Přenos genů pro srpkovitou anémii

Toto je otevřená, nerandomizovaná, jednocentrová, pilotní a proveditelná, jednoramenná kohortová studie zahrnující jedinou infuzi autologních CD34+ HSC buněk odvozených z kostní dřeně transdukovaných lentivirovým vektorem obsahujícím krátkovláskovou RNA zacílenou na BCL11a. Nárůst bude maximálně 7 hodnotitelných pacientů s SCD. Studie bude mít tři vrstvy:

1. Vrstva 1: věk ≥18-40
2. Vrstva 2: věk ≥12-<18
3. Vrstva 3: věk ≥3-<12

Stanovit proveditelnost a bezpečnost podávání lentivirového vektoru pro přenos genu kódujícího malou vlásenkovou (sh) RNA zacílenou na represor genu y-globinu, BCL11A, u pacientů s těžkou SCD.

Pacienti podstoupí standardní vyšetření pro autologní transplantaci kostní dřeně podle institucionálních směrnic a poté podstoupí dva odběry kostní dřeně s odstupem minimálně 4 týdnů, které budou použity pro záložní dřeň (minimálně 2 x 106 CD34+ buněk/kg ) a pro odběr autologní kostní dřeně pro genový přenos.

Pacienti budou dostávat krevní transfuze po dobu 3 měsíců před plánovaným datem infuze přípravku s cílem dosáhnout hladiny HbS ≤ 30 % do doby genového přenosu. Pokud je subjekt již na chronickém transfuzním režimu jako součást základního managementu onemocnění, režim může pokračovat. Načasování transfuze bude koordinováno tak, aby proběhlo do 7 dnů před jakýmkoli zákrokem vyžadujícím anestezii, jako je odběr kostní dřeně.

Hematopoetické buňky budou pacientovi odebrány před léčbou, aby sloužily jako záchranný postup („záložní štěp“), pokud po injekci geneticky manipulovaných buněk nedojde k žádné obnově krvetvorby nebo pokud manipulované buňky selžou splnit kritéria vydání. Kostní dřeň (až 20 ml/kg) bude pacientovi odebrána v celkové anestezii ze zadních kyčelních hřebenů na obou stranách vícenásobnými punkcemi minimálně 4 týdny před genovou terapií. Část kostní dřeně obsahující alespoň 2 x 106 CD34+ buněk/kg bude zmražena a skladována nemanipulovaná podle standardních klinických postupů pro autologní odběr kostní dřeně za účelem vytvoření záložního štěpu. Pokud je počet CD34+ buněk, který přesahuje 2 x 106 buněk/kg, větší nebo roven 1 x 106 buněk/kg, tyto nadbytečné buňky by byly zpracovány pro transdukci, transdukovány a poté zmraženy. Transdukce bude provedena na vybraných CD34+ buňkách a transdukované buňky budou kryokonzervovány. Pokud byly buňky z první sklizně transdukovány a zmraženy, tyto genově modifikované buňky se rozmrazí a připraví pro infuzi paralelně s produktem z následné sklizně (následných sklizní). V tomto případě by byly aplikovány dva samostatné produkty. Všechny postupy manipulace s buňkami a testování uvolňování budou prováděny v transdukčním zařízení v souladu se správnou výrobní praxí (GMP) podle standardních pracovních postupů specifických pro daný proces. Ke konečnému léku bude přiložen certifikát o analýze, který dokumentuje, že všechny testy uvolňování jsou dokončeny a jsou v souladu se specifikací. Subjekty dostanou myeloablativní kondicionování busulfanem podávaným ve dnech -5 až -2 před infuzí transdukovaných buněk. Buňky budou podávány intravenózní infuzí po dobu 30–45 minut po standardní prehydrataci a premedikaci podle standardních pokynů jednotky pro transplantaci hematopoetických kmenových buněk Boston Children's Hospital. Tento standard vyžaduje, aby byl pacient po celou dobu infuze a 30 minut po ní na kontinuálním monitoru srdce, dýchání a saturace kyslíkem. Vitální funkce budou měřeny a zaznamenány před transfuzí, 15 minut po transfuzi, každou hodinu po dobu trvání infuze a na konci transfuze. RN zůstane u pacienta prvních 5 minut transfuze. Pokud jsou podávány dva transdukční produkty, druhý transdukovaný produkt bude podán bez prodlení po prvním.