Systeeminen glutationin taso normaalissa jännitysglaukoomassa

Normaali jännitysglaukooma on yksi yleisimmistä primaarisen avokulmaglaukooman syistä Koreassa. Emme kuitenkaan vielä tiedä, mistä se johtuu. Tällä hetkellä saatavilla oleva hoitomenetelmä on vain silmänpainetta alentavat lääkkeet. Glutationi on yksi enimmäkseen korkean pitoisuuden solunsisäisistä antioksidanteista. Löydämme hermosolujen apoptoosin hiiren verkkokalvosta poistamalla glutationi systeemisesti käyttämällä buttioniinisulfoksimiinia. Glutationin tiedetään myös vähenevän primaarisessa avokulmaglaukoomassa, jossa on korkea silmänpaine. Joten aiomme arvioida systeemisen glutationitason normaalissa jännitysglaukoomassa.

Verinäytteet otetaan laskimopunktiolla normaalijännitystä sairastavien glaukoomapotilaiden ja iän mukaisten normaaleiden kontrollien kyynärpäälaskimoon. Viisi millilitraa verta kerätään EDTA-käsiteltyihin putkiin (hapettumisen estämiseksi). Sen jälkeen 30 mikrolitraa verta siirretään sentrifugiputkiin, ja siihen lisätään 33,3 mikrolitraa 5-sulfosalisyylihappoa (SSA), 100 mg/ml 10 minuutin kuluessa verinäytteestä. Jokainen näyte laimennetaan sitten 936,7 mikrolitralla natriumfosfaattipuskuria. (pH 7,5), ja kunkin putken sisältöä sekoitetaan nopeasti sentrifugissa 13 000 rpm:ssä 5 minuutin ajan. Osa supernatantista (150 mikrolitraa) kerätään sitten puhtaisiin sentrifugiputkiin ja jäähdytetään välittömästi -70 °C:seen. 96-kuoppaisen levyn kuhunkin kuoppaan lisätään 150 mikrolitraa päivittäistä puskuria (3 mg NADPH 10 ml:aan natriumfosfaattipuskuria), 50 mikrolitraa DTNB-liuosta ja 25 mikrolitraa standardeja tai näytteitä neljänä kappaleena, ja levy inkuboitiin 37 °C:ssa 3 minuuttia. Lopuksi 25 mikrolitraa GSSGR:ää lisätään edelliseen seokseen ja levy luetaan 410 nm:ssä käyttäen 96-kuoppaista levylukijaa (UV-spektrofotometri).