Biomarkkerit polyradikuloneuropatioissa (BIP)

Tausta: Tulehdukselliset demyelinisoivat polyradikuloneuropatiat ovat harvinaisia ​​vammauttavia autoimmuunisairauksia, jotka vaikuttavat ääreishermostoon. Nämä neuropatiat voivat olla akuutteja, kun merkit ja oireet ilmaantuvat alle kuukaudessa (Guillain-Barrén oireyhtymä, GBS), tai kroonisia, kun paheneminen jatkuu yli 2 kuukautta sen alkamisesta (CIDP). Noin puolella GBS-potilaista on IgG1- tai IgG3-anti-gangliosidivasta-aineita. Gangliosidit ovat glykolipidirakenteita, jotka sijaitsevat pääasiassa solmu- ja paranodialueilla. CIDP-potilailla IgG4-autovasta-aineita, jotka on suunnattu solmuperäisiä (Nfasc-186) tai paranoodaalisia (Nfasc-155, CNTN1, Caspr-1) proteiineja vastaan, löytyy 5-10 %:ssa. Useimmilla GBS- ja CIDP-potilailla antigeeninen kohde on tuntematon ja kliiniset biomarkkerit puuttuvat kriittisesti diagnoosin ja hoidon suuntaamisen helpottamiseksi. Tämän tutkimuksen tavoitteena on tunnistaa uusia biomarkkereita AIDS- ja CIDP-potilailla.

Menetelmät: Tutkijat suorittavat kansallisen retrospektiivisen ja prospektiivisen tutkimuksen tunnistaakseen uusia antigeenikohteita GBS- ja CIDP-potilailla. Montpellierin neurotieteiden instituutti ja Montpellierin yliopistolliset sairaalat ovat keränneet vuodesta 2015 lähtien kliinisiä, immulogisia, elektrofysiologisia ja histologisia tietoja GBS- ja CIDP-potilaista. Jokainen potilas, jonka seerumi on jo kerätty, antoi kirjallisen suostumuksen. GBS ja CIDP diagnosoidaan nykyisten kriteerien mukaan. Anti-gangliosidivasta-aineet (immunodot-blotilla) ja anti-Nfasc155-, -CNTN1-, -Nfasc186- ja -Caspr-1-vasta-aineet (ELISA:lla ja solusitoutumismäärityksellä) arvioidaan GBS- ja CIDP-potilailla, vastaavasti. Monoklonaalista gammapatiaa sairastavien CIDP-potilaiden joukosta suljetaan pois ne, joilla on anti-MAG-vasta-aineita, lisääntyvä VEGF, AL-amyloidoosi ja neurolymfomatoosi. Potilaiden seerumi testataan myös immunohistokemiallisella värjäyksellä villityypin ja GalNacT -/- hiiren iskiashermosäikeistä.

Kliinisiä ja elektrofysiologisia fenotyyppejä verrataan potilaiden välillä, joilla on positiivinen ja negatiivinen immunovärjäys. Värjäyksen lokalisointi (esim. Ranvierin solmu, paranodaalinen alue ja/tai myeliinivaippa), koska autovasta-aineen alaluokka ja isotyyppi määritellään.

Uuden antigeenisen kohteen etsintä suoritetaan GBS- ja CIDP-potilailla, jotka ovat i) seronegatiivisia antigangliosidi- ja anti-Nfasc155-, -CNTN1-, -Nfasc186- ja -Caspr-1-vasta-aineille ja joilla on ii) positiivinen immunovärjäys villi- tyyppi ja GalNacT-/- hiiren iskiashermosäikeet. Sitten näiden valittujen potilaiden seerumeita inkuboidaan hermosolujen ja gliasolujen kanssa viljelmässä (selkärangan selkähermosolut, motoneuronit, Schwann-solut, oligodendrosyytit ja neokortikaaliset neuronit). Jos positiivisuus on soluviljelmää vastaan, suoritetaan immunosaostus ja antigeeni/vasta-ainekompleksi erotetaan SDS-PAGE 4-12 % -geelillä ja elektroforeettiset vyöhykkeet analysoidaan massaspektrometrialla.

Tämän tutkimuksen tavoitteena on tunnistaa uusia antigeenikohteita seronegatiivisilla GBS- ja CIDP-potilailla, joilla on immunoreaktiivisuus. Näiden uusien kohteiden tuntemus voi parantaa diagnostiikkatyökalujamme ja auttaa kehittämään kohdennettuja hoitoja.