkitaan, kuinka immuunijärjestelmä reagoi Mycobacterium tuberculosis -bakteerien (tuberkuloosia aiheuttavien bakteerien) aiheuttamaan infektioon, jotta voidaan ymmärtää paremmin, kuinka bakteeri tuottaa infektion ja kuinka immuunivaste voi toimia infektion hallitsemiseksi.

Vain noin yksi kymmenestä M. tuberculosis -tartunnan saaneesta sairastuu, joskus vuosia tai jopa vuosikymmeniä altistuksen jälkeen. Ei tiedetä, miksi jotkut ihmiset sairastuvat ja useimmat eivät, mutta ihmisten immuunijärjestelmä, joille ei koskaan kehity sairautta, saattaa pystyä paremmin hallitsemaan bakteereja. Tässä tutkimuksessa arvioidaan M. tuberculosis -infektion piilevää muotoa edistääkseen ymmärrystä immuunimekanismien - erityisesti tiettyjen valkosolujen - roolista sairausprosessissa.

Terveet 18-vuotiaat ja sitä vanhemmat vapaaehtoiset voivat olla kelvollisia tähän tutkimukseen. Hakijoiden seulonnassa otetaan huomioon sairaushistoria, suvussa esiintyneet sairaudet, sukupuolihistoria, huumeiden käyttöhistoria, lääkärintarkastus ja verikokeet, mukaan lukien HIV-testi. Ihmiset Malissa, Länsi-Afrikassa ja paikallisilla terveysklinikoilla Yhdysvalloissa voivat osallistua.

Tutkimuksen alussa osallistujille tehdään verikokeet ja tuberkuliiniihotesti (PPD-testi), joka osoittaa, onko henkilö altistunut tuberkuloosibakteereille. PPD:tä varten pieni määrä kuollutta tuberkuloosiantigeeniä sisältävää nestettä laitetaan neulalla kyynärvarren ihon alle. Antigeeni ei voi aiheuttaa infektiota tai sairautta.

Kolmen päivän kuluttua osallistujille tehdään uusi verikoe ja tuberkuliinitestin kohdasta tutkitaan turvotusta, joka viittaa positiiviseen tulokseen. Osallistujille, joilla on positiivinen PPD, tehdään rintakehän röntgenkuva tuberkuloositaudin tarkistamiseksi. Ne, joiden röntgenkuva on myös positiivinen, poistetaan tutkimuksesta ja lähetetään lääkärilleen arvioitavaksi ja hoitoon. Ne, joiden röntgenkuva on negatiivinen, palaavat klinikalle 3 viikon kuluessa tuberkuliinitestistä antamaan toisen verinäyte.

Osallistujat, joiden PPD on negatiivinen, saavat toisen tuberkuliinitestin 10–21 päivää myöhemmin ja palaavat 3 päivää testin jälkeen määrittääkseen, onko se edelleen negatiivinen vai positiivinen. (Jotkut ihmiset, jotka ovat negatiivisia ensimmäisen testin jälkeen, voivat olla positiivisia toisen toimenpiteen jälkeen.) Ne, joiden testi on edelleen negatiivinen, lopettavat osallistumisensa tutkimukseen tuolloin. Osallistujat, joiden toinen PPD on positiivinen, saavat rintakehän röntgenkuvauksen yllä kuvatulla tavalla, ja ne, joiden rintakehän röntgenkuva on negatiivinen, palaavat 3 viikon kuluttua luovuttamaan viimeisen verinäyte.

Tämän tutkimuksen tarkoituksena on arvioida tämän infektion piilevää muotoa, jonka esiintyvyys maailmanlaajuisesti ylittää aktiivisen taudin. Hypoteesimme on, että latentissa tuberkuloosissa antigeenispesifinen efektorimuisti CD4+ T-solut ovat vastuussa kliinisesti mitattavissa olevan viivästyneen tyypin yliherkkyyden synnystä ja että keskusmuistin CD4+T-solut eivät ole suoraan mukana tässä prosessissa. Perustamme tämän ajatuksen olettamukseen, että piilevä tuberkuloosi on antigeenin pysyvyyden tila ja että efektorimuisti-T-solut tulisi säilyttää niin kauan kuin antigeeni/infektio on läsnä.

Ehdotamme tämän tutkimuksen suorittamista Malissa, Länsi-Afrikassa ja paikallisilla klinikoilla Yhdysvalloissa. Tuberkuloosi vaikuttaa 593/100 000(2) yksilöön Malissa ja useimmat ovat altistuneet taudille. Lisäksi olisi tärkeää arvioida samat parametrit paikallisesti, koska piilevä infektio on yksi tärkeimmistä tuberkuloosin uudelleenaktivaatiotekijöistä tässä maassa. Potilaat rekisteröidään neljään pääryhmään: HIV-/TST- (ryhmä A), HIV-/TST+ (ryhmä B), HIV+/TST+ (ryhmä C) ja HIV+/TST- (ryhmä D).

Tämän hypoteesin arvioimiseksi aiomme rekisteröidä 100–300 potilasta kahden vuoden aikana molemmista maista. Verinäytteet ennen puhdistetun proteiinijohdannaisen (PPD) levittämistä ja ennalta määrätyinä ajankohtina sen jälkeen otetaan sen CD4+ T-solujen fraktion määrittämiseksi, jotka tuottavat gamma-interferonia vasteena stimulaatiolle PPD:llä 16 tunnin antigeenistimulaatiomäärityksellä. Asianmukainen värjäys tehdään fenotyypin sekä sytokiinituotannon (interferoni gamma, (IFN gamma), interleukiini 2 (IL2) ja tuumorinekroositekijä (TNF) varmistamiseksi. Lisäksi lymfosyyttien lisääntymistä tutkitaan käyttämällä 5-(ja-6)-karboksifluoreseiinidiasetaattisukkinimidyyliesteriä (CFSE).

Suorittaessamme tätä tutkimusta toivomme lisäävän ymmärrystä asiaan liittyvistä immuunimekanismeista, erityisesti T-solumuistin mekanismeista, mikä antaisi näkemyksiä tuberkuloosin ja HIV:n patogeneesistä. Uskomme myös, että näiden mekanismien ymmärtäminen voisi johtaa immuniteetin korvikkeiden luomiseen tuberkuloosirokotetutkimuksissa, mikä voisi parantaa rokotekokeiden suunnittelua. Se saattaa myös auttaa ymmärtämään paremmin HIV-tartunnan saaneiden henkilöiden tuberkuloosin yhteisinfektion immunologista dynamiikkaa.