Systemisk glutationnivå ved normal spenningsglaukom

Normal spenningsglaukom er en av de vanligste årsakene til primær åpenvinklet glaukom i Korea. Selv om vi fortsatt ikke vet hva årsaken er. Kun IOP-senkende legemidler er den tilgjengelige terapeutiske metoden. Glutation er en av de mest høykonsentrerte intracellulære antioksidantene. Vi finner apoptose av nevroncelle i musens netthinnen ved systemisk uttømming av glutation ved bruk av butioninsulfoksimin. Glutation er også kjent for å reduseres ved primær åpenvinklet glaukom med høy IOP. Så vi planlegger å evaluere systemisk glutationnivå ved normal spenningsglaukom.

Blodprøver vil bli tatt ved venepunktur til den antecubitale venen til pasienter med normal spenning glaukom og alderstilpassede normale kontroller. Fem milliliter blod vil bli samlet i EDTA-behandlede rør (for å forhindre oksidasjon). Tretti mikroliter blod vil deretter overføres til sentrifugerør, og det vil bli tilsatt 33,3 mikroliter 5-sulfosalicylsyre (SSA), 100 mg/ml innen 10 minutter fra blodprøvetakingen. Hver prøve vil deretter fortynnes med 936,7 mikroliter natriumfosfatbuffer (pH 7,5), og innholdet i hvert rør blandes raskt i en sentrifuge ved 13 000 rpm i 5 minutter. En porsjon supernatant (150 mikroliter) vil deretter samles i rene sentrifugerør og umiddelbart avkjøles til -70°C. Til hver brønn på en 96-brønns plate vil 150 mikroliter daglig buffer (3 mg NADPH inn i 10 ml natriumfosfatbuffer), 50 mikroliter DTNB-løsning og 25 mikroliter standarder eller prøver tilsettes i fire eksemplarer, og platen vil bli tilsatt inkubert ved 37 °C i 3 minutter. Til slutt vil 25 mikroliter GSSGR tilsettes til den forrige blandingen, og platen avleses ved 410 nm ved bruk av en 96-brønners plateleser (UV-spektrofotometer).