Gentransfer für Sichelzellenanämie

Dies ist eine offene, nicht randomisierte, monozentrische Pilot- und Durchführbarkeits-Kohortenstudie mit einer einzelnen Infusion von autologen, aus dem Knochenmark stammenden CD34+-HSC-Zellen, die mit dem lentiviralen Vektor transduziert wurden, der eine Kurzhaarnadel-RNA enthält, die auf BCL11a abzielt. Es werden maximal 7 auswertbare Patienten mit SCD zurückgestellt. Die Studie wird drei Schichten haben:

1. Schicht 1: Alter ≥18-40
2. Schicht 2: Alter ≥12-<18
3. Schicht 3: Alter ≥3-<12

Bestimmung der Durchführbarkeit und Sicherheit der Verabreichung eines lentiviralen Gentransfervektors, der eine kleine Haarnadel (sh)-RNA kodiert, die auf den γ-Globin-Genrepressor BCL11A abzielt, bei Patienten mit schwerem SCD.

Die Patienten werden einer standardmäßigen Aufarbeitung für eine autologe Knochenmarktransplantation gemäß den institutionellen Richtlinien unterzogen und anschließend zwei Knochenmarkentnahmen im Abstand von mindestens 4 Wochen unterzogen, die für eine Ersatzmark verwendet werden (mindestens 2 x 106 CD34+ Zellen/kg ) und für eine Entnahme von autologem Knochenmark für den Gentransfer.

Die Patienten erhalten Bluttransfusionen für einen Zeitraum von 3 Monaten vor dem geplanten Datum der Produktinfusion mit dem Ziel, zum Zeitpunkt des Gentransfers einen HbS-Wert von ≤ 30 % zu erreichen. Wenn das Subjekt bereits eine chronische Transfusionsbehandlung als Teil des Grundlinien-Krankheitsmanagements erhält, kann die Behandlung fortgesetzt werden. Der Zeitpunkt der Transfusionen wird so koordiniert, dass er innerhalb von 7 Tagen vor Eingriffen erfolgt, die eine Anästhesie erfordern, wie z. B. eine Knochenmarkentnahme.

Hämatopoetische Zellen werden dem Patienten vor der Behandlung entnommen, um als Rettungsverfahren ("Ersatztransplantat") zu dienen, falls nach der Injektion genetisch manipulierter Zellen keine hämatopoetische Erholung beobachtet wird oder falls manipulierte Zellen versagen Freigabekriterien zu erfüllen. Mindestens 4 Wochen vor der Gentherapie wird dem Patienten Knochenmark (bis zu 20 ml/kg) unter Vollnarkose aus den hinteren Beckenkämmen auf beiden Seiten durch mehrere Punktionen entnommen. Ein Teil des Knochenmarks, der mindestens 2 x 106 CD34+-Zellen/kg enthält, wird eingefroren und unmanipuliert gemäß den klinischen Standardverfahren für die autologe Knochenmarkentnahme gelagert, um das Ersatztransplantat zu bilden. Wenn die Zahl der CD34+-Zellen, die 2 x 106 Zellen/kg überschreitet, größer oder gleich 1 x 106 Zellen/kg ist, werden diese überschüssigen Zellen für die Transduktion verarbeitet, transduziert und dann eingefroren. Die Transduktion wird an den ausgewählten CD34+-Zellen durchgeführt und die transduzierten Zellen werden kryokonserviert. Wenn Zellen aus der ersten Ernte transduziert und eingefroren wurden, werden diese genmodifizierten Zellen aufgetaut und parallel mit dem Produkt aus der/den nachfolgenden Ernte(n) für die Infusion vorbereitet. In diesem Fall würden zwei getrennte Produkte infundiert. Alle Zellmanipulationsverfahren und Freisetzungstests werden in der Transduktionseinrichtung gemäß der Guten Herstellungspraxis (GMP) nach prozessspezifischen Standardarbeitsanweisungen durchgeführt. Dem endgültigen Arzneimittelprodukt wird ein Analysezertifikat beigefügt, das dokumentiert, dass alle Freigabetests vollständig sind und den Spezifikationen entsprechen. Die Probanden erhalten eine myeloablative Konditionierung mit Busulfan, das an den Tagen -5 bis -2 vor der Infusion transduzierter Zellen verabreicht wird. Die Zellen werden intravenös über 30-45 Minuten nach der Standardprähydratation und Prämedikation gemäß den Standardrichtlinien der Boston Children's Hospital Hematopoetic Stem Cell Transplantation Unit infundiert. Dieser Standard erfordert, dass der Patient während der Infusion und für 30 Minuten danach kontinuierlich Herz, Atmung und Sauerstoffsättigung überwacht. Die Vitalfunktionen werden vor der Transfusion, 15 Minuten nach Beginn der Transfusion, stündlich für die Dauer der Infusion und am Ende der Transfusion gemessen und aufgezeichnet. Der RN bleibt die ersten 5 Minuten der Transfusion beim Patienten. Wenn zwei Transduktionsprodukte verabreicht werden, wird das zweite Transduktionsprodukt unverzüglich nach dem ersten verabreicht.