Transferência de genes para doença falciforme

Este é um estudo de coorte de braço único, aberto, não randomizado, de centro único, piloto e viabilidade, envolvendo uma única infusão de células CD34+ HSC derivadas de medula óssea autólogas transduzidas com o vetor lentiviral contendo um RNA de grampo curto direcionado a BCL11a. O acúmulo será de no máximo 7 pacientes avaliáveis ​​com SCD. O estudo terá três estratos:

1. Estrato 1: idades ≥18-40
2. Estrato 2: idades ≥12-<18
3. Estrato 3: idades ≥3-<12

Determinar a viabilidade e a segurança da administração de um vetor de transferência de genes lentivirais que codifica um pequeno RNA hairpin (sh) direcionado ao repressor do gene γ-globina, BCL11A, em pacientes com SCD grave.

Os pacientes serão submetidos a investigação padrão para transplante autólogo de medula óssea de acordo com as diretrizes institucionais e, em seguida, serão submetidos a duas coletas de medula óssea com um intervalo mínimo de 4 semanas, que serão usadas para uma medula de reserva (mínimo de 2 x 106 células CD34+/kg ) e para uma colheita de medula óssea autóloga para transferência de genes.

Os pacientes receberão transfusões de sangue por um período de 3 meses antes da data planejada de infusão do produto, com o objetivo de atingir um nível de HbS ≤ 30% no momento da transferência do gene. Se o sujeito já estiver em um regime de transfusão crônica como parte do manejo da doença de base, o regime pode ser continuado. O momento das transfusões será coordenado para ocorrer dentro de 7 dias antes de quaisquer procedimentos que requeiram anestesia, como colheita de medula óssea.

Células hematopoiéticas serão coletadas do paciente antes do tratamento, para servir como um procedimento de resgate ("enxerto de backup"), caso não haja recuperação hematopoiética observada após a injeção de células geneticamente manipuladas, ou caso as células manipuladas falhem para atender aos critérios de lançamento. A medula óssea (até 20 mL/kg) será colhida do paciente sob anestesia geral das cristas ilíacas posteriores em ambos os lados por punções múltiplas no mínimo 4 semanas antes da terapia genética. Uma porção da medula óssea contendo pelo menos 2 x 106 células CD34+/kg será congelada e armazenada sem manipulação de acordo com os procedimentos clínicos padrão para coleta de medula óssea autóloga para constituir o enxerto de reserva. Se o número de células CD34+ que excede 2 x 106 células/kg for maior ou igual a 1 x 106 células/kg, essas células em excesso seriam processadas para transdução, transduzidas e depois congeladas. A transdução será realizada nas células CD34+ selecionadas e as células transduzidas serão criopreservadas. Se as células da primeira colheita foram transduzidas e congeladas, essas células modificadas por genes serão descongeladas e preparadas para infusão em paralelo com o produto da(s) colheita(s) subsequente(s). Neste caso, dois produtos separados seriam infundidos. Todos os procedimentos de manipulação de células e testes de liberação serão realizados na instalação de transdução de acordo com as Boas Práticas de Fabricação (GMP) seguindo os procedimentos operacionais padrão específicos do processo. O Medicamento Final será acompanhado de um Certificado de Análise, documentando que todos os testes de liberação estão completos e dentro das especificações. Os indivíduos receberão condicionamento mieloablativo com busulfan administrado nos dias -5 a -2, antes da infusão de células transduzidas. As células serão infundidas por via intravenosa durante 30-45 minutos após a pré-hidratação e pré-medicação padrão, de acordo com as diretrizes padrão da Unidade de Transplante de Células Tronco Hematopoiéticas do Hospital Infantil de Boston. Este padrão exige que o paciente esteja em monitoramento cardíaco, respiratório e de saturação de oxigênio contínuo durante toda a infusão e por 30 minutos após. Os sinais vitais serão medidos e registrados antes da transfusão, 15 minutos após a transfusão, a cada hora durante a infusão e no final da transfusão. O RN ficará com o paciente durante os primeiros 5 minutos da transfusão. Se forem administrados dois produtos de transdução, o segundo produto transduzido será administrado imediatamente após o primeiro.