Biomarkers bij polyradiculoneuropathieën (BIP)

Achtergrond: Inflammatoire demyeliniserende polyradiculoneuropathieën zijn zeldzame invaliderende auto-immuunziekten die het perifere zenuwstelsel aantasten. Deze neuropathieën kunnen acuut zijn, wanneer de tekenen en symptomen in minder dan 1 maand toenemen (Guillain-Barré-syndroom, GBS), of chronisch, wanneer de verslechtering langer dan 2 maanden na aanvang aanhoudt (CIDP). Ongeveer de helft van de GBS-patiënten presenteert zich met IgG1- of IgG3-anti-gangliosiden-antilichamen. Gangliosiden zijn glycolipidenstructuren die voornamelijk gelokaliseerd zijn in de knooppunt- en paranodegebieden. Bij CIDP-patiënten worden IgG4-auto-antilichamen gericht tegen nodale (Nfasc-186) of paranodale (Nfasc-155, CNTN1, Caspr-1) eiwitten aangetroffen in 5 tot 10%. Bij de meeste GBS- en CIDP-patiënten is het antigene doelwit onbekend en klinische biomarkers ontbreken kritisch om de diagnose en behandelingsoriëntatie te helpen. Het doel van de huidige studie is om nieuwe biomarkers te identificeren bij AIDP- en CIDP-patiënten.

Methoden: De onderzoekers voeren een nationale retrospectieve en prospectieve studie uit om nieuwe antigene doelwitten te identificeren bij GBS- en CIDP-patiënten. Sinds 2015 verzamelen het Instituut voor Neurowetenschappen van Montpellier en de Universitaire Ziekenhuizen van Montpellier klinische, immunologische, elektrofysiologische en histologische gegevens van GBS- en CIDP-patiënten. Elke patiënt wiens serum al is verzameld, heeft schriftelijke geïnformeerde toestemming gegeven. GBS en CIDP worden gediagnosticeerd volgens de huidige criteria. Anti-gangliosiden-antilichamen (door immunodot-blot) en anti-Nfasc155-, -CNTN1-, -Nfasc186- en -Caspr-1-antilichamen (door ELISA en celbindingstest) worden beoordeeld bij respectievelijk GBS- en CIDP-patiënten. Onder CIDP-patiënten met monoklonale gammapathie zijn degenen met anti-MAG-antilichamen, toenemende VEGF, AL-amyloïdose en neurolymfomatose uitgesloten. Serum van patiënten wordt ook getest door immunohistochemische kleuring op heupzenuwvezels van het wildtype en GalNacT -/- muis.

Klinische en elektrofysiologische fenotypes worden vergeleken tussen patiënten met positieve en negatieve immunokleuring. Lokalisatie van de kleuring (d.w.z. knoop van Ranvier, paranodale regio en/of myelineschede) als de subklasse en het isotype van het auto-antilichaam worden gespecificeerd.

De zoektocht naar een nieuw antigeen doelwit wordt uitgevoerd bij GBS- en CIDP-patiënten die i) seronegatieven zijn voor antiganglioside en anti-Nfasc155-, -CNTN1-, -Nfasc186- en -Caspr-1-antilichamen, en ii) een positieve immunokleuring vertonen op wild- type en GalNacT-/- heupzenuwvezels van de muis. Vervolgens worden serums van deze geselecteerde patiënten geïncubeerd met neuronale en gliale cellen in kweek (spinale dorsale ganglia, motoneuronen, Schwann-cellen, oligodendrocyten en neocorticale neuronen). In het geval van positiviteit tegen celkweek, wordt een immunoprecipitatie uitgevoerd en wordt het antigeen/antilichaamcomplex gescheiden op SDS-PAGE 4-12% gel en worden elektroforetische banden geanalyseerd met massaspectrometrie.

Het doel van deze studie is om nieuwe antigene doelwitten te identificeren bij seronegatieve GBS- en CIDP-patiënten die immunoreactiviteit vertonen. De kennis van deze nieuwe doelen kan onze diagnostische hulpmiddelen verbeteren en kan helpen bij het ontwikkelen van gerichte therapieën.