Transferencia de genes para la enfermedad de células falciformes

Este es un estudio abierto, no aleatorizado, de un solo centro, piloto y de cohorte de un solo brazo que involucra una infusión única de células HSC CD34+ derivadas de médula ósea autóloga transducidas con el vector lentiviral que contiene un ARN de horquilla corta dirigido a BCL11a. La acumulación será de un máximo de 7 pacientes evaluables con SCD. El estudio tendrá tres estratos:

1. Estrato 1: edades ≥18-40
2. Estrato 2: edades ≥12-<18
3. Estrato 3: edades ≥3-<12

Determinar la viabilidad y la seguridad de administrar un vector de transferencia de genes lentivirales que codifica un ARN de horquilla pequeña (sh) dirigido al represor del gen de la globina γ, BCL11A, en pacientes con SCD grave.

Los pacientes se someterán a un estudio estándar para el trasplante autólogo de médula ósea de acuerdo con las pautas institucionales y luego se someterán a dos extracciones de médula ósea con un mínimo de 4 semanas de diferencia que se usarán como médula de respaldo (mínimo de 2 x 106 células CD34+/kg). ) y para una cosecha de médula ósea autóloga para la transferencia de genes.

Los pacientes recibirán transfusiones de sangre durante un período de 3 meses antes de la fecha prevista de infusión del producto, con el objetivo de alcanzar un nivel de HbS ≤ 30 % en el momento de la transferencia del gen. Si el sujeto ya está en un régimen de transfusión crónica como parte del tratamiento de la enfermedad de referencia, se puede continuar con el régimen. El momento de las transfusiones se coordinará para que ocurra dentro de los 7 días anteriores a cualquier procedimiento que requiera anestesia, como la extracción de médula ósea.

Se recolectarán células hematopoyéticas del paciente antes del tratamiento, para que sirvan como un procedimiento de rescate ("injerto de respaldo"), en caso de que no se observe una recuperación hematopoyética después de la inyección de células manipuladas genéticamente, o si las células manipuladas fallan. para cumplir con los criterios de liberación. Se extraerá médula ósea (hasta 20 ml/kg) del paciente bajo anestesia general de las crestas ilíacas posteriores en ambos lados mediante múltiples punciones al menos 4 semanas antes de la terapia génica. Una porción de la médula ósea que contenga al menos 2 x 106 células CD34+/kg se congelará y almacenará sin manipular de acuerdo con los procedimientos clínicos estándar para la recolección de médula ósea autóloga para constituir el injerto de respaldo. Si el número de células CD34+ que excede 2 x 106 células/kg es mayor o igual a 1 x 106 células/kg, estas células en exceso se procesarían para la transducción, se transducirían y luego se congelarían. La transducción se llevará a cabo en las células CD34+ seleccionadas y las células transducidas se crioconservarán. Si las células de la primera recolección se transdujeron y congelaron, estas células genéticamente modificadas se descongelarán y prepararán para la infusión en paralelo con el producto de la(s) recolección(es) posterior(es). En este caso, se infundirían dos productos separados. Todos los procedimientos de manipulación celular y las pruebas de liberación se realizarán en la instalación de transducción de acuerdo con las Buenas prácticas de fabricación (GMP) siguiendo los procedimientos operativos estándar específicos del proceso. El producto farmacéutico final estará acompañado por un certificado de análisis, que documenta que todas las pruebas de liberación están completas y dentro de las especificaciones. Los sujetos recibirán acondicionamiento mieloablativo con busulfano administrado los días -5 a -2, antes de la infusión de células transducidas. Las células se infundirán por vía intravenosa durante 30 a 45 minutos después de la prehidratación y premedicación estándar de acuerdo con las pautas estándar de la Unidad de Trasplante de Células Madre Hematopoyéticas del Boston Children's Hospital. Este estándar requiere que el paciente esté en un monitor cardíaco, respiratorio y de saturación de oxígeno continuo durante la infusión y durante los 30 minutos posteriores. Los signos vitales se medirán y registrarán antes de la transfusión, 15 minutos después de la transfusión, cada hora durante la duración de la infusión y al final de la transfusión. El RN permanecerá con el paciente durante los primeros 5 minutos de la transfusión. Si se administran dos productos de transducción, el segundo producto transducido se administrará inmediatamente después del primero.