Naprokseenin farmakogeneettinen tutkimus (projekti 1, tavoite 2)

Tämä farmakogeneettinen tutkimus testaa hypoteesia, jonka mukaan CYP2C9-geenin M1L-variantin periytyminen, joka löydettiin ensimmäisen kerran Yup'ik Alaskan alkuperäiskansoilla, aiheuttaa täydellisen toiminnan menetyksen CYP-2C9-riippuvaisessa katalyyttisessä aktiivisuudessa.

Tutkimukseen osallistujat valitaan yli 750 Yup'ik-miehen ja -naisen poikkileikkauspopulaatiosta, joka on yli 18-vuotias ja joille on jo määritetty CYP2C9-genotyyppi osana SNP-löytötutkimusta ja jotka suostuivat ottamaan yhteyttä tulevaa tutkimusta varten. . Mukaan tulee 15 osallistujaa kussakin kahdessa genotyyppiryhmässä ((1) Met1/Met1 ja (2) Met1/Leu1 tai Leu1/Leu1, yhteensä 30 osallistujaa. Kaksi ryhmää sovitetaan osallistujien sukupuolen mukaan; vähiten esiintyvän Leul-kantajaryhmän kokoonpanon määräämä osuus. Tutkijat yrittävät rekrytoida samanlaisen ikäryhmän jokaiseen genotyyppiryhmään ja mahdollisimman laajan valikoiman. Rekrytointi tapahtuu yhdessä kymmenestä Yukon-Kuskokwimin suiston yhteisöstä, jotka osallistuivat alkuperäiseen SNP-löytötutkimukseemme.

Osallistujia pyydetään paastoamaan yön yli ennen tutkimusta, ja heidän annetaan syödä ad libitum 2 tuntia naprokseenin ottamisen jälkeen. Jokaiselta osallistujalta otetaan 13 ml:n paastolaskimoverinäyte DNA:n ja plasman eristämiseksi. Pistevirtsa kerätään jokaiselta osallistujalta analyyttisenä kontrollina verenottoaamuna. Noin klo 9.00 jokaiselle osallistujalle annetaan yksi 220 mg:n Naproxen-annos suun kautta vesilasillisen kera. Osallistuja kerää seuraavan 24 tunnin kokonaisvirtsan ja palauttaa sen klinikalle seuraavana päivänä. Virtsan tilavuus mitataan ja kirjataan, ja kaksi 5 ml:n alikvoottia jäädytetään -80 °C:seen ja säilytetään muuttumattomana lääke- ja metaboliittianalyysiä varten.

Kokonais (konjugoitu ja konjugoitumaton) 6-O-desmetyylinaprokseenin ja muuttumattoman naprokseenin pitoisuudet virtsassa mitataan LC-MS/MS:llä. Virtsaan 24 tunnin aikana erittyneen 6-O-desmetyylinaprokseenin/naprokseenin (M/P) kokonaismäärän suhde lasketaan. 6-O-desmetyylinaprokseeni muodostuu selektiivisesti CYP2C9:n vaikutuksesta.

Keskimääräisten M/P-suhteiden parivertailu, olettaen, että varianssi on epätasainen, arvioidaan käyttämällä t-testiä sen määrittämiseksi, onko Leu 1 -variantin kantajien aktiivisuudessa merkittäviä eroja. Näytteen koko tarjoaa 80 % tehon eron havaitsemiseen merkitsevyystasolla 0,05.