Biomarker bei Polyradikuloneuropathien (BIP)

Hintergrund: Entzündliche demyelinisierende Polyradikuloneuropathien sind seltene Autoimmunerkrankungen, die das periphere Nervensystem betreffen. Diese Neuropathien können akut sein, wenn sich die Anzeichen und Symptome in weniger als 1 Monat verstärken (Guillain-Barré-Syndrom, GBS), oder chronisch, wenn sich die Verschlechterungen über mehr als 2 Monate nach Beginn fortsetzen (CIDP). Etwa die Hälfte der GBS-Patienten weist IgG1- oder IgG3-Anti-Gangliosid-Antikörper auf. Ganglioside sind Glykolipidstrukturen, die hauptsächlich in den Knoten- und Paranodenbereichen lokalisiert sind. Bei CIDP-Patienten werden IgG4-Autoantikörper gegen nodale (Nfasc-186) oder paranodale (Nfasc-155, CNTN1, Caspr-1) Proteine ​​in 5 bis 10 % gefunden. Bei den meisten GBS- und CIDP-Patienten ist das antigene Ziel unbekannt, und klinische Biomarker fehlen dringend, um die Diagnose und Behandlungsorientierung zu unterstützen. Ziel der vorliegenden Studie ist es, neue Biomarker bei AIDP- und CIDP-Patienten zu identifizieren.

Methoden: Die Forscher führen eine nationale retrospektive und prospektive Studie durch, um neue antigene Ziele bei GBS- und CIDP-Patienten zu identifizieren. Seit 2015 sammeln das Institut für Neurowissenschaften von Montpellier und die Universitätskliniken von Montpellier klinische, immunologische, elektrophysiologische und histologische Daten von GBS- und CIDP-Patienten. Jeder Patient, dessen Serum bereits gesammelt wurde, gab sein schriftliches Einverständnis. GBS und CIDP werden nach den aktuellen Kriterien diagnostiziert. Anti-Gangliosid-Antikörper (durch Immundot-Blot) und Anti-Nfasc155-, -CNTN1-, -Nfasc186- und -Caspr-1-Antikörper (durch ELISA und Zellbindungsassay) werden bei GBS- bzw. CIDP-Patienten untersucht. Unter den CIDP-Patienten mit monoklonaler Gammapathie sind solche mit Anti-MAG-Antikörpern, zunehmendem VEGF, AL-Amyloidose und Neurolymphomatose ausgeschlossen. Patientenserum wird auch durch immunhistochemische Färbung auf Wildtyp- und GalNacT –/– -Maus-Ischiasnervfasern getestet.

Klinische und elektrophysiologische Phänotypen werden zwischen Patienten mit positiver und negativer Immunfärbung verglichen. Lokalisierung der Färbung (d.h. Ranvier-Knoten, paranodale Region und/oder Myelinscheide) als Unterklasse und Isotyp des Autoantikörpers angegeben.

Die Suche nach einem neuen antigenen Ziel wird bei GBS- und CIDP-Patienten durchgeführt, die i) seronegativ für Antiganglioside und Anti-Nfasc155-, -CNTN1-, -Nfasc186- und -Caspr-1-Antikörper sind und ii) eine positive Immunfärbung auf Wild- Typ und GalNacT-/- Maus-Ischiasnervenfasern. Dann werden Seren dieser ausgewählten Patienten mit neuronalen und glialen Zellen in Kultur (spinale dorsale Ganglien, Motoneuronen, Schwann-Zellen, Oligodendrozyten und neokortikale Neuronen) inkubiert. Im Falle einer Positivität gegen Zellkultur wird eine Immunpräzipitation durchgeführt und der Antigen/Antikörper-Komplex wird auf SDS-PAGE 4-12% Gel aufgetrennt und elektrophoretische Banden werden durch Massenspektrometrie analysiert.

Ziel dieser Studie ist es, neue antigene Targets bei seronegativen GBS- und CIDP-Patienten mit Immunreaktivität zu identifizieren. Das Wissen um diese neuen Targets könnte unsere diagnostischen Werkzeuge verbessern und bei der Entwicklung zielgerichteter Therapien helfen.