Tämä sivu käännettiin automaattisesti, eikä käännösten tarkkuutta voida taata. Katso englanninkielinen versio lähdetekstiä varten.

Kalaöljystä johdetut N-3 monityydyttymättömät rasvahapot ja solunulkoiset rakkulat (HI-FIVE)

perjantai 4. marraskuuta 2022 päivittänyt: Professor Parveen Yaqoob, MA, DPhil, RNutr, FAfN, University of Reading

Kalaöljystä johdettujen N-3 monityydyttymättömien rasvahappojen vaikutukset solunulkoisten rakkuloiden muodostumiseen ja toiminnalliseen toimintaan

N-3 monityydyttymättömien rasvahappojen (n-3 PUFA), joita on runsaasti rasvaisessa kalassa ja kalaöljyissä, on ehdotettu vähentävän sydän- ja verisuonitautien riskiä modifioimalla monia riskitekijöitä, kuten kuten veren rasvat, veren hyytyminen, verisuonten toiminta ja tulehdus. Ekstrasellulaariset vesikkelit (EV:t) ovat pieniä hiukkasia, jotka vapautuvat eri soluista, kun ne aktivoituvat tai vaurioituvat. Suuri sähkö-elektroniikkamäärä veressä on yhdistetty korkeampaan sydän- ja verisuonitautien riskiin, ja tämän uskotaan johtuvan siitä, että ne sisältävät "bioaktiivisia" komponentteja, jotka voivat vaikuttaa moniin sydän- ja verisuonisairauksiin liittyviin prosesseihin. Hyvin harvat kliiniset tutkimukset ovat kuitenkin tutkineet n-3 PUFA:n kulutuksen ja kiertoajoneuvojen välisiä suhteita. Tämän tutkimuksen tavoitteena on tutkia ravinnon n-3 PUFA:n vaikutuksia sähköautojen syntymiseen ja toiminnallisiin toimintoihin, mikä antaisi uutta tietoa n-3 PUFA:n eduista sydän- ja verisuoniterveyteen.

Tutkimuksen yleiskatsaus

Tila

Valmis

Ehdot

Interventio / Hoito

Yksityiskohtainen kuvaus

Ehdotettu tutkimus on satunnaistettu, kaksoissokkoutettu, lumekontrolloitu crossover-interventio. Kohtalaisen sydän- ja verisuonitautiriskin (40–70-vuotiaat) koehenkilöille täydennetään joko kalaöljyä (1,8 g/d n-3 PUFA) tai lumelääkettä (paljon oleiinipitoista safloriöljyä) 12 viikon ajan. 12 viikon pesun jälkeen ja sitten siirtyminen toiseen toimenpiteeseen vielä 12 viikon ajan. Verinäytteet otetaan ennen jokaista toimenpidettä ja sen jälkeen. Elintarviketiheyskyselyllä arvioidaan potilaan tavanomaista n-3 PUFA:n saantia. Koehenkilöiden odotetaan myös ylläpitävän vähäistä n-3-rasvahappojen kulutusta, pidättäytyvän kaikkien lisäravinteiden käytöstä ja ylläpitävän painoaan tutkimuksen aikana. Annos perustuu aikaisempaan tutkimukseemme, joka osoitti endoteeliperäisten EV:iden (EEV) määrän vähenemisen ja verihiutaleperäisten EV:iden (PEV) määrän vähenemisen ja annoksen, jolla n-3 PUFA:lla on hyödyllisiä vaikutuksia. plakin stabiilisuudesta on raportoitu. Kokeellinen työ seuraa kahta pääsuuntaa. Ensimmäinen osa tutkii n-3 PUFA -lisäyksen vaikutusta plasmasta peräisin olevien sähköisten kokonaisuuden ominaisuuksiin ja toiminnallisiin aktiivisuuksiin. Toinen osa tutkii n-3 PUFA:n vaikutusta PEV:ien muodostumiseen koehenkilöiltä otetuista ja in vitro stimuloiduista verihiutaleista; syntyneet PEV:t arvioidaan myöhemmin niiden koostumuksen ja toiminnallisen aktiivisuuden suhteen. Tämä kokeellinen suunnitelma mahdollistaa samanaikaisen tutkimuksen sekä suoraan verestä otettujen kokonais-EV:iden koostumuksen ja aktiivisuuden että PEV:ien muodostumisen ja aktiivisuuden. Aiemman työmme perusteella 27 koehenkilöä vaaditaan havaitsemaan 10 %:n väheneminen sähköautojen määrässä kalaöljylisän jälkeen, kun kaksipuolinen merkitystaso on 5 % ja teho 90 %, ja 34 koehenkilöä tarvitaan tehoon 95 %. Myös aikaisempien tietojen perusteella 22 koehenkilöä antaisi 95 % tehon havaita 10 % eroja veritulpan muodostumisessa ja 30 koehenkilöä vaaditaan havaitsemaan n-3 PUFA:n merkittävä vaikutus verihiutaleiden aggregaatioon ja fosfatidyyliseriinille (PS) altistumiseen. Kun otetaan huomioon 15 prosentin keskeyttämisprosentti ja tavoitteena on 95 prosentin teho perustuen sähköautojen 10 prosentin vähennykseen, rekrytoimme yhteensä 40 koehenkilöä.

