Prédicteurs génétiques et alimentaires de la réponse antiplaquettaire

Objectif : Dans ce but, les chercheurs testeront l'hypothèse selon laquelle les AGPI n-3 modifient la réponse antiplaquettaire de l'aspirine, en mesurant et en comparant trois indicateurs différents de la réponse à l'aspirine chez les individus présentant des niveaux extrêmement élevés et faibles d'AGPI n-3 érythrocytaires, sous un état basal et après 1 semaine de traitement à l'aspirine une fois par jour. Les trois indicateurs sont : 1) les concentrations plaquettaires de TXB2 et de 20-HETE ; 2) agrégation plaquettaire ex vivo (en réponse à des stimuli externes) ; et 3) adduit covalent d'aspirine de COX-1. Les chercheurs testeront également si oui ou non les variantes communes des gènes CYP4A11, CYP4F2, CYP4F11, PEAR1 et ACTN1 sont associées à des changements basaux et induits par l'aspirine dans l'agrégation plaquettaire et, dans une analyse exploratoire, modifieront les effets des AGPI n-3 sur réponse à l'aspirine.

Procédures et population : Les chercheurs de l'Université du Montana, de la Southcentral Foundation et de l'Oregon Health & Science University recruteront un total de 150 personnes (50 sur chaque site) pour participer à l'étude. Sur chaque site de performance, les participants recrutés représenteront 25 individus avec des concentrations élevées et 25 individus avec de faibles concentrations d'AGPI n-3 érythrocytaires. Après avoir fourni son consentement écrit, chaque participant à l'étude sera soumis à un examen des antécédents médicaux et à des tests de laboratoire cliniques pour garantir une bonne santé et de bons paramètres de test hépatique, rénal et sanguin. S'il est jugé éligible, chaque participant fournira des échantillons de sang à jeun (une nuit) de 12 heures pour l'isolement du plasma, des plaquettes, des lymphocytes et des globules rouges. Un échantillon de sang séparé sera prélevé dans un tube traité au citrate pour le test d'agrégation plaquettaire à l'aide de la plate-forme PFA-100. Les fractions de sang isolées seront conservées à -80°C.

Après l'échantillonnage de base, chaque participant recevra six doses d'aspirine (80 mg/jour pendant 2 jours) et sera invité à prendre une dose par jour vers 9 h 00. Le lendemain de la dernière dose d'aspirine, le participant fournira des échantillons de sang pour des tests répétés d'agrégation plaquettaire, une analyse des lipides plaquettaires et la mesure de l'adduit covalent de l'aspirine à la COX-1, ainsi qu'un échantillon d'urine ponctuel pour confirmer la consommation d'aspirine en testant le salicylate. Pendant 24 heures avant le test d'agrégation plaquettaire, les participants à l'étude seront invités à éviter les aliments qui pourraient conduire à de faux résultats de test (par exemple, chocolat, thé, café, cola, vin rouge, bière, tomate, raisins, jus de raisin, orange et canneberge jus de fruits, ainsi que des aliments sauvages traditionnels qui comprennent des baies, des racines de plantes, des légumes verts, etc.).

Méthodes d'analyse : Le sang total, le point de service, les tests d'agrégation plaquettaire seront effectués à l'aide de l'instrument automatisé PFA-100. Les performances du personnel de recherche seront comparées tête à tête aux services d'essais cliniques de chaque site, à titre de mesure de contrôle de la qualité. Dans chaque contexte de test, les enquêteurs obtiendront des résultats en double pour les cartouches de collagène/épinéphrine et de collagène/ADP. Les enquêteurs mesureront également les concentrations plaquettaires de TXB2, 20-HETE et AA, par LC-MS/MS. De plus, les chercheurs développeront et emploieront une méthode pour quantifier l'adduit covalent de l'aspirine de la COX-1 dans les plaquettes isolées des participants à l'étude.

Méthodes statistiques : pour chaque population étudiée et les sous-groupes présentant des phénotypes extrêmes d'AGPI n-3 érythrocytaires, les enquêteurs utiliseront des modèles de régression linéaire avec des erreurs standard robustes pour identifier les différences significatives dans les résultats moyens absolus des tests d'agrégation plaquettaire dans des conditions basales et traitées à l'aspirine ( critère de jugement principal), ainsi que le changement de l'agrégation plaquettaire entre le traitement et la valeur initiale. L'hétérogénéité entre les paires de sous-groupes de phénotypes extrêmes sera prise en compte en incluant le sexe, l'âge, l'IMC et le nombre de plaquettes comme covariables dans le modèle de régression. Le calcul de la taille de l'échantillon pour chaque site de performance (n = 25 par sous-groupe d'AGPI n-3) était basé sur une puissance d'au moins 0,8 pour détecter une différence d'agrégation plaquettaire moyenne entre les deux extrêmes (centiles 0-10 et 90-100) n -3 sous-groupes d'AGPI dans des conditions de base, à un seuil de signification de 0,05. Comme deuxième niveau d'analyse, pour chaque sous-groupe des phénotypes extrêmes d'AGPI n-3 érythrocytaires, les chercheurs compareront également les concentrations moyennes de TXB2 et de 20-HETE dans les conditions basales et traitées à l'aspirine, ainsi que le post-traitement à -changement de base. Enfin, un troisième niveau d'analyse consistera à tester chaque population d'étude pour une différence dans l'étendue de l'adduit de l'aspirine à la COX-1 entre les groupes avec des phénotypes extrêmes d'AGPI n-3 RBC. Les chercheurs testeront les associations entre les résultats des tests d'agrégation plaquettaire et les mesures biochimiques de l'activation plaquettaire, chaque population étudiée séparément et globalement.

Les chercheurs utiliseront des modèles de régression linéaire pour tester une association entre les génotypes communs CYP4A11, CYP4F2, CYP4F11, PEAR1 et ACTN1 et les résultats moyens absolus des tests d'agrégation plaquettaire dans des conditions basales et traitées à l'aspirine, ainsi que le post-traitement à- changement de base de l'agrégation plaquettaire. Dans une analyse exploratoire, les chercheurs appliqueront des modèles linéaires à effets mixtes (LME) à l'ensemble de données combiné avant et après traitement pour tester les associations avec le groupe d'AGPI n-3 et les effets des médicaments, ainsi que pour identifier toute modification de ces effets. par CYP4A11, CYP4F2, CYP4F11, PEAR1 et ACTN1 en incluant et en testant les effets d'interaction significatifs dans les modèles. Les chercheurs incluront des effets aléatoires dans le LME pour tenir compte de l'hétérogénéité potentielle dans chacune des populations.