Pharmakogenetische Naproxen-Studie (Projekt 1, Ziel 2)

Diese pharmakogenetische Studie wird die Hypothese testen, dass die Vererbung einer M1L-Variante im CYP2C9-Gen, das erstmals bei den Ureinwohnern der Yup'ik Alaska entdeckt wurde, einen vollständigen Funktionsverlust der CYP-2C9-abhängigen katalytischen Aktivität verursacht.

Die Studienteilnehmer werden aus einer Querschnittspopulation von >750 Yup'ik-Männern und -Frauen im Alter von ≥18 Jahren ausgewählt, für die der CYP2C9-Genotyp bereits im Rahmen einer SNP-Entdeckungsstudie bestimmt wurde und die zugestimmt haben, für zukünftige Forschungsarbeiten kontaktiert zu werden . Es gibt 15 Teilnehmer in jeder der zwei genotypisierten Gruppen ((1) Met1/Met1 und (2) Met1/Leu1 oder Leu1/Leu1), also insgesamt 30 Teilnehmer. Die beiden Gruppen werden nach Geschlecht der Teilnehmer abgeglichen; der Anteil bestimmt sich durch die Zusammensetzung der am wenigsten häufigen Leu1-Trägergruppe. Die Ermittler werden versuchen, in jeder genotypisierten Gruppe einen ähnlichen Altersbereich und einen möglichst breiten Bereich zu rekrutieren. Die Rekrutierung erfolgt in einer von 10 Gemeinden im Yukon-Kuskokwim-Delta, die an unserer ursprünglichen SNP-Entdeckungsstudie teilgenommen haben.

Die Teilnehmer werden gebeten, vor der Studie über Nacht zu fasten und dürfen 2 Stunden nach der Einnahme von Naproxen nach Belieben essen. Eine nüchterne venöse Blutprobe von 13 ml wird von jedem Teilnehmer zur Isolierung von DNA und Plasma entnommen. Als analytische Kontrolle wird am Morgen der Blutentnahme von jedem Teilnehmer Spot-Urin gesammelt. Gegen 9:00 Uhr erhält jeder Teilnehmer eine 220-mg-Einzeldosis Naproxen oral mit einem Glas Wasser. Die gesamte Urinausscheidung der nächsten 24 Stunden wird vom Teilnehmer gesammelt und am nächsten Tag in die Klinik zurückgebracht. Das Urinvolumen wird gemessen und aufgezeichnet, und zwei 5-ml-Aliquots werden bei -80 °C eingefroren und für unveränderte Drogen- und Metabolitenanalyseanalysen aufbewahrt.

Die Gesamtkonzentrationen von (konjugiertem und unkonjugiertem) 6-O-Desmethyl-Naproxen und unverändertem Naproxen im Urin werden mittels LC-MS/MS gemessen. Es wird ein Verhältnis des gesamten über 24 Stunden im Urin ausgeschiedenen 6-O-Desmethyl-Naproxen/Naproxen (M/P) berechnet. 6-O-Desmethylnaproxen wird selektiv von CYP2C9 gebildet.

Ein paarweiser Vergleich der mittleren M/P-Verhältnisse wird unter der Annahme einer ungleichen Varianz unter Verwendung eines t-Tests ausgewertet, um zu bestimmen, ob es signifikante Unterschiede in der Aktivität für Träger der Leu 1-Variante gibt. Der Stichprobenumfang bietet eine 80-prozentige Trennschärfe zum Erkennen eines Unterschieds bei einem Signifikanzniveau von 0,05.