Opintotyyppi

Interventio

Ilmoittautuminen (Todellinen)

42

Vaihe

  • Ei sovellettavissa

Yhteystiedot ja paikat

Tässä osiossa on tutkimuksen suorittajien yhteystiedot ja tiedot siitä, missä tämä tutkimus suoritetaan.

Opiskelupaikat

Osallistumiskriteerit

Tutkijat etsivät ihmisiä, jotka sopivat tiettyyn kuvaukseen, jota kutsutaan kelpoisuuskriteereiksi. Joitakin esimerkkejä näistä kriteereistä ovat henkilön yleinen terveydentila tai aiemmat hoidot.

Kelpoisuusvaatimukset

Opintokelpoiset iät

40 vuotta - 70 vuotta (AIKUINEN, OLDER_ADULT)

Hyväksyy terveitä vapaaehtoisia

Joo

Sukupuolet, jotka voivat opiskella

Kaikki

Kuvaus

Sisällyttämiskriteerit:

  • Ikäraja 40-70 vuotta
  • Tupakoimaton

  • Kohtalainen sydän- ja verisuonisairauksien riski

    • Riski arvioidaan online-laskurilla nimeltä "QRISK2". Tämä online-laskin (https://qrisk.org/2016/), jotka käyttävät perinteisiä riskitekijöitä (ikä, systolinen verenpaine, tupakointitila ja seerumin kokonaiskolesterolin suhde korkeatiheyksiseen lipoproteiinikolesteroliin) yhdessä painoindeksin, etnisen alkuperän, puutteen mittareiden, sukuhistorian kanssa, antavat prosenttiosuuden riskistä sairastua. sydänkohtaus tai aivohalvaus seuraavan 10 vuoden aikana.
    • Kohtalaiset, joiden riski on 10–20 %, katsotaan olevan kohtalainen

Poissulkemiskriteerit:

  • BMI: <18,5 kg/m2
  • Anemia (hemoglobiinipitoisuus <12,5 g/l miehillä ja <11,5 g/l naisilla)
  • Hyperlipidemia (kokonaiskolesterolipitoisuus > 8 mmol/l)
  • Diabetes (diagnosoitu tai paastoglukoosipitoisuus >7 mmol/l) tai muut hormonaaliset sairaudet
  • Angina pectoris, aivohalvaus tai mikä tahansa verisuonisairaus viimeisten 12 kuukauden aikana
  • Munuaisten, ruoansulatuskanavan, hengitysteiden, maksan tai suolistosairaus
  • Tulehduksellinen sairaus
  • Ota lääkehoitoa kohonneen verenpaineen, hyperlipidemian, tulehduksen, masennuksen tai tyreopatian hoitoon.
  • Ota aspiriinia, ibuprofeenia tai muita ei-steroidisia tulehduskipulääkkeitä (NSAID) > 4 kertaa kuukaudessa tai kerran tutkimusta edeltävällä viikolla
  • Ota mitä tahansa muita verihiutaleiden tai hyytymistä estäviä lääkkeitä, kuten triflusaalia, klopidogreelia ja varfariinia.
  • Onko allergioita
  • Tupakointi (mukaan lukien e-savukkeet ja nikotiinituotteet)
  • Alkoholin väärinkäyttö tai juominen >21 yksikköä/vko miehillä ja >15 yksikköä/vko naisilla tai jos heillä on ollut alkoholin väärinkäyttöä
  • Käytä säännöllisesti rasvaista kalaa ja/tai ravintolisiä
  • Suunnittelet painonpudotusohjelman aloittamista tai laihdutusohjelmaa
  • Intensiivinen aerobinen harjoittelu (>20 min, kolme kertaa viikossa)
  • Naiset, jotka ovat raskaana, imettävät tai hedelmällisessä iässä ja jotka eivät käytä luotettavaa ehkäisyä (mukaan lukien raittius)
  • Osallistunut toiseen kliiniseen tutkimukseen viimeisen kolmen kuukauden aikana

Opintosuunnitelma

Tässä osiossa on tietoja tutkimussuunnitelmasta, mukaan lukien kuinka tutkimus on suunniteltu ja mitä tutkimuksella mitataan.

Miten tutkimus on suunniteltu?

