Géntranszfer a sarlósejtes betegségre

Ez egy nyílt elrendezésű, nem randomizált, egyközpontú, kísérleti és megvalósíthatósági, egykarú kohorszvizsgálat, amely autológ csontvelőből származó CD34+ HSC-sejtek egyszeri infúzióját foglalja magában, amelyeket a BCL11a-t megcélzó, rövid hajtűs RNS-t tartalmazó lentivírus vektorral transzdukáltak. Az elhatárolás legfeljebb 7 értékelhető SCD-s beteget jelent. A tanulmány három rétegből áll majd:

1. 1. réteg: életkor ≥18-40
2. 2. réteg: életkor ≥12-<18
3. 3. réteg: életkor ≥3-<12

A γ-globin génrepresszort, a BCL11A-t célzó kis hajtű (sh) RNS-t kódoló lentivírus géntranszfer vektor beadásának megvalósíthatóságának és biztonságosságának meghatározása súlyos SCD-ben szenvedő betegeknél.

A betegek autológ csontvelő-transzplantációra az intézményi irányelveknek megfelelően standard feldolgozáson esnek át, majd két csontvelő-begyűjtésen esnek át legalább 4 hetes időközzel, amelyeket tartalék velőként használnak fel (legalább 2 x 106 CD34+ sejt/kg). ) és autológ csontvelő gyűjtésére a génátvitelhez.

A betegek a termékinfúzió tervezett időpontja előtt 3 hónapig kapnak vérátömlesztést azzal a céllal, hogy a géntranszfer időpontjára ≤ 30%-os HbS-szintet érjenek el. Ha az alany a betegség kiindulási kezelésének részeként már krónikus transzfúziós kezelés alatt áll, a kezelési rend folytatható. A transzfúziók időpontját úgy kell összehangolni, hogy az érzéstelenítést igénylő eljárások, például a csontvelő begyűjtése előtt 7 nappal történjen.

A kezelés előtt vérképző sejteket gyűjtenek a pácienstől, hogy mentési eljárásként („back-up graft”) szolgáljanak, ha a genetikailag manipulált sejtek injektálását követően nem figyelhető meg hematopoietikus gyógyulás, vagy ha a manipulált sejtek nem működnek. hogy megfeleljen a kiadási kritériumoknak. A csontvelőt (legfeljebb 20 ml/kg-ig) gyűjtik be a páciensből általános érzéstelenítésben a hátsó csípőtarajból mindkét oldalon többszöri szúrással, legalább 4 héttel a génterápia előtt. A csontvelőnek legalább 2 x 106 CD34+ sejtet/kg-ot tartalmazó részét lefagyasztjuk, és manipuláció nélkül tároljuk az autológ csontvelő-gyűjtés standard klinikai eljárásainak megfelelően, hogy létrehozzuk a tartalék graftot. Ha a CD34+ sejtek száma, amely meghaladja a 2 x 106 sejt/kg-ot, nagyobb vagy egyenlő, mint 1 x 106 sejt/kg, ezeket a felesleges sejteket transzdukció céljából feldolgozzák, transzdukálják, majd lefagyasztják. A transzdukciót a kiválasztott CD34+ sejteken hajtjuk végre, és a transzdukált sejteket mélyhűtve tartósítjuk. Ha az első betakarításból származó sejteket transzdukálták és lefagyasztották, ezeket a génmódosított sejteket a következő betakarítás(ok)ból származó termékkel párhuzamosan felolvasztják és infúzióra készítik elő. Ebben az esetben két különálló terméket kell beadni. Minden sejtmanipulációs eljárást és kibocsátási tesztet a transzdukciós létesítményben kell végrehajtani a Good Manufacturing Practice (GMP) szerint, folyamatspecifikus szabványos működési eljárásokat követve. A végső gyógyszerterméket egy analitikai bizonyítvány kíséri, amely dokumentálja, hogy az összes felszabadulási vizsgálat befejeződött és a specifikáción belül van. Az alanyok mieloablatív kondicionálást kapnak buszulfánnal a -5. és -2. napon, a transzdukált sejtek infúziója előtt. A sejteket intravénásan adják be 30-45 percen belül a standard előhidráció és premedikáció után a Boston Children's Hospital Hematopoietic Stem Cell Transplantation Unit standard irányelvei szerint. Ez a szabvány előírja, hogy a betegnek folyamatos szív-, légzés- és oxigénszaturációs monitoron kell lennie az infúzió alatt, majd 30 percig azt követően. Az életjeleket mérik és rögzítik a transzfúzió előtt, 15 perccel a transzfúzió után, óránként az infúzió időtartama és a transzfúzió végén. Az RN a páciensnél marad a transzfúzió első 5 percében. Ha két transzdukciós terméket adnak be, a második transzdukált terméket az első után haladéktalanul beadják.