Biomarkörer i polyradikuloneuropatier (BIP)

Bakgrund: Inflammatoriska demyeliniserande polyradikuloneuropatier är sällsynta invalidiserande autoimmuna sjukdomar som påverkar det perifera nervsystemet. Dessa neuropatier kan vara akuta när tecken och symtom ökar på mindre än 1 månad (Guillain-Barrés syndrom, GBS), eller kroniska när försämringen fortsätter över mer än 2 månader från debut (CIDP). Ungefär hälften av GBS-patienterna uppvisar IgG1- eller IgG3-anti-gangliosiderantikroppar. Gangliosider är glykolipidiska strukturer huvudsakligen lokaliserade vid nod- och paranodområdena. Hos CIDP-patienter finns IgG4-autoantikroppar riktade mot nodala (Nfasc-186) eller paranodala (Nfasc-155, CNTN1, Caspr-1) proteiner hos 5 till 10 %. Hos de flesta GBS- och CIDP-patienter är det antigena målet okänt och kliniska biomarkörer saknas kritiskt för att hjälpa diagnos och behandlingsorientering. Syftet med denna studie är att identifiera nya biomarkörer hos AIDP- och CIDP-patienter.

Metoder: Utredarna genomför en nationell retrospektiv och prospektiv studie för att identifiera nya antigena mål hos GBS- och CIDP-patienter. Sedan 2015 samlar Institutet för neurovetenskap i Montpellier och universitetssjukhusen i Montpellier in kliniska, immulologiska, elektrofysiologiska och histologiska data från GBS- och CIDP-patienter. Varje patient vars serum redan har samlats in gav skriftligt informerat samtycke. GBS och CIDP diagnostiseras enligt gällande kriterier. Anti-gangliosider-antikroppar (genom immunodot-blot) och anti-Nfasc155-, -CNTN1-, -Nfasc186- och -Caspr-1-antikroppar (genom ELISA och cellbindningsanalys) utvärderas i GBS- respektive CIDP-patienter. Bland CIDP-patienter med monoklonal gammapati är de som uppvisar anti-MAG-antikroppar, ökande VEGF, AL-amyloidos och neurolymfomatos uteslutna. Patienternas serum testas också genom immunhistokemisk färgning på vildtyp och GalNacT -/- ischiasnervfibrer från mus.

Kliniska och elektrofysiologiska fenotyper jämförs mellan patienter med positiv och negativ immunfärgning. Lokalisering av färgningen (dvs. nod av Ranvier, paranodal region och/eller myelinskida) som underklass och isotyp av autoantikroppen specificeras.

Sökandet efter ett nytt antigent mål utförs hos GBS- och CIDP-patienter som är i) seronegativa för antigangliosid- och anti-Nfasc155-, -CNTN1-, -Nfasc186- och -Caspr-1-antikroppar, och som uppvisar ii) en positiv immunfärgning på vild- typ och GalNacT-/- mus ischiasnervfibrer. Därefter inkuberas serum från dessa utvalda patienter med neuronala och gliaceller i odling (spinal dorsala ganglier, motoneuroner, Schwann-celler, oligodendrocyter och neokortikala neuroner). Vid positivitet mot cellodling utförs en immunoutfällning och antigen/antikroppskomplexet separeras på SDS-PAGE 4-12% gel och elektroforetiska band analyseras med masspektrometri.

Syftet med denna studie är att identifiera nya antigena mål hos seronegativa GBS- och CIDP-patienter som uppvisar immunreaktivitet. Kunskapen om dessa nya mål kan förbättra våra diagnostiska verktyg och kan hjälpa till att utveckla riktade terapier.