Suunnittelun yksityiskohdat

  • Ensisijainen käyttötarkoitus: EHKÄISY
  • Jako: SATUNNAISTUNA
  • Inventiomalli: RISTO
  • Naamiointi: KOLMINKERTAISTAA

Aseet ja interventiot

Osallistujaryhmä / Arm
Interventio / Hoito
ACTIVE_COMPARATOR: Interventio
Kalaöljykapselit
Ravintolisä: Kalaöljykapselit
Jokainen annos sisältää 360 mg eikosapentaeenihappoa (EPA), 270 mg dokosaheksaeenihappoa (DHA) ja kokonaislisä on 1,8 g päivässä n-3 PUFA:ta 12 viikon ajan.
PLACEBO_COMPARATOR: Plasebo
Korkea-oleiinipitoiset safloriöljykapselit
Ravintolisä: Korkea-oleiinipitoiset safloriöljykapselit
Oleiinipitoiset safloriöljykapselit 12 viikon ajan

Mitä tutkimuksessa mitataan?

Ensisijaiset tulostoimenpiteet

Tulosmittaus
Toimenpiteen kuvaus
Aikaikkuna
Verihiutalevapaassa plasmassa (PFP) olevien kiertävien kokonaiselektroniikkalaitteiden määrät, jotka on havaittu nanohiukkasten seuranta-analyysillä (NTA)
Aikaikkuna: NTA:n havaitsema muutos PFP:ssä kiertävässä EV-lukujen kokonaismäärässä 12 viikon ottojakson jälkeen
Kierrettävät EV:t eristettiin ensin fraktioiden 7-9 saamiseksi kokoekskluusiokromatografialla (SEC) käyttämällä Izon qEV -pylväitä (Izon Science Ltd, Oxford, Yhdistynyt kuningaskunta). Fraktiot laimennettiin sitten PBS:llä suositeltujen hiukkasten pitoisuuksien (1-10 x 10^8 vesikkeliä/ml) ylläpitämiseksi ennen kuin ne analysoitiin NanoSight 300:lla (Malvern, Amesbury, Yhdistynyt kuningaskunta). Jokaista analyysiä varten otettiin viisi videota, kukin 60 sekuntia, kameratasolla 13. Tiedot analysoitiin instrumenttiohjelmistolla NTA 3.20, joka pystyy tunnistamaan yksittäiset hiukkaset ja arvioimaan niiden koon Stokes-Einstein-yhtälön perusteella. Lopuksi NTA:lle asetettiin 70 nm:n kynnys pienten lipoproteiinien minimaalisen häiriön varmistamiseksi.
NTA:n havaitsema muutos PFP:ssä kiertävässä EV-lukujen kokonaismäärässä 12 viikon ottojakson jälkeen
Virtaussytometrialla (FCM) havaittujen fosfatidyyliseriinipositiivisten sähköautojen (PS+EV) lukumäärä verihiutalevapaassa plasmassa (PFP)
Aikaikkuna: FCM havaitsi PS+EV-kokonaislukujen muutoksen PFP:ssä 12 viikon ottojakson jälkeen
5 μl PFP:tä lisättiin tarttumattomiin mikrosentrifugiputkiin (Alpha Laboratories Ltd, Hampshire, Yhdistynyt kuningaskunta), jotka sisälsivät 5 μl FcR-estoreagenssia (Miltenyi Biotec Ltd, Surrey, Yhdistynyt kuningaskunta) ja anneksiini V -puskuria ja inkuboitiin 15 minuuttia pimeässä klo. huonelämpötila. Sitten lisättiin vasta-aineet ja isotyyppisovitetut kontrollit ja näytteitä inkuboitiin vielä 15 minuuttia pimeässä huoneenlämpötilassa. Inkuboinnin jälkeen näytteet laimennettiin 200 µl:lla Annexin V -puskuria ja siirrettiin FACS-virtausputkiin (BD Biosciences, Wokingham, Yhdistynyt kuningaskunta), jotka olivat valmiita FCM:n analysoitavaksi. PS+EV:t tunnistettiin anneksiini V+EV:iksi, kun ne laukaisivat APC-fluoresenssilla.
FCM havaitsi PS+EV-kokonaislukujen muutoksen PFP:ssä 12 viikon ottojakson jälkeen
Fluorescence FCM:n havaitseman PFP:n kiertävien sähköautojen osapopulaation karakterisointi
Aikaikkuna: Muutos PFP:ssä kiertävien sähköautojen alapopulaatioiden lukumäärässä fluoresenssi-FCM:llä 12 viikon ottojakson jälkeen
5 μl PFP:tä lisättiin tarttumattomiin mikrosentrifugiputkiin (Alpha Laboratories Ltd, Hampshire, Yhdistynyt kuningaskunta), jotka sisälsivät 5 μl FcR-estoreagenssia (Miltenyi Biotec Ltd, Surrey, Yhdistynyt kuningaskunta) ja anneksiini V -puskuria ja inkuboitiin 15 minuuttia pimeässä klo. huonelämpötila. Sitten lisättiin vasta-aineet ja isotyyppisovitetut kontrollit ja näytteitä inkuboitiin vielä 15 minuuttia pimeässä huoneenlämpötilassa. Inkuboinnin jälkeen näytteet laimennettiin 200 µl:lla Annexin V -puskuria ja siirrettiin FACS-virtausputkiin (BD Biosciences, Wokingham, Yhdistynyt kuningaskunta), jotka olivat valmiita FCM:n analysoitavaksi. Verihiutaleperäiset EV:t (PDEV:t) tunnistettiin anneksiini V+EV:iksi, jotka myös värjäytyivät positiivisiksi CD41-PE:lle APC vs PE -kvadranttikaaviossa, ja endoteeliperäiset EV:t (EDEV:t) tunnistettiin anneksiini V+EV:iksi, jotka myös värjäytyivät positiivisiksi CD105:lle. - eFluor450 APC vs PB kvadranttikaaviossa.
Muutos PFP:ssä kiertävien sähköautojen alapopulaatioiden lukumäärässä fluoresenssi-FCM:llä 12 viikon ottojakson jälkeen

