Biomarcadores en Polirradiculoneuropatías (BIP)

Antecedentes: Las polirradiculoneuropatías desmielinizantes inflamatorias son enfermedades autoinmunes incapacitantes raras que afectan al sistema nervioso periférico. Estas neuropatías pueden ser agudas, cuando los signos y síntomas aumentan en menos de 1 mes (síndrome de Guillain-Barré, GBS), o crónicas, cuando el deterioro continúa durante más de 2 meses desde el inicio (CIDP). Aproximadamente la mitad de los pacientes con SGB presentan anticuerpos antigangliósidos IgG1 o IgG3. Los gangliósidos son estructuras glicolipídicas que se localizan principalmente en las áreas nodal y paranodal. En pacientes con CIDP, los autoanticuerpos IgG4 dirigidos contra proteínas nodales (Nfasc-186) o paranodales (Nfasc-155, CNTN1, Caspr-1) se encuentran en 5 a 10 %. En la mayoría de los pacientes con GBS y CIDP, se desconoce el objetivo antigénico y se carece críticamente de biomarcadores clínicos para ayudar al diagnóstico y la orientación del tratamiento. El objetivo del presente estudio es identificar nuevos biomarcadores en pacientes con AIDP y CIDP.

Métodos: Los investigadores llevan a cabo un estudio prospectivo y retrospectivo nacional para identificar nuevos objetivos antigénicos en pacientes con GBS y CIDP. Desde 2015, el Instituto de Neurociencias de Montpellier y los Hospitales Universitarios de Montpellier recopilan datos clínicos, inmunológicos, electrofisiológicos e histológicos de pacientes con SGB y CIDP. Cada paciente cuyo suero ya ha sido recolectado dio su consentimiento informado por escrito. GBS y CIDP se diagnostican de acuerdo con los criterios actuales. Los anticuerpos antigangliósidos (mediante inmunotransferencia) y los anticuerpos anti-Nfasc155, -CNTN1, -Nfasc186 y -Caspr-1 (mediante ELISA y ensayo de unión celular) se evalúan en pacientes con GBS y CIDP, respectivamente. Entre los pacientes con CIDP con gammapatía monoclonal, se excluyen aquellos que presentan anticuerpos anti-MAG, aumento de VEGF, amiloidosis AL y neurolinfomatosis. El suero de los pacientes también se analiza mediante tinción inmunohistoquímica en fibras nerviosas ciáticas de ratón de tipo salvaje y GalNacT -/-.

Se comparan los fenotipos clínicos y electrofisiológicos entre pacientes con inmunotinción positiva y negativa. Localización de la tinción (es decir, nódulo de Ranvier, región paranodal y/o vaina de mielina) como se especifica la subclase y el isotipo del autoanticuerpo.

La búsqueda de una nueva diana antigénica se realiza en pacientes con SGB y CIDP que son i) seronegativos para anticuerpos antigangliósido y anti-Nfasc155, -CNTN1, -Nfasc186 y -Caspr-1, y que presentan ii) una inmunotinción positiva en wild- tipo y GalNacT-/- fibras nerviosas ciáticas de ratón. Luego, los sueros de estos pacientes seleccionados se incuban con células neuronales y gliales en cultivo (ganglios espinales dorsales, motoneuronas, células de Schwann, oligodendrocitos y neuronas neocorticales). En caso de positividad frente a cultivo celular, se realiza una inmunoprecipitación y se separa el complejo antígeno/anticuerpo en gel SDS-PAGE 4-12% y se analizan las bandas electroforéticas por espectrometría de masas.

El objetivo de este estudio es identificar nuevos objetivos antigénicos en pacientes con SGB y CIDP seronegativos que muestren inmunorreactividad. El conocimiento de estos nuevos objetivos puede mejorar nuestras herramientas de diagnóstico y podría ayudar a desarrollar terapias dirigidas.