Biomarkører i polyradiculoneuropatier (BIP)

Baggrund: Inflammatoriske demyeliniserende polyradiculoneuropatier er sjældne invaliderende autoimmune sygdomme, der påvirker det perifere nervesystem. Disse neuropatier kan være akutte, når tegn og symptomer stiger på mindre end 1 måned (Guillain-Barré syndrom, GBS), eller kroniske, når forværringerne fortsætter over mere end 2 måneder fra debut (CIDP). Omkring halvdelen af ​​GBS-patienter har IgG1- eller IgG3-anti-gangliosider-antistoffer. Gangliosider er glykolipidiske strukturer hovedsageligt lokaliseret ved knude- og paranodeområderne. Hos CIDP-patienter findes IgG4-autoantistoffer rettet mod nodale (Nfasc-186) eller paranodale (Nfasc-155, CNTN1, Caspre-1) proteiner hos 5 til 10 %. Hos de fleste GBS- og CIDP-patienter er det antigene mål ukendt, og kliniske biomarkører mangler kritisk til at hjælpe diagnosticering og behandlingsorientering. Formålet med denne undersøgelse er at identificere nye biomarkører i AIDP- og CIDP-patienter.

Metoder: Efterforskerne udfører en national retrospektiv og prospektiv undersøgelse for at identificere nye antigene mål hos GBS- og CIDP-patienter. Siden 2015 har Institut for Neurovidenskab i Montpellier og universitetshospitalerne i Montpellier indsamlet kliniske, immunologiske, elektrofysiologiske og histologiske data om GBS- og CIDP-patienter. Hver patient, hvis serum allerede er blevet indsamlet, gav skriftligt informeret samtykke. GBS og CIDP diagnosticeres efter de nuværende kriterier. Anti-gangliosider-antistoffer (ved immunodot-blot) og anti-Nfasc155-, -CNTN1-, -Nfasc186- og -Caspr-1-antistoffer (ved ELISA og cellebindingsassay) vurderes i henholdsvis GBS- og CIDP-patienter. Blandt CIDP-patienter med monoklonal gammapati er dem, der præsenterer anti-MAG-antistoffer, øget VEGF, AL-amyloidose og neurolymfomatose udelukket. Patienternes serum testes også ved immunhistokemisk farvning på vildtype- og GalNacT -/- muse-iskiasnervefibre.

Kliniske og elektrofysiologiske fænotyper sammenlignes mellem patienter med positiv og negativ immunfarvning. Lokalisering af farvningen (dvs. knude af Ranvier, paranodal region og/eller myelinskede) som underklassen og isotypen af ​​autoantistoffet er specificeret.

Søgningen efter et nyt antigent mål udføres hos GBS- og CIDP-patienter, som er i) seronegative for antigangliosid- og anti-Nfasc155-, -CNTN1-, -Nfasc186- og -Caspr-1-antistoffer og præsenterer ii) en postiv immunfarvning på vild- type og GalNacT-/- muse iskiasnervefibre. Derefter inkuberes serum fra disse udvalgte patienter med neuronale og gliaceller i kultur (spinal dorsale ganglier, motoneuroner, Schwann-celler, oligodendrocytter og neokortikale neuroner). I tilfælde af positivitet mod cellekultur udføres en immunpræcipitation og antigen/antistof-komplekset separeres på SDS-PAGE 4-12% gel og elektroforetiske bånd analyseres ved massespektrometri.

Formålet med denne undersøgelse er at identificere nye antigene mål hos seronegative GBS- og CIDP-patienter, der udviser immunreaktivitet. Kendskabet til disse nye mål kan forbedre vores diagnostiske værktøjer og kan hjælpe med at udvikle målrettede terapier.