Toissijaiset tulostoimenpiteet

Tulosmittaus
Toimenpiteen kuvaus
Aikaikkuna
Verenkierrossa olevien sähköautojen tromboottinen toiminta PFP:ssä (trombiinin muodostumisen viive)
Aikaikkuna: Muutos protromboottisissa aktiivisuuksissa (trombiinin muodostumisen viive) PFP:ssä kiertävien sähköautojen 12 viikon ottojakson jälkeen
Kaupallisesti saatavilla olevaa, levypohjaista trombiinin muodostumismääritystä käytettiin mittaamaan trombiinin muodostumista joko standardissa, yhdistetyssä rakkula- ja verihiutalevapaassa plasmassa (kutsutaan vesikkelittömäksi plasmaksi tai VFP:ksi) tai samassa VFP:ssä, mutta siihen lisättiin verenkierrossa olevia EV:itä koehenkilöiltä interventiotutkimus. Tämä mahdollisti interventiotutkimuksen näytteissä olevan TF-riippuvaisen trombiinin muodostumisen arvioinnin, joka johtui erityisesti kiertävistä EV:istä. Tulokset esitettiin viitenä muuttujana: (i) viivevaihe trombiinin muodostuksen alkamiselle liipaisimen lisäämisen jälkeen (aika 1/6 piikin korkeudesta) (min); (ii) trombiinin huippupitoisuus (nM); (iii) aika huipun saavuttamiseen (min); (iv) nopeusindeksi, joka määritellään = [huipun korkeus/(aika huippuun - viiveaika)] ​​ja (v) käyrän alla oleva pinta-ala, määriteltynä endogeenisenä trombiinipotentiaalina (ETP) (ilmaistuna nM trombiinina × min)
Muutos protromboottisissa aktiivisuuksissa (trombiinin muodostumisen viive) PFP:ssä kiertävien sähköautojen 12 viikon ottojakson jälkeen
Verenkierrossa olevien sähköautojen tromboottiset vaikutukset PFP:ssä (huipputrombiinikonsentraatio)
Aikaikkuna: PFP:ssä kiertävien elektronien protromboottisten aktiivisuuksien (trombiinihuippupitoisuus) muutos 12 viikon ottojakson jälkeen
Kaupallisesti saatavilla olevaa, levypohjaista trombiinin muodostumismääritystä käytettiin mittaamaan trombiinin muodostumista joko standardissa, yhdistetyssä rakkula- ja verihiutalevapaassa plasmassa (kutsutaan vesikkelittömäksi plasmaksi tai VFP:ksi) tai samassa VFP:ssä, mutta siihen lisättiin verenkierrossa olevia EV:itä koehenkilöiltä interventiotutkimus. Tämä mahdollisti interventiotutkimuksen näytteissä olevan TF-riippuvaisen trombiinin muodostumisen arvioinnin, joka johtui erityisesti kiertävistä EV:istä. Tulokset esitettiin viitenä muuttujana: (i) viivevaihe trombiinin muodostuksen alkamiselle liipaisimen lisäämisen jälkeen (aika 1/6 piikin korkeudesta) (min); (ii) trombiinin huippupitoisuus (nM); (iii) aika huipun saavuttamiseen (min); (iv) nopeusindeksi, joka määritellään = [huipun korkeus/(aika huippuun - viiveaika)] ​​ja (v) käyrän alla oleva pinta-ala, määriteltynä endogeenisenä trombiinipotentiaalina (ETP) (ilmaistuna nM trombiinina × min)
PFP:ssä kiertävien elektronien protromboottisten aktiivisuuksien (trombiinihuippupitoisuus) muutos 12 viikon ottojakson jälkeen
Verenkierrossa olevien sähköautojen tromboottinen toiminta PFP:ssä (Time to Peak trombiinikonsentraatio)
Aikaikkuna: PFP:ssä kiertävien elektronien pro-tromboottisten aktiviteettien (aika trombiinin huippupitoisuuteen) muutos 12 viikon ottojakson jälkeen
Kaupallisesti saatavilla olevaa, levypohjaista trombiinin muodostumismääritystä käytettiin mittaamaan trombiinin muodostumista joko standardissa, yhdistetyssä rakkula- ja verihiutalevapaassa plasmassa (kutsutaan vesikkelittömäksi plasmaksi tai VFP:ksi) tai samassa VFP:ssä, mutta siihen lisättiin verenkierrossa olevia EV:itä koehenkilöiltä interventiotutkimus. Tämä mahdollisti interventiotutkimuksen näytteissä olevan TF-riippuvaisen trombiinin muodostumisen arvioinnin, joka johtui erityisesti kiertävistä EV:istä. Tulokset esitettiin viitenä muuttujana: (i) viivevaihe trombiinin muodostuksen alkamiselle liipaisimen lisäämisen jälkeen (aika 1/6 piikin korkeudesta) (min); (ii) trombiinin huippupitoisuus (nM); (iii) aika huipun saavuttamiseen (min); (iv) nopeusindeksi, joka määritellään = [huipun korkeus/(aika huippuun - viiveaika)] ​​ja (v) käyrän alla oleva pinta-ala, määriteltynä endogeenisenä trombiinipotentiaalina (ETP) (ilmaistuna nM trombiinina × min)
