Geenisiirto sirppisolutautia varten

Tämä on avoin, ei-satunnaistettu, yhden keskuksen pilotti- ja toteutettavuustutkimus, yhden haaran kohorttitutkimus, joka sisältää yhden infuusion autologisista luuytimestä peräisin olevista CD34+ HSC-soluista, jotka on transdusoitu lentivirusvektorilla, joka sisältää lyhyen hiusneula-RNA:n, joka kohdistuu BCL11a:han. Kertymä on enintään 7 arvioitavaa SCD-potilasta. Tutkimuksessa on kolme kerrosta:

1. Kerros 1: ikä ≥18-40
2. Kerros 2: ikä ≥12-<18
3. Kerros 3: ikä ≥3-<12

Sen määrittämiseksi, onko mahdollista ja turvallista antaa lentivirusgeeninsiirtovektori, joka koodaa pientä hiusneula (sh) RNA:ta, joka kohdistuu y-globiinigeenin repressoriin, BCL11A, potilailla, joilla on vaikea SCD.

Potilaille tehdään standardikäsittely autologista luuydinsiirtoa varten laitosten ohjeiden mukaisesti, minkä jälkeen heille tehdään kaksi luuytimen keräystä vähintään 4 viikon välein, joita käytetään varaytimenä (vähintään 2 x 106 CD34+-solua/kg) ) ja autologisen luuytimen keräämiseen geeninsiirtoa varten.

Potilaat saavat verensiirtoja 3 kuukauden ajan ennen suunniteltua valmisteen infuusiopäivää, ja tavoitteena on saavuttaa HbS-taso ≤ 30 % geeninsiirtoon mennessä. Jos potilaalla on jo krooninen verensiirto-ohjelma osana sairauden perushoitoa, hoitoa voidaan jatkaa. Transfuusioiden ajoitus sovitetaan tapahtuvaksi 7 päivän sisällä ennen anestesiaa vaativia toimenpiteitä, kuten luuytimen keräämistä.

Hematopoieettiset solut kerätään potilaasta ennen hoitoa pelastustoimenpiteenä ("varasiirre"), jos hematopoieettista palautumista ei havaita geneettisesti manipuloitujen solujen injektion jälkeen tai jos manipuloidut solut epäonnistuvat täyttääkseen julkaisukriteerit. Luuydin (enintään 20 ml/kg) otetaan talteen potilaasta yleisanestesiassa lonkkaharjan takaosista molemmilta puolilta useilla pistoksilla vähintään 4 viikkoa ennen geeniterapiaa. Osa luuytimestä, joka sisältää vähintään 2 x 106 CD34+-solua/kg, jäädytetään ja varastoidaan manipuloimattomana autologisen luuytimen keräysstandardien kliinisten menetelmien mukaisesti varasiirteen muodostamiseksi. Jos CD34+-solujen lukumäärä, joka ylittää 2 x 106 solua/kg, on suurempi tai yhtä suuri kuin 1 x 106 solua/kg, nämä ylimääräiset solut prosessoitaisiin transduktiota varten, transdusoitaisiin ja sitten jäädytettäisiin. Transduktio suoritetaan valituille CD34+-soluille ja transdusoidut solut kylmäsäilytetään. Jos ensimmäisestä keräyksestä saadut solut transdusoitiin ja jäädytettiin, nämä geenimodifioidut solut sulatetaan ja valmistetaan infuusiota varten rinnakkain seuraavien keräysten tuotteen kanssa. Tässä tapauksessa infusoidaan kaksi erillistä tuotetta. Kaikki solujen käsittelytoimenpiteet ja vapautumistestit suoritetaan transduktiolaitoksessa hyvän valmistustavan (GMP) mukaisesti noudattaen prosessikohtaisia ​​vakiotoimintamenettelyjä. Lopullisen lääketuotteen mukana toimitetaan analyysitodistus, joka todistaa, että kaikki vapautumistestit ovat suoritettuja ja spesifikaatioiden mukaisia. Koehenkilöt saavat myeloablatiivista hoitoa busulfaanilla, jota annetaan päivinä -5 - -2, ennen transdusoitujen solujen infuusiota. Solut infusoidaan suonensisäisesti 30–45 minuutin kuluessa tavallisen esihydraation ja esilääkityksen jälkeen Bostonin lastensairaalan hematopoieettisten kantasolujen transplantaatioyksikön standardiohjeiden mukaisesti. Tämä standardi edellyttää, että potilas on jatkuvassa sydämen, hengitysteiden ja happisaturaation monitorissa koko infuusion ajan ja 30 minuuttia sen jälkeen. Elintoiminnot mitataan ja kirjataan ennen verensiirtoa, 15 minuuttia verensiirron jälkeen, tunnin välein infuusion keston ja verensiirron lopussa. RN pysyy potilaan kanssa verensiirron ensimmäiset 5 minuuttia. Jos annetaan kaksi transduktiotuotetta, toinen transduktiotuote annetaan viipymättä ensimmäisen jälkeen.