Immuunrespons op Mycobacterium Tuberculosis-infectie

In deze studie wordt onderzocht hoe het immuunsysteem reageert op infectie met Mycobacterium tuberculosis-bacteriën (bacteriën die tuberculose veroorzaken) om beter te begrijpen hoe de kiem infectie veroorzaakt en hoe de immuunrespons zou kunnen werken om de infectie onder controle te krijgen.

Slechts ongeveer één op de tien mensen die besmet zijn met M. tuberculosis wordt ziek, soms jaren of zelfs decennia na blootstelling. Het is niet bekend waarom sommige mensen ziek worden en de meeste niet, maar het immuunsysteem van mensen die nooit ziek worden, is misschien beter in staat om de bacteriën onder controle te houden. Deze studie zal de latente vorm van M. tuberculosis-infectie evalueren om meer inzicht te krijgen in de immuunmechanismen - met name de rol van bepaalde witte bloedcellen - die betrokken zijn bij het ziekteproces.

Gezonde vrijwilligers van 18 jaar en ouder kunnen in aanmerking komen voor deze studie. Kandidaten worden gescreend met een medische geschiedenis, familiegeschiedenis van medische aandoeningen, seksuele geschiedenis, geschiedenis van drugsgebruik, lichamelijk onderzoek en bloedonderzoek, waaronder een test voor HIV. Mensen in Mali, West-Afrika en in lokale gezondheidsklinieken in de Verenigde Staten kunnen deelnemen.

Aan het begin van het onderzoek ondergaan deelnemers bloedonderzoek en een tuberculinehuidtest (PPD-test), die aangeeft of een persoon is blootgesteld aan tuberculosebacteriën. Voor de PPD wordt een kleine hoeveelheid vloeistof met dood tuberculose-antigeen met een naald onder de huid van de onderarm gebracht. Het antigeen kan geen infectie of ziekte veroorzaken.

Na 3 dagen krijgen de deelnemers opnieuw een bloedtest en wordt de plaats van de tuberculinetest onderzocht op zwelling die op een positief resultaat zou wijzen. Bij deelnemers met een positieve PPD wordt een thoraxfoto gemaakt om te controleren op tuberculose. Degenen van wie de röntgenfoto ook positief is, worden teruggetrokken uit het onderzoek en doorverwezen naar hun arts voor evaluatie en behandeling. Degenen van wie de röntgenfoto negatief is, komen binnen 3 weken na de tuberculinetest terug naar de kliniek om nog een bloedmonster te geven.

Deelnemers van wie de PPD negatief is, ondergaan 10 tot 21 dagen later een tweede tuberculinetest en komen 3 dagen na de test terug om te bepalen of deze nog steeds negatief of positief is. (Sommige mensen die na de eerste test negatief zijn, kunnen na de tweede procedure positief testen.) Degenen bij wie de test nog steeds negatief is, beëindigen op dat moment hun deelname aan het onderzoek. Deelnemers van wie de tweede PPD positief is, hebben een thoraxfoto zoals hierboven beschreven, en degenen met een negatieve thoraxfoto komen binnen 3 weken terug om nog een laatste bloedmonster te doneren.

Het doel van de huidige studie is om de latente vorm van deze infectie te evalueren, waarvan de prevalentie wereldwijd groter is dan die van actieve ziekte. Onze hypothese is dat bij latente tuberculose antigeen-specifieke effector geheugen CD4+ T-cellen verantwoordelijk zijn voor het genereren van klinisch meetbare vertraagde type overgevoeligheid en dat centrale geheugen CD4+ T-cellen niet direct betrokken zijn bij dit proces. We baseren dit idee op de veronderstelling dat latente tuberculose een toestand van antigeenpersistentie is en dat effectorgeheugen-T-cellen behouden moeten blijven zolang antigeen/infectie aanwezig is.

We stellen voor om deze studie uit te voeren in Mali, West-Afrika en lokale klinieken in de VS. Tuberculose treft 593/100.000(2) individuen in Mali en de meesten zijn blootgesteld aan de ziekte. Bovendien zou het belangrijk zijn om dezelfde parameters lokaal te evalueren, aangezien latente infectie een van de belangrijkste factoren is voor reactiveringstuberculose in dit land. Patiënten zouden worden ingeschreven in 4 hoofdgroepen: HIV-/TST- (Groep A), HIV-/TST+ (Groep B), HIV+/TST+ (Groep C) en HIV+/TST- (Groep D).

Om deze hypothese te evalueren, zijn we van plan om in de loop van 2 jaar tussen de 100 en 300 patiënten uit beide landen in te schrijven. Bloedmonsters voor en op vooraf bepaalde tijdstippen na de toepassing van Purified Protein Derivative (PPD) zullen worden verkregen om de fractie CD4+ T-cellen te bepalen die interferon-gamma produceert als reactie op stimulatie met PPD met een 16 uur durende antigeenstimulatietest. Passende kleuring zal worden uitgevoerd om het fenotype en de cytokineproductie vast te stellen (Interferon-gamma, (IFN-gamma), Interleukine 2 (IL2) en Tumor Necrosis Factor (TNF)). Daarnaast zal de proliferatie van lymfocyten worden bestudeerd met behulp van 5-(en-6)-carboxyfluoresceïnediacetaatsuccinimidylester (CFSE).

Door deze studie uit te voeren, hopen we het begrip van de betrokken immuunmechanismen, met name mechanismen van T-celgeheugen, te vergroten, wat inzicht zou verschaffen in de pathogenese van tuberculose en hiv. We zijn ook van mening dat het begrijpen van deze mechanismen zou kunnen leiden tot het vaststellen van surrogaten voor immuniteit in tbc-vaccinonderzoeken, wat het ontwerp van vaccinonderzoek zou kunnen verbeteren. Het kan ook helpen om de immunologische dynamiek van co-infectie met tuberculose bij personen met een HIV-infectie beter te begrijpen.