PFP:ssä kiertävien elektronien pro-tromboottisten aktiviteettien (aika trombiinin huippupitoisuuteen) muutos 12 viikon ottojakson jälkeen
Kiertävän sähköajoneuvojen tromboottinen toiminta PFP:ssä (Velocity Index)
Aikaikkuna: PFP:ssä kiertävien sähköautojen tromboottisen aktiivisuuden (nopeusindeksin) muutos 12 viikon ottojakson jälkeen
Kaupallisesti saatavilla olevaa, levypohjaista trombiinin muodostumismääritystä käytettiin mittaamaan trombiinin muodostumista joko standardissa, yhdistetyssä rakkula- ja verihiutalevapaassa plasmassa (kutsutaan vesikkelittömäksi plasmaksi tai VFP:ksi) tai samassa VFP:ssä, mutta siihen lisättiin verenkierrossa olevia EV:itä koehenkilöiltä interventiotutkimus. Tämä mahdollisti interventiotutkimuksen näytteissä olevan TF-riippuvaisen trombiinin muodostumisen arvioinnin, joka johtui erityisesti kiertävistä EV:istä. Tulokset esitettiin viitenä muuttujana: (i) viivevaihe trombiinin muodostuksen alkamiselle liipaisimen lisäämisen jälkeen (aika 1/6 piikin korkeudesta) (min); (ii) trombiinin huippupitoisuus (nM); (iii) aika huipun saavuttamiseen (min); (iv) nopeusindeksi, joka määritellään = [huipun korkeus/(aika huippuun - viiveaika)] ​​ja (v) käyrän alla oleva pinta-ala, määriteltynä endogeenisenä trombiinipotentiaalina (ETP) (ilmaistuna nM trombiinina × min)
PFP:ssä kiertävien sähköautojen tromboottisen aktiivisuuden (nopeusindeksin) muutos 12 viikon ottojakson jälkeen
PFP:ssä (endogeeninen trombiinipotentiaali) kiertävien sähköautojen tromboottinen toiminta
Aikaikkuna: PFP:ssä kiertävien elektronien protromboottisten aktiviteettien (endogeeninen trombiinipotentiaali) muutos 12 viikon ottojakson jälkeen
Kaupallisesti saatavilla olevaa, levypohjaista trombiinin muodostumismääritystä käytettiin mittaamaan trombiinin muodostumista joko standardissa, yhdistetyssä rakkula- ja verihiutalevapaassa plasmassa (kutsutaan vesikkelittömäksi plasmaksi tai VFP:ksi) tai samassa VFP:ssä, mutta siihen lisättiin verenkierrossa olevia EV:itä koehenkilöiltä interventiotutkimus. Tämä mahdollisti interventiotutkimuksen näytteissä olevan TF-riippuvaisen trombiinin muodostumisen arvioinnin, joka johtui erityisesti kiertävistä EV:istä. Tulokset esitettiin viitenä muuttujana: (i) viivevaihe trombiinin muodostuksen alkamiselle liipaisimen lisäämisen jälkeen (aika 1/6 piikin korkeudesta) (min); (ii) trombiinin huippupitoisuus (nM); (iii) aika huipun saavuttamiseen (min); (iv) nopeusindeksi, joka määritellään = [huipun korkeus/(aika huippuun - viiveaika)] ​​ja (v) käyrän alla oleva pinta-ala, määriteltynä endogeenisenä trombiinipotentiaalina (ETP) (ilmaistuna nM trombiinina × min)
PFP:ssä kiertävien elektronien protromboottisten aktiviteettien (endogeeninen trombiinipotentiaali) muutos 12 viikon ottojakson jälkeen
Ex vivo -agonististimuloitu verihiutaleaktivaatio havaittu levypohjaisella verihiutaleaggregaatiomäärityksellä
Aikaikkuna: Muutos ex vivo verihiutaleiden aktivaatiossa 12 viikon annostelujakson jälkeen
