Transfer genów dla choroby sierpowatokrwinkowej

Jest to otwarte, nierandomizowane, jednoośrodkowe, pilotażowe i wykonalne, jednoramienne badanie kohortowe, obejmujące pojedynczą infuzję autologicznych komórek CD34+ HSC pochodzących ze szpiku kostnego, transdukowanych wektorem lentiwirusowym zawierającym RNA o krótkiej szpilce do BCL11a. Naliczanych będzie maksymalnie 7 ocenianych pacjentów z SCD. Badanie będzie miało trzy warstwy:

1. Warstwa 1: wiek ≥18-40 lat
2. Warstwa 2: wiek ≥12-<18 lat
3. Warstwa 3: wiek ≥3-<12 lat

Aby określić wykonalność i bezpieczeństwo podawania lentiwirusowego wektora transferu genów kodującego mały RNA o strukturze spinki do włosów (sh) ukierunkowany na represor genu γ-globiny, BCL11A, pacjentom z ciężkim SCD.

Pacjenci zostaną poddani standardowym zabiegom przed autologicznym przeszczepem szpiku kostnego zgodnie z wytycznymi instytucji, a następnie zostaną poddani dwóm pobraniom szpiku kostnego w odstępie co najmniej 4 tygodni, który zostanie wykorzystany jako szpik zapasowy (minimum 2 x 106 komórek CD34+/kg mc. ) oraz do pobrania autologicznego szpiku kostnego do transferu genów.

Pacjenci będą otrzymywać transfuzje krwi przez okres 3 miesięcy przed planowaną datą wlewu produktu, w celu osiągnięcia poziomu HbS ≤ 30% do czasu transferu genu. Jeśli osobnik jest już na przewlekłym schemacie transfuzji w ramach podstawowego leczenia choroby, schemat może być kontynuowany. Terminy transfuzji będą skoordynowane tak, aby miały miejsce w ciągu 7 dni przed wszelkimi procedurami wymagającymi znieczulenia, takimi jak pobieranie szpiku kostnego.

Komórki krwiotwórcze zostaną pobrane od pacjenta przed zabiegiem, aby posłużyć jako procedura ratunkowa („przeszczep zapasowy”), w przypadku braku zaobserwowanej regeneracji krwiotwórczej po wstrzyknięciu genetycznie zmanipulowanych komórek lub w przypadku, gdy zmanipulowane komórki zawiodą aby spełnić kryteria zwolnienia. Szpik kostny (do 20 ml/kg) zostanie pobrany od pacjenta w znieczuleniu ogólnym z tylnych grzebieni biodrowych po obu stronach przez wielokrotne nakłucia co najmniej 4 tygodnie przed terapią genową. Część szpiku kostnego zawierająca co najmniej 2 x 106 komórek CD34+/kg zostanie zamrożona i przechowywana bez manipulacji zgodnie ze standardowymi procedurami klinicznymi dotyczącymi autologicznego pobrania szpiku kostnego w celu utworzenia przeszczepu zapasowego. Jeśli liczba komórek CD34+ przekraczająca 2 x 106 komórek/kg jest większa lub równa 1 x 106 komórek/kg, te nadmiarowe komórki będą przetwarzane do transdukcji, transdukowane, a następnie zamrażane. Transdukcja zostanie przeprowadzona na wybranych komórkach CD34+, a transdukowane komórki zostaną zamrożone. Jeśli komórki z pierwszego zbioru zostały transdukowane i zamrożone, te zmodyfikowane genetycznie komórki zostaną rozmrożone i przygotowane do infuzji równolegle z produktem z kolejnego zbioru (kolejnych zbiorów). W takim przypadku podawane byłyby dwa oddzielne produkty. Wszystkie procedury manipulacji komórkami i testy uwalniania zostaną przeprowadzone w zakładzie transdukcji zgodnie z Dobrą Praktyką Produkcyjną (GMP) zgodnie ze standardowymi procedurami operacyjnymi specyficznymi dla danego procesu. Do końcowego produktu leczniczego będzie dołączony Certyfikat Analizy, dokumentujący, że wszystkie testy uwalniania są kompletne i zgodne ze specyfikacją. Osobnicy otrzymają kondycjonowanie mieloablacyjne za pomocą busulfanu podawanego w dniach od -5 do -2, przed infuzją transdukowanych komórek. Komórki będą podawane we wlewie dożylnym przez 30-45 minut po standardowym uwodnieniu i premedykacji zgodnie ze standardowymi wytycznymi Jednostki Transplantacji Krwiotwórczych Komórek Macierzystych Szpitala Dziecięcego w Bostonie. Norma ta wymaga, aby pacjent przez cały czas infuzji i przez 30 minut po jej zakończeniu znajdował się pod stałym monitorem pracy serca, układu oddechowego i saturacji. Parametry życiowe będą mierzone i rejestrowane przed transfuzją, 15 minut przed transfuzją, co godzinę przez czas trwania infuzji i koniec transfuzji. RN pozostanie z pacjentem przez pierwsze 5 minut transfuzji. Jeśli podawane są dwa produkty transdukcji, drugi produkt transdukcji zostanie podany niezwłocznie po pierwszym.