Genoverdracht voor sikkelcelziekte

Dit is een open-label, niet-gerandomiseerde, single-center, pilot- en haalbaarheids-, eenarmige cohortstudie met een enkele infusie van autologe beenmerg-afgeleide CD34+ HSC-cellen getransduceerd met de lentivirale vector die een korte-haarspeld-RNA gericht op BCL11a bevat. De opbouw is maximaal 7 evalueerbare patiënten met SCD. De studie zal drie lagen hebben:

1. Stratum 1: leeftijden ≥18-40
2. Stratum 2: leeftijden ≥12-<18
3. Stratum 3: leeftijden ≥3-<12

Om de haalbaarheid en veiligheid te bepalen van het toedienen van een lentivirale genoverdrachtsvector die codeert voor een klein haarspeld (sh) RNA gericht op de γ-globine-genrepressor, BCL11A, bij patiënten met ernstige SCD.

Patiënten ondergaan standaard opwerking voor autologe beenmergtransplantatie volgens de richtlijnen van de instelling en ondergaan vervolgens twee beenmergoogsten met een tussenpoos van minimaal 4 weken die zullen worden gebruikt voor een back-up merg (minimaal 2 x 106 CD34+-cellen/kg ) en voor een oogst van autoloog beenmerg voor genoverdracht.

Patiënten zullen bloedtransfusies krijgen gedurende een periode van 3 maanden voorafgaand aan de geplande datum van productinfusie, met als doel een HbS-niveau ≤ 30% te bereiken op het moment van genoverdracht. Als de proefpersoon al een chronisch transfusieregime volgt als onderdeel van de basisbehandeling van de ziekte, kan het regime worden voortgezet. De timing van transfusies zal worden gecoördineerd om plaats te vinden binnen 7 dagen voorafgaand aan procedures die anesthesie vereisen, zoals beenmergoogst.

Hematopoëtische cellen zullen voorafgaand aan de behandeling bij de patiënt worden verzameld om te dienen als een bergingsprocedure ("back-up graft"), mocht er geen hematopoëtisch herstel worden waargenomen na de injectie van genetisch gemanipuleerde cellen, of mochten gemanipuleerde cellen falen om aan de vrijgavecriteria te voldoen. Beenmerg (tot 20 ml/kg) zal bij de patiënt onder algemene anesthesie worden geoogst van de achterste iliacale toppen aan beide zijden door middel van meerdere puncties, minimaal 4 weken voorafgaand aan gentherapie. Een deel van het beenmerg dat ten minste 2 x 106 CD34+-cellen/kg bevat, zal worden ingevroren en ongemanipuleerd worden bewaard volgens standaard klinische procedures voor autologe beenmergverzameling om het back-uptransplantaat te vormen. Als het aantal CD34+-cellen dat 2 x 106 cellen/kg overschrijdt, groter is dan of gelijk is aan 1 x 106 cellen/kg, worden deze overtollige cellen verwerkt voor transductie, getransduceerd en vervolgens ingevroren. Transductie zal worden uitgevoerd op de geselecteerde CD34+-cellen en getransduceerde cellen zullen worden gecryopreserveerd. Als cellen van de eerste oogst zijn getransduceerd en ingevroren, worden deze gen-gemodificeerde cellen ontdooid en voorbereid voor infusie parallel met het product van de volgende oogst(en). In dit geval zouden twee afzonderlijke producten worden toegediend. Alle celmanipulatieprocedures en vrijgavetesten zullen worden uitgevoerd in de transductiefaciliteit in overeenstemming met Good Manufacturing Practice (GMP) volgens processpecifieke standaardwerkwijzen. Het uiteindelijke geneesmiddel wordt vergezeld van een analysecertificaat, waarin wordt gedocumenteerd dat alle vrijgavetesten volledig en binnen de specificaties zijn uitgevoerd. Proefpersonen zullen myeloablatieve conditionering krijgen met Busulfan toegediend op dag -5 tot -2, voorafgaand aan infusie van getransduceerde cellen. Cellen zullen intraveneus worden toegediend gedurende 30-45 minuten na standaard prehydratatie en premedicatie volgens de standaardrichtlijnen van de hematopoietische stamceltransplantatie-eenheid van Boston Children's Hospital. Deze norm vereist dat de patiënt gedurende de hele infusie en gedurende 30 minuten daarna continu wordt gecontroleerd op het hart, de ademhaling en de zuurstofsaturatie. Vitale functies worden gemeten en geregistreerd vóór de transfusie, 15 minuten na de transfusie, elk uur voor de duur van de infusie en het einde van de transfusie. De RN blijft de eerste 5 minuten van de transfusie bij de patiënt. Als er twee transductieproducten worden toegediend, wordt het tweede getransduceerde product onmiddellijk na het eerste toegediend.