96-kuoppaista korkean suorituskyvyn aggregometriatekniikkaa, joka mahdollistaa useiden eri agonistien pitoisuuksien testaamisen, käytettiin tutkimaan n-3 PUFA -lisän vaikutusta verihiutaleiden toimintaan. Verihiutalerikasta plasmaa (PRP) ja verihiutalehuonoa plasmaa (PPP) jokaisesta tutkimuskäynnistä käytettiin verihiutaleiden aggregaatiomäärityksessä käyttäen esivalmistettuja 96-kuoppaisia ​​mikrolevyjä, jotka sisälsivät agonisteja (ADP, EPI, TRAP-6 ja U46619). Annos-vastekäyrät saatiin vasteena kullekin agonistille ja tulokset esitettiin logEC50:nä (agonistin log-konsentraatio, M, joka antaa vasteen maksimi- ja minimiaggregaation puolivälissä).
Muutos ex vivo verihiutaleiden aktivaatiossa 12 viikon annostelujakson jälkeen
Ex vivo -agonististimuloitu verihiutaleiden aktivaatio, joka on havaittu levypohjaisella verihiutaleaggregaatiomäärityksellä (CRP-XL Log EC50)
Aikaikkuna: Muutos ex vivo verihiutaleiden aktivaatiossa 12 viikon annostelujakson jälkeen
96-kuoppaista korkean suorituskyvyn aggregometriatekniikkaa, joka mahdollistaa useiden eri agonistien pitoisuuksien testaamisen, käytettiin tutkimaan n-3 PUFA -lisän vaikutusta verihiutaleiden toimintaan. Verihiutalerikasta plasmaa (PRP) ja verihiutalehuonoa plasmaa (PPP) jokaisesta tutkimuskäynnistä käytettiin verihiutaleiden aggregaatiomäärityksessä käyttäen esivalmistettuja 96-kuoppaisia ​​mikrolevyjä, jotka sisälsivät agonisteja (CRP-XL). Annos-vastekäyrät saatiin vasteena kullekin agonistille ja tulokset esitettiin logEC50:nä (agonistin log-konsentraatio, mg/ml, mikä antoi vasteen maksimi- ja minimiaggregaation puolivälissä).
Muutos ex vivo verihiutaleiden aktivaatiossa 12 viikon annostelujakson jälkeen
Stimuloitujen verihiutaleiden supernatanteista valmistettujen verihiutaleperäisten ekstrasellulaaristen rakkuloiden (PDEV:iden) protromboottiset vaikutukset (Trombusmuodostuksen päätepiste ja maksimi)
Aikaikkuna: Muutos stimuloitujen verihiutaleiden supernatanteista valmistettujen PEV-solujen protromboottisissa aktiivisuuksissa (päätepiste ja trombin muodostumisen maksimi) 12 viikon annoksen jälkeen
Ex vivo -veritulpan muodostuminen mitattiin lisäämällä in vitro -generoituja PDEV:itä stimuloiduista verihiutaleista kokovereen virtauksen alaisena. Tulokset esitettiin kolmena muuttujana: (i) päätepiste ex vivo trombin muodostumiselle (FU); (ii) ex vivo trombin muodostumisen (FU) päätepiste; (iii) käyrän alla oleva pinta-ala.
Muutos stimuloitujen verihiutaleiden supernatanteista valmistettujen PEV-solujen protromboottisissa aktiivisuuksissa (päätepiste ja trombin muodostumisen maksimi) 12 viikon annoksen jälkeen
Stimuloitujen verihiutaleiden supernatanteista valmistettujen verihiutaleperäisten ekstrasellulaaristen rakkuloiden (PDEV) tromboottinen aktiivisuus (käyrän alla oleva pinta-ala)
Aikaikkuna: Muutos stimuloitujen verihiutaleiden supernatanteista valmistettujen PEV-solujen pro-tromboottisessa aktiivisuudessa (käyrän alla oleva pinta-ala) 12 viikon ottojakson jälkeen
Ex vivo -veritulpan muodostuminen mitattiin lisäämällä in vitro -generoituja PDEV:itä stimuloiduista verihiutaleista kokovereen virtauksen alaisena. Tulokset esitettiin kolmena muuttujana: (i) päätepiste ex vivo trombin muodostumiselle (FU); (ii) ex vivo trombin muodostumisen (FU) päätepiste; (iii) käyrän alla oleva pinta-ala.
Muutos stimuloitujen verihiutaleiden supernatanteista valmistettujen PEV-solujen pro-tromboottisessa aktiivisuudessa (käyrän alla oleva pinta-ala) 12 viikon ottojakson jälkeen
Circulating EV Total Lipids Analysis
Aikaikkuna: Muutos sähköautojen kokonaislipidiarvoissa 12 viikon ottojakson jälkeen
