Biomarkører i polyradiculoneuropatier (BIP)

Bakgrunn: Inflammatoriske demyeliniserende polyradiculoneuropatier er sjeldne invalidiserende autoimmune sykdommer som påvirker det perifere nervesystemet. Disse nevropatiene kan være akutte når tegn og symptomer øker på mindre enn 1 måned (Guillain-Barré syndrom, GBS), eller kroniske når forverringen fortsetter over mer enn 2 måneder fra debut (CIDP). Omtrent halvparten av GBS-pasienter har IgG1- eller IgG3-anti-gangliosider-antistoffer. Gangliosider er glykolipidiske strukturer hovedsakelig lokalisert ved node- og paranodeområdene. Hos CIDP-pasienter finnes IgG4-autoantistoffer rettet mot nodale (Nfasc-186) eller paranodale (Nfasc-155, CNTN1, Caspre-1) proteiner hos 5 til 10 %. Hos de fleste GBS- og CIDP-pasienter er det antigene målet ukjent, og kliniske biomarkører mangler kritisk for å hjelpe diagnose og behandlingsorientering. Målet med denne studien er å identifisere nye biomarkører hos AIDP- og CIDP-pasienter.

Metoder: Etterforskerne gjennomfører en nasjonal retrospektiv og prospektiv studie for å identifisere nye antigene mål hos GBS- og CIDP-pasienter. Siden 2015 har Institutt for nevrovitenskap i Montpellier og universitetssykehusene i Montpellier samlet inn kliniske, immulologiske, elektrofysiologiske og histologiske data fra GBS- og CIDP-pasienter. Hver pasient hvis serum allerede er samlet inn ga skriftlig informert samtykke. GBS og CIDP er diagnostisert i henhold til gjeldende kriterier. Anti-gangliosider antistoffer (ved immunodot-blot) og anti-Nfasc155, -CNTN1, -Nfasc186 og -Caspr-1 antistoffer (ved ELISA og cellebindingsanalyse) vurderes i henholdsvis GBS og CIDP pasienter. Blant CIDP-pasienter med monoklonal gammapati er de som har anti-MAG-antistoffer, økende VEGF, AL-amyloidose og neurolymfomatose ekskludert. Pasientens serum blir også testet ved immunhistokjemisk farging på villtype og GalNacT -/- museisjiasnervefibre.

Kliniske og elektrofysiologiske fenotyper sammenlignes mellom pasienter med positiv og negativ immunfarging. Lokalisering av fargingen (dvs. node av Ranvier, paranodal region og/eller myelinskjede) som underklassen og isotypen til autoantistoffet er spesifisert.

Søket etter et nytt antigent mål utføres hos GBS- og CIDP-pasienter som er i) seronegative for antigangliosid og anti-Nfasc155, -CNTN1, -Nfasc186 og -Caspr-1 antistoffer, og som presenterer med ii) en postiv immunfarging på vill- type og GalNacT-/- mus isjiasnervefibre. Deretter inkuberes serum fra disse utvalgte pasientene med nevron- og gliaceller i kultur (spinal dorsale ganglier, motoneuroner, Schwann-celler, oligodendrocytter og neokortikale nevroner). Ved positivitet mot cellekultur utføres en immunutfelling og antigen/antistoffkomplekset separeres på SDS-PAGE 4-12% gel og elektroforetiske bånd analyseres ved massespektrometri.

Målet med denne studien er å identifisere nye antigene mål hos seronegative GBS- og CIDP-pasienter som viser immunreaktivitet. Kunnskapen om disse nye målene kan forbedre våre diagnostiske verktøy og kan bidra til å utvikle målrettede terapier.