500 µl:n alikvootti jäädytettyä PFP:tä sulatettiin huoneenlämmössä telasekoittimella ja sille suoritettiin SEC sähköajoneuvojen eristämiseksi ja puhdistamiseksi. Fraktiot 7-9 yhdistettiin ja 800 µl yhdistettyjä fraktioita valmistettiin lipidiuuttoa ja metyyliesteröintiä varten. EV-kokonaislipidimetyyliesterit analysoitiin sitten kaasukromatografialla Hewlett-Packard 6890 -sarjan GC:llä (Hewlett-Packard, Kalifornia, Yhdysvallat) seuraavalla protokollalla: jakosuhteeksi asetettiin 30:1 plasma- ja EV-analyysiä varten. Injektiotilavuus oli plasmalle 1 μl ja sähköautoille 5 μl. Sekä injektorin että anturin lämpötila pidettiin 300 °C:ssa ja lämpötilaohjelma oli alkulämpötila 115 °C 2 minuutin ajan, nostettiin 10 °C/min 200 °C:seen ja pidettiin tässä lämpötilassa 16 minuuttia ja lopuksi nostettiin. 60 °C/min - 240 °C 2 minuutin ajan (kokonaisajoaika: 29,2 minuuttia). Näytteet analysoitiin ChemStation-ohjelmistolla ja Microsoft Excelillä.
Muutos sähköautojen kokonaislipidiarvoissa 12 viikon ottojakson jälkeen
Plasman kokonaisfosfolipidien analyysi
Aikaikkuna: Plasman kokonaisfosfolipidien muutos 12 viikon annoksen jälkeen
400 µl:n erä jäädytettyä PFP:tä sulatettiin ja sentrifugoitiin denaturoituneen proteiinin poistamiseksi. 400 μl 0,9 % NaCl:a lisättiin PFP-näytteeseen, jolloin saatiin yhteensä 800 μl, ja sitten lisättiin 30 μg fosfatidyylikoliinia (PC) ja 15 μg fosfatidyylietanoliamiinin (PE) sisäisiä standardeja kvantitatiivista analyysiä varten. Lipidiuuton, PC:n ja PE:n erotuksen ja plasman fosfolipidiuutteiden metyyliesteröinnin jälkeen näytteet analysoitiin GC:llä.
Plasman kokonaisfosfolipidien muutos 12 viikon annoksen jälkeen
Lipidiprofiilin pitoisuudet plasmassa
Aikaikkuna: Muutos plasman lipidiprofiilin pitoisuuksissa 12 viikon annostelujakson jälkeen
250 µl:n alikvootti jäädytettyä PFP:tä sulatettiin huoneenlämmössä telasekoittimella ja sentrifugoitiin 500 x g:llä 5 minuuttia huoneenlämpötilassa (Eppendorf Centrifuge 5415 R, DJBlabcare, Yhdistynyt kuningaskunta). Sitten näyte analysoitiin kliinisellä RANDOX-analysaattorilla (RANDOX Daytona+ Analyser, Randox Laboratories Ltd, Yhdistynyt kuningaskunta) TC-, TAG-, HDL-C-, LDL-C- ja TC/HDL-C-suhteen pitoisuuden suhteen.
Muutos plasman lipidiprofiilin pitoisuuksissa 12 viikon annostelujakson jälkeen
TC/HDL-C-suhteen pitoisuudet plasmassa
Aikaikkuna: Muutos plasman TC/HDL-C -suhteen pitoisuuksissa 12 viikon annoksen jälkeen
250 µl:n alikvootti jäädytettyä PFP:tä sulatettiin huoneenlämmössä telasekoittimella ja sentrifugoitiin 500 x g:llä 5 minuuttia huoneenlämpötilassa (Eppendorf Centrifuge 5415 R, DJBlabcare, Yhdistynyt kuningaskunta). Sitten näyte analysoitiin kliinisellä RANDOX-analysaattorilla (RANDOX Daytona+ Analyser, Randox Laboratories Ltd, Iso-Britannia) TC/HDL-C-suhteen suhteen.
Muutos plasman TC/HDL-C -suhteen pitoisuuksissa 12 viikon annoksen jälkeen
Verenpaine
Aikaikkuna: Verenpaineen muutos 12 viikon annostelujakson jälkeen
Koehenkilöitä pyydettiin lepäämään 10 minuuttia ennen verenpaineen havaitsemista, ja sitten verenpainemansetti asetettiin tiukasti heidän vasempaan käsivarteensa noin 2 cm kyynärpään yläpuolelle siten, että mansetissa oli osoitinmerkki olkapäävaltimon päällä mittauksen aloittamiseksi. Koehenkilöiden tulee asettaa kätensä sydämen tasolle, eivätkä ne saa puhua ja jalkojaan ristissä mittauksen aikana. Mittaus suoritettiin kolme kertaa ja odotettiin 2 minuuttia kunkin lukeman välillä ((Omron M2 Upper Arm Blood Pressure Monitor, OMRON Healthcare Europe BV, Yhdistynyt kuningaskunta). Kolmen lukeman keskiarvo otettiin lopullisen tuloksen saamiseksi.
Verenpaineen muutos 12 viikon annostelujakson jälkeen

Yhteistyökumppanit ja tutkijat

Täältä löydät tähän tutkimukseen osallistuvat ihmiset ja organisaatiot.

Sponsori

University of Reading

Yhteistyökumppanit

Biotechnology and Biological Sciences Research Council

Tutkijat

  • Päätutkija: Parveen Yaqoob, MA, DPhil, RNutr, University of Reading

Julkaisuja ja hyödyllisiä linkkejä

Tutkimusta koskevien tietojen syöttämisestä vastaava henkilö toimittaa nämä julkaisut vapaaehtoisesti. Nämä voivat koskea mitä tahansa tutkimukseen liittyvää.

Hyödyllisiä linkkejä

Opintojen ennätyspäivät

Nämä päivämäärät seuraavat ClinicalTrials.gov-sivustolle lähetettyjen tutkimustietueiden ja yhteenvetojen edistymistä. National Library of Medicine (NLM) tarkistaa tutkimustiedot ja raportoidut tulokset varmistaakseen, että ne täyttävät tietyt laadunvalvontastandardit, ennen kuin ne julkaistaan ​​julkisella verkkosivustolla.

Opi tärkeimmät päivämäärät

Opiskelun aloitus (TODELLINEN)

Perjantai 16. helmikuuta 2018

Ensisijainen valmistuminen (TODELLINEN)

Lauantai 30. marraskuuta 2019

Opintojen valmistuminen (TODELLINEN)

Tiistai 30. maaliskuuta 2021

Opintoihin ilmoittautumispäivät

Ensimmäinen lähetetty

Perjantai 23. kesäkuuta 2017

Ensimmäinen toimitettu, joka täytti QC-kriteerit

Tiistai 27. kesäkuuta 2017

Ensimmäinen Lähetetty (TODELLINEN)

Torstai 29. kesäkuuta 2017

Tutkimustietojen päivitykset

Viimeisin päivitys julkaistu (TODELLINEN)

Maanantai 7. marraskuuta 2022

Viimeisin lähetetty päivitys, joka täytti QC-kriteerit

Perjantai 4. marraskuuta 2022

Viimeksi vahvistettu

Tiistai 1. marraskuuta 2022

Lisää tietoa

Tähän tutkimukseen liittyvät termit

Avainsanat

Muita asiaankuuluvia MeSH-ehtoja

Muut tutkimustunnusnumerot

  • UREC 17/18

Lääke- ja laitetiedot, tutkimusasiakirjat

Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää lääkevalmistetta

Ei

Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää laitetuotetta

Ei

Nämä tiedot haettiin suoraan verkkosivustolta clinicaltrials.gov ilman muutoksia. Jos sinulla on pyyntöjä muuttaa, poistaa tai päivittää tutkimustietojasi, ota yhteyttä register@clinicaltrials.gov. Heti kun muutos on otettu käyttöön osoitteessa clinicaltrials.gov, se päivitetään automaattisesti myös verkkosivustollemme .

Kliiniset tutkimukset Kalaöljykapselit

Hae vastaavia kokeiluja

Sponsorit ja yhteistyökumppanit

Sairaudet

Huumeiden interventiot

CROs by country

CROs in Mauritania

Ehdot

Harvinaiset sairaudet

Huumeiden interventiot

Ravintolisät

Sponsori / yhteistyökumppanit

Sijainnit